在应用Elisa法检测Igm类抗-M2抗体时可能出现的假阳性反应结果及其预防
(Hepatol Res 2001;20(3):279-287)
8月15日 日本Teikyo大学医学院的Miyakawa H等人发现,使用IgM类抗-M2 ELISA法检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)可能出现假阳性,通过稀释血清及添加适量的封闭剂可成功防止出现假阳性。
抗线粒体抗体抗-M2被认为是出现在PBC患者体内的一种特异性的自身抗体。IgG类和IgM类抗-M2抗体可分别通过各自的ELISA法进行测量。在最近的一项研究中,研究人员发现,当使用IgM抗-M2 ELISA法时,一些非PBC如急性甲型肝炎、梅毒和类风湿性关节炎患者的血清中出现了假阳性的反应结果:即在上述患者的血清中分别出现了多克隆IgM水平的增高,IgM抗心磷脂阳性和类风湿因子阳性。
为防止出现假阳性反应,研究人员首先在按照原实验方法对被测血清进行1:100稀释的前提下,再将血清按照1:1000的比例进行稀释;然后在缓冲系统中加入一些封闭剂。通过稀释血清,绝大多数标本中的非特异性结合将消失,而多克隆IgM水平的增高不会表现出来。此外,向缓冲系统中加入适量的封闭剂,如胎牛血清(FBS)和脱脂奶粉,可预防非特异性结合的发生。研究人员的实验结果显示,通过对血清进行稀释以及添加适量的封闭剂可成功防止在应用IgM抗-M2 ELISA法时出现的假阳性反应。
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抗线粒体抗体抗-M2被认为是出现在PBC患者体内的一种特异性的自身抗体。IgG类和IgM类抗-M2抗体可分别通过各自的ELISA法进行测量。在最近的一项研究中,研究人员发现,当使用IgM抗-M2 ELISA法时,一些非PBC如急性甲型肝炎、梅毒和类风湿性关节炎患者的血清中出现了假阳性的反应结果:即在上述患者的血清中分别出现了多克隆IgM水平的增高,IgM抗心磷脂阳性和类风湿因子阳性。
为防止出现假阳性反应,研究人员首先在按照原实验方法对被测血清进行1:100稀释的前提下,再将血清按照1:1000的比例进行稀释;然后在缓冲系统中加入一些封闭剂。通过稀释血清,绝大多数标本中的非特异性结合将消失,而多克隆IgM水平的增高不会表现出来。此外,向缓冲系统中加入适量的封闭剂,如胎牛血清(FBS)和脱脂奶粉,可预防非特异性结合的发生。研究人员的实验结果显示,通过对血清进行稀释以及添加适量的封闭剂可成功防止在应用IgM抗-M2 ELISA法时出现的假阳性反应。
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