肝细胞移植的现状与展望
http://www.100md.com
2000年3月20日
美国加利福尼亚大学 肝支持和组织工程实验室
常位肝移植挽救了许多终末期肝病病人的生命，但费用高，技术复杂，供体肝严重短缺，即使采用分肝肝移植(将肝脏一分为二，分别移植给2例病人)仍供不应求，很多病人在等待供肝时死亡。动物实验证明，肝细胞移植可改善急性暴发性肝衰和先天性代谢性肝病动物模型的肝功能(尽管是暂时的)和预后。20年来细胞生物学、组织培养技术及生物技术的进展为肝细胞移植创造了条件。
在理论上，似乎肝是肝细胞移植的理想部位，现在公认在腹膜腔和脾脏移植最好，因为操作简单，创伤校和脾脏相比，腹膜腔还有1个优点，即可以移植更多的肝细胞。
历史回顾
日本Ebata将肝细胞悬液注入同系动物的脾脏，完成了首次肝细胞移植实验。1年后脾脏“肝脏化”，移植肝细胞在脾脏内正常工作了1年以上，并纠正了Gunn大鼠因遗传性葡糖醛酰转移酶缺乏造成的高间接胆红素血症。Gunn大鼠相当于人的Crigler_Najjar综合征。此外，脾脏只能容纳正常肝组织的3%，虽然它足以纠正先天性异常，但不一定能让严重肝衰病人生存下去。还必须指出，如果移植的不是同系肝细胞，需应用免疫抑制剂。
, 百拇医药
早期腹腔肝细胞移植效果并不理想，主要是因为肝细胞需要附着，而在腹腔内又无适合肝细胞附着的部位，因此游离肝细胞在腹腔内寿命很短。随着微载体和微囊化技术的出现情况才发生了改变，肝细胞的寿命延长了，使数种严重肝病动物模型的肝功能获得了改善。由于微囊的半透膜为细胞免疫和体液免疫提供了1个免疫隔离屏障，所以移植微囊化肝细胞后不需要免疫抑制治疗，但移植附着在微载体的肝细胞后需用免疫抑制剂。
研究现状
迄今为止接受肝细胞移植的病人不到20例，所有研究均为非对照病例报告。印度报告了首例病人，1例暴发性肝衰病人接受了人胎肝细胞腹腔移植。肝细胞移植的效果取决于肝损伤程度，轻中度脑病病人的效果比严重脑病病人好，肝功能极差的病人(凝血酶原时间≥正常2倍)接受肝细胞移植并不能挽救生命。上述结果提示，如果在暴发性肝衰早期接受治疗，有望获得较好疗效。
以后美国报道了11例病人，证明肝细胞移植对等待肝移植的终末期肝病病人只有暂时疗效，提示肝细胞移植可以作为肝移植的过渡措施。其他一些研究也证明肝细胞移植的疗效，但病人的生存率差。这些研究移植的肝细胞数(10 6～10 10个)和质量(成活力50%～80%，新鲜肝细胞或冷冻保存肝细胞等)差异极大。最近内布拉斯加大学(美国)的研究者证明遗传性代谢性疾病(如Crigler_Najjar综合征)可用肝细胞移植有效治疗，但移植肝细胞寿命不长，所以必须反复移植才能维持疗效，延长病人的生命。
, 百拇医药
展望
为使肝细胞移植成为可以取代肝移植的有效治疗方法，首先必须有效，其次要操作简便，最后还必须有大量健康肝细胞。如果有血库那样的设施来贮存肝细胞，供需要时应用最为理想。但悬浮液中的游离肝细胞比其他细胞敏感得多，易在处理过程中受损伤。此外，细胞需要附着，悬浮游离肝细胞不能很好地贮存。在组织培养中肝细胞在数天内开始分化，所以不能长期维持肝细胞原代培养。
冷冻保存是保存骨髓和各种细胞系的标准方法。肝细胞较脆弱，普通冷冻保存方法可给肝细胞造成相当大的损伤。现有保存肝细胞的方法非常繁琐，需要昂贵的程控低温冰箱。冰冻保存微囊化肝细胞可不受损伤。因此，微囊化和冰冻保存是简单、方便、经济的保存肝细胞方法。此外冰冻保存的微囊化肝细胞在体内和体外的功能和新鲜、非冷冻微囊化肝细胞相同。
移植健康肝细胞治疗肝脏病对器官置换治疗亦有重要意义。与全肝移植相比，肝细胞移植技术较简单，因此有很多优点。例如将来病人的亲属有可能贡献少量肝细胞进行移植，或用一个肝脏来治疗很多病人。和肝脏不同，肝细胞可以冷冻保存以备将来应用。
肝细胞移植仍处于初期阶段，为了比较和评估肝细胞移植的效果，必须确定治疗的终点指标。统一移植肝细胞数，现在研究者使用的肝细胞数量和质量差异极大，必须做对照研究，建立可重复的可靠肝病动物模型。
将来研究的另一领域是胎肝组织的利用。移植胎儿组织的优点是不需配型和用免疫抑制剂，但需要解决伦理问题。组织工程研究提示，有可能用卵圆细胞(即肝干细胞)制造肝组织；而精心选择肝细胞附着在基质和聚合物载体(支架)有可能制造出人工肝组织的生物型人工基质。先天性代谢性肝病的其他支持治疗还有基因治疗。理论上可以将功能基因插入有缺陷的肝细胞，提供其欠缺的功能。由于它可以做自身肝细胞移植，不需用免疫抑制剂，所以很有吸引力。, http://www.100md.com
常位肝移植挽救了许多终末期肝病病人的生命，但费用高，技术复杂，供体肝严重短缺，即使采用分肝肝移植(将肝脏一分为二，分别移植给2例病人)仍供不应求，很多病人在等待供肝时死亡。动物实验证明，肝细胞移植可改善急性暴发性肝衰和先天性代谢性肝病动物模型的肝功能(尽管是暂时的)和预后。20年来细胞生物学、组织培养技术及生物技术的进展为肝细胞移植创造了条件。
在理论上，似乎肝是肝细胞移植的理想部位，现在公认在腹膜腔和脾脏移植最好，因为操作简单，创伤校和脾脏相比，腹膜腔还有1个优点，即可以移植更多的肝细胞。
历史回顾
日本Ebata将肝细胞悬液注入同系动物的脾脏，完成了首次肝细胞移植实验。1年后脾脏“肝脏化”，移植肝细胞在脾脏内正常工作了1年以上，并纠正了Gunn大鼠因遗传性葡糖醛酰转移酶缺乏造成的高间接胆红素血症。Gunn大鼠相当于人的Crigler_Najjar综合征。此外，脾脏只能容纳正常肝组织的3%，虽然它足以纠正先天性异常，但不一定能让严重肝衰病人生存下去。还必须指出，如果移植的不是同系肝细胞，需应用免疫抑制剂。
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早期腹腔肝细胞移植效果并不理想，主要是因为肝细胞需要附着，而在腹腔内又无适合肝细胞附着的部位，因此游离肝细胞在腹腔内寿命很短。随着微载体和微囊化技术的出现情况才发生了改变，肝细胞的寿命延长了，使数种严重肝病动物模型的肝功能获得了改善。由于微囊的半透膜为细胞免疫和体液免疫提供了1个免疫隔离屏障，所以移植微囊化肝细胞后不需要免疫抑制治疗，但移植附着在微载体的肝细胞后需用免疫抑制剂。
研究现状
迄今为止接受肝细胞移植的病人不到20例，所有研究均为非对照病例报告。印度报告了首例病人，1例暴发性肝衰病人接受了人胎肝细胞腹腔移植。肝细胞移植的效果取决于肝损伤程度，轻中度脑病病人的效果比严重脑病病人好，肝功能极差的病人(凝血酶原时间≥正常2倍)接受肝细胞移植并不能挽救生命。上述结果提示，如果在暴发性肝衰早期接受治疗，有望获得较好疗效。
以后美国报道了11例病人，证明肝细胞移植对等待肝移植的终末期肝病病人只有暂时疗效，提示肝细胞移植可以作为肝移植的过渡措施。其他一些研究也证明肝细胞移植的疗效，但病人的生存率差。这些研究移植的肝细胞数(10 6～10 10个)和质量(成活力50%～80%，新鲜肝细胞或冷冻保存肝细胞等)差异极大。最近内布拉斯加大学(美国)的研究者证明遗传性代谢性疾病(如Crigler_Najjar综合征)可用肝细胞移植有效治疗，但移植肝细胞寿命不长，所以必须反复移植才能维持疗效，延长病人的生命。
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展望
为使肝细胞移植成为可以取代肝移植的有效治疗方法，首先必须有效，其次要操作简便，最后还必须有大量健康肝细胞。如果有血库那样的设施来贮存肝细胞，供需要时应用最为理想。但悬浮液中的游离肝细胞比其他细胞敏感得多，易在处理过程中受损伤。此外，细胞需要附着，悬浮游离肝细胞不能很好地贮存。在组织培养中肝细胞在数天内开始分化，所以不能长期维持肝细胞原代培养。
冷冻保存是保存骨髓和各种细胞系的标准方法。肝细胞较脆弱，普通冷冻保存方法可给肝细胞造成相当大的损伤。现有保存肝细胞的方法非常繁琐，需要昂贵的程控低温冰箱。冰冻保存微囊化肝细胞可不受损伤。因此，微囊化和冰冻保存是简单、方便、经济的保存肝细胞方法。此外冰冻保存的微囊化肝细胞在体内和体外的功能和新鲜、非冷冻微囊化肝细胞相同。
移植健康肝细胞治疗肝脏病对器官置换治疗亦有重要意义。与全肝移植相比，肝细胞移植技术较简单，因此有很多优点。例如将来病人的亲属有可能贡献少量肝细胞进行移植，或用一个肝脏来治疗很多病人。和肝脏不同，肝细胞可以冷冻保存以备将来应用。
肝细胞移植仍处于初期阶段，为了比较和评估肝细胞移植的效果，必须确定治疗的终点指标。统一移植肝细胞数，现在研究者使用的肝细胞数量和质量差异极大，必须做对照研究，建立可重复的可靠肝病动物模型。
将来研究的另一领域是胎肝组织的利用。移植胎儿组织的优点是不需配型和用免疫抑制剂，但需要解决伦理问题。组织工程研究提示，有可能用卵圆细胞(即肝干细胞)制造肝组织；而精心选择肝细胞附着在基质和聚合物载体(支架)有可能制造出人工肝组织的生物型人工基质。先天性代谢性肝病的其他支持治疗还有基因治疗。理论上可以将功能基因插入有缺陷的肝细胞，提供其欠缺的功能。由于它可以做自身肝细胞移植，不需用免疫抑制剂，所以很有吸引力。, http://www.100md.com