有机盐一般鉴别方法
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《化学分析概述》
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有机盐一般鉴别方法
(三十六)哌生物碱类
供品约为10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，即得黄色的残渣，放冷，加取乙醇制氯化钾试液3-3滴，即湿深紫色。
, 百拇医药 (三十七)芳香第一胺类
取供试品约5mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加M/10亚硝酸钠液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴视供试品不同，发生由橙黄到猩红色沉淀。如普鲁卡因。
普鲁卡因，苯佐卡因及磺胺类药物均呈此反应。
(三十八)苯酚(酚羟基反应)
(1)取供试品溶液1滴，加三氯化铁试液2滴，呈紫堇色。
(2)取供试品1滴，加溴试液，生成黄色白色沉淀。
根据不同的酚羟基物质呈现蓝色、绿色、紫色等。肾上腺素、吗啡、雷琐辛及水亿酸盐等呈此反应。
(三十九)玫瑰药青素(Rosecranine)
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取供试品溶液，加硫酸混合后，加甲醇，点火燃烧，即发生边缘带绿色的火焰。
B4O72-+H2SO4+5H2O→4H3BO3+SO42-
H3BO3+3CH3OH→(CH3)3BO3+3H2O
(四十)丙二酰脲类
(1)取供试品约0.1g加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，滤液中逐渐滴加入硝酸银试液，即发生白色沉淀，振摇，沉淀溶解，继续滴加过量的硝银试液，沉淀不再溶解。
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(2)丙二酰类分子中含有一CONHCONHCO-的结构，与铜盐作用能产生类似双缩脲的颜角反应，与吡啶和硫酸铜溶液作用，显紫色(ZW-ikker反应)。
(四十一)乙醇基(C2H5O-)及甲基酮(CH3CO-)
取供试品溶液，加入碘试液及氢氧化钾试液，稍加温后，即生成特殊臭的碘仿，量大时可生成黄色的碘仿沉淀。乙醇、苯佐卡因、优奎宁，普卡因狄奥宁等均呈此反应。
C2H5OH+4I2+6KOH→CHI3↓+5DI+HCOOK+5H2O
CH3·CO-R+3I2+4KOH→CHI3↓+RCOOK+3KI+3H2O
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(四十二)乙酰基(CH3COO-R)
取供试品溶液，加乙醇2～3滴及硫酸2ml，加热，即发生乙酸乙酯的香气。乙酰胂胺、乙酰唑胺及冰醋酸等均呈此反应。
(四十三)生物碱沉淀反应。
取供试品加水(或酸性水溶液)溶解后，滴加碘一碘化钾试液或碘化钾试液，即形成沉淀。生物碱及季铵等均呈此反应；如咖啡因，用盐酸酸化，加碘化铋钾试液，生成棕红色沉淀。
BH+KbiI4→BH·BiI4
而可待因的沉淀级成为(BH)(BiI4)I2
(四十四)卤素化合物的反应
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取铜片于无色的火焰中，加热后放冷，蘸取供试品少许，再置无色火焰中燃烧，即显绿色火焰。
一溴樟脑及水合氯醛等卤素化合物均呈此反应(极为灵敏)。
(四十五)还原糖反应
取碱性酒石酸铜试液，加放供试品，缓缓加热，即生成氧化亚铜的红色沉淀。
CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4
葡萄糖、果糖及水解邱的乳糖和丁均呈此反应。其它如维生素C及含有20一酮一21羟基甾体(如化泼尼松、氟美松、氟氢可的松及肤因松等)，因其具有还原性，亦有此反应。
(四十六)氨基酸、肽类、蛋白质纸层析呈色反应。
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用0.2%茚三酮乙醇溶液鉴别，反应灵敏，层析滤纸等不宜用手指多接触，亦不宜与氨气接触，否则纸背呈红色。
茚三酮不仅与α氨基酸作用，也与某些β氨基酸和伯、仲脂肪胺等作用，生成相似的有色物质。对脂肪族叔胺或芳无作用。对多肽也能显色，但肽越大度越低。吲哚醌试剂也有相似作用，其灵敏度不及茚三酮高。但对不同氨基显不同色调。
茚三酮反应原理：对α氨基酸先起氧化，脱氨化应之分解成氨，二氧化碳和醛，茚三酮本身被还原，再与生成的氨缩合成紫色物质。
吲哚醌与α氨基酸反应：对辅氨酸、组氨酸呈蓝色；对色氨酸、甲硫氨基酸呈绿色；对亮氨酸、丝氨酸呈红色等。对一些小肽也能显色，但肽越大灵敏芳越低，色差也小，接近黄色。
(四十七)甾体类、三萜类
甾体类、三萜类的显色剂，均属酸类，其中有强酸如硫酸、磷酸、氯磺酸高氯酸、三氟乙酸；中等强度的酸如三氯乙酸，也有三氯化锑、二氯化锌等Lewis氏酸。
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挥发油属萜类，若油斑未消失前，喷5%香蓝醛的浓盐酸试液后，可呈现黄、红、蓝等色。油脂无此反应。
试剂 | 一 | NH3 | AICI3 | Na2CO3 | |||||
, http://www.100md.com 光线 | ViS. | U.V | ViS. | U.V | ViS. | U.V | ViS. | U.V | |
, 百拇医药 化 合 物 | 黄酮 | 淡黄 | 暗棕、红棕、黄棕 | 黄 | 亮黄 | 淡黄 | 亮黄 | ||
, 百拇医药 黄酮醇 | 淡黄 | 亮黄、黄绿、棕 | 黄 | 亮黄、黄绿、绿 | 黄 | 黄、黄棕、暗蓝 | |||
异黄酮 | 无色 | , 百拇医药 淡黄、紫 | 无色 | 淡黄、紫 | 无色 | 淡绿 | |||
儿茶精 | 无色 | 无色 | 无色 | , 百拇医药 淡蓝黑 | 无色 | ||||
二氢黄酮 | 无色 | 无色** | 无色 | 无色、淡黄、淡绿 | 无色 | , 百拇医药 淡黄、绿 | |||
花色甙 | 红、橙紫 | 深红、橙紫、淡棕 | 蓝 | 暗蓝 | |||||
查耳酮 | 黄 | , 百拇医药 棕、黑、黄棕 | 黄、橙、红 | 橙、红、紫黑 | 黄、橙 | 橙*、棕、红 | 橙、蓝红 | ||
*示有荧光**示在短波紫外线光下为黑色ViS.系可风光U.V系紫外光
6.蒽醌及其甙类取检品的乙醇溶液10ml，蒸去乙醇，残渣加5%氢氧化钠溶液2-3ml，在沸水中加15分钟，冷后滤过，滤液加稀盐酸酸化，加乙醚提取，取乙醚提取液做下列检查：
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(1)碱液试验：取上述乙醚溶液，加等量1%氢氧化钠溶液，摇匀，水层呈现红色，加入少许3%过氧化氢溶液，在沸水浴中加热4分钟，红色不裉，当加酸酸化后，红色消失。加碱碱化后红色又出现(蒽醌类化合物反应)。
1，8一二羟基蒽醌的酚羟基遇氢氧化钠生成钠盐，而呈现红色，遇酸显黄色。
【注】蒽醌和二蒽酮与碱液不显红色，只呈黄色，但以氧化羟基蒽醌后遇碱即显红色。
(2)醋酸镁试验：取上述醚溶液1ml，蒸去乙醚，残渣加入乙醇1ml溶解，加入1%醋酸镁甲醇溶液3滴，显红色(如显橙黄色可能为二氢蒽醌)。
羟基蒽醌类与醋酸镁甲醇溶液反应可显橙、红、蓝、紫等色，产生这些颜色的必要投机倒把至少有一个α位羟基。加羟基的位置不同，产生的颜色也不同。一般在同一苯环上有两个α羟基者显紫红色或蓝色；如同一苯环在有两个邻位的羟基，一个α位，一个β位，显紫色或紫锴。其他α羟基蒽醌一般呈橙至红色。因此这一颜色反应仅可作蒽醌的检只识用，而且还可初步判断羟的基的位置。
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【注】醋酸镁试验亦可用滤纸斑点显色法进行。
(3)蒽醌薄微量检出反应：
①吸附剂：硅胶；中性氧化铝(Ⅲ级)；硅胶G湿法制板。
②展开剂：苯：醋酸(6：3)石油醚：丙酮：水(5：3：3：5)；苯甲酸酯：甲酸(74：24：1)。
③显色剂；5%氢氧化钠液(显红色)；1%醋酸镁甲醇溶液(显黄色)。
此外亦可在紫外灯光下观察荧光。
7.强心甙
(1)3，5一二硝基苯甲酸试验(Kedde’s反应)：取检品的乙醇溶液2
ml，加3，5一一硝基苯甲酸试液3-4滴再加10%氢氧化钠溶液2滴，呈现红色或紫红色(9为α、β不饱和内酯环强心甙的反应)。
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(2)碱性苦味酸试验：取检品的醇溶液1ml，显橙色或橙红色(此反应常在15分钟后，显色最明显)。
(3)亚硝酰铁氰化钠试验(Legal反应)：取检品的醇溶液1ml，蒸去溶剂，放冷后，加吡啶少许使残渣溶解，加0.5%亚铁试液4-6滴，摇匀，再加入10%氢氧化钠1-2滴，即显红色并逐渐消失(为检查强心甙元的反应)。
(4)三氯化铁水醋酸试验(Keller反应)：取检品的乙醇溶液2ml，蒸去溶剂，残渣加0.5%三氯化铁冰醋酸溶液1ml，使溶解后，沿试管壁加入浓硫酸1ml，在两液界面显红棕色环，继则变为浅绿、蓝色，而冰醋酸层显蓝色，示含α去氧糖强心甙。
(5)醋酐一浓硫本试验(Liebirman
Barchard 反应)：取检品的乙醇溶液2
ml，置蒸发皿中，于水浴上蒸干，残渣加冰醋酸1ml使溶解，再加入醋酐一浓硫酸(19：1)数滴，呈现黄→红→蓝→紫→污绿色，并逐渐裉色。因颜色变化很快，须注意观察(为检查强心甙分子结构中甾体母核的反应)。
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【注】①试验1，2，3，的反应，均系在较强的碱性条件下进行，当有蒽醌存在时，须先将检液置水浴上蒸去乙醇，再加乙醚适量，用1%氢氧化钠溶液反复萃除蒽醌(弃去红色碱液)，然后将乙醚溶液于水浴上蒸去乙醚
，残渣再用乙醇溶解后，供试验用，以免干扰。
②试验4的反应仅对游离的去氧糖和结合的甙呈正反应。但当α去氧糖与葡萄糖等其他糖结合的多，如不水解则为负反应。
③上述鉴别反应均呈阳性,可判断为强心甙。
8.内酯、香豆精及其甙类：取检品的乙醇溶液10m1，加5%盐酸溶液10，在沸水浴中热15-20分钟，冷后，加苯提取将苯提取液于水浴上蒸干(避火)，残渣加适量乙醇溶解后，供做下列检查：
(1)异羟肟酸铁试验：取上检液2ml，加盐酸羟试液2滴，10%氢氧化钾的甲醇溶液2滴，在水浴上微热，冷却，用稀盐酸酸化，加入15三氯化铁试剂液1-2滴，显紫色苛橙红色。
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内酯及香豆素类在碱性条件下，与羟反应生成异羟肟酸，与铁盐络合而显色。
(2)内酯试验：取上检液2ml，加1%氢氯化钠溶液2m1，在沸水浴中加热3-5分钟，如溶液较前澄明，加酸酸化后又变混浊为正反应。
内酯化合物在热碱溶液中，开环成盐而溶于水，酸化则重新闭环，而出内酯化合物，溶液即变混浊。
(3)重氮化反应：取上检液1ml，加等体积3%碳酸钠溶液，在沸水浴中加热3-4分钟，冷后，加入新配制的重氮化试剂1-2滴，即显红色。
(4)荧光反应：取上检液点于滤纸上(干后，再点1次，以集中浓度)，在紫外光灯下观察，如为羟基香豆精应呈现蓝色荧光，熏氨蒸气后变为黄绿色荧光。呋喃香豆精应呈现蓝色或黄棕色的荧光。
9.树脂类
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取检品的乙醇溶液1ml，加1-2%氢氧化钠溶液2-3ml，显浑浊或沉淀，在水浴上加3-5分钟，溶液变清或沉淀减少，加酸酸化则又浑浊或沉淀，示含有酸性树脂。如在上项反太中，当加碱加热后，溶液仍浑浊示含有中性树脂。
因酸性树脂能溶于碱液中，加热后就成澄明液。中性树脂则不溶于碱性溶液中，故溶液仍显浑浊。
10.生物碱
取检品的酸性乙醇溶液20ml，调节pH值至6-7，蒸发除去乙醇，残渣加5%盐酸溶液4-5ml溶解，滤过，滤液供下列检查：
(1)碘化铋钾试液1ml，加碘化铋钾试液1-2滴，生成黄色或橘红色沉淀。
AIK+BiI3·KI→AIK·BiI3·KI↓
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(生物碱)(碘化铋钾)
(桔红色)
(2)碘化汞试验：取滤液1ml加碘化汞钾试液1-2滴，生成白色淡黄色沉淀物。
AIK+KI·HgI2→AIK·KI·HgI2↓
若在过量的试剂中其沉淀又复溶解。
(3)碘一碘化钾试验：取滤液ml，加碘化一碘化钾试液1-2滴，出现棕色沉淀或混浊。
(4)硅钨酸试验：取滤液1m1，加硅钨酸试液1-2滴，生成灰白色或淡黄色沉淀。加热可使反应灵敏。
(5)生物碱呈色反应：
, 百拇医药 生物碱名称 | 呈色反应 | 生物碱名称 | 呈色反应 | ||
甲醛硫酸试液 | 钼酸铵一硫酸试液 | ||||
吗啡 阿扑吗啡 可待因 , 百拇医药 狄奥宁 罂粟碱 马钱子碱 | 紫→深紫 紫堇→蓝 紫蓝→蓝 紫堇→蓝 深红→棕 红橙 | 紫→棕绿 紫堇→绿 绿→蓝 , http://www.100md.com 绿→蓝 紫堇→绿 红紫 | 秋水仙碱 毒扁豆碱 阿托品 麻黄素 乌头碱 那可汀 | 紫堇→橙 橙 橙 茶 , http://www.100md.com 一 紫→褐 | 绿 一 一 一 黄 绿→红黄 |
11.有机酸
(1)溴酚蓝试验：取检品的酸性乙醇溶液点于滤纸，干后，喷雾0.1%溴酚蓝乙醇溶液(70%乙醇)，立即在蓝色背景中显黄色斑点。如不明显，可喷雾氨水，然后暴露在盐酸气体中，背景逐渐由蓝色变为黄色，而有机酸的斑点仍然为蓝色。
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(2)酸碱度试验：取检品液(水提取液)以pH试纸检查，如试纸颜色指示pH在7以下，可能含有有机酸。
(3)纸层析检出试验：见纸层析操作方法。
①支持剂：新华滤纸(中速)
②展开剂：正丁醇：醋酸：水(4：1：5)。
③显色剂：0.15溴酚蓝乙醇溶液(70%乙醇)。
结果：呈现蓝色斑点。
12.挥发渍及油脂
(1)取检品的乙醚溶液，置蒸发皿中，待溶剂挥发生，残渣为油状物，并有香气或特异自气，加热，油状物减少或消失示含挥发油。如无香气，或加状物不减少，可能为油脂，可于残渣中加入少许无水硫酸钠颗粒，直火加热，如产生气泡，并有剌激性特臭的浓白色气体(丙烯醛)，示含油脂类化合物。
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(2)取检品的乙醚溶液，点在滤纸上，待溶剂挥发生，喷雾0.05%荧光素钠溶液，再将滤纸下置碘蒸气上，熏几分钟，产生黄或黄绿色斑点，背景为粉红色示含挥发油。
(3)取检品的乙醇溶液，置白瓷皿中，待溶剂挥发生，残渣中加1%香草醛盐酸液，显黄色、红、棕、蓝、紫等颜色，示含挥发油。
(4)挥发油薄层微量检出反应：
①吸附剂：硅胶G(湿法制板)；中性氧化铝：石膏：水(5：1：7)。
②展开剂：正已烷：乙酸乙酯(85：15)；石油醚：乙酸乙酯(85：15)。
③显色剂：含5%香草醛的浓硫酸液(临用新配)1050烘2-10分钟；荧光照射；浓硫酸。
【注】香草醛化学名为3甲氧基4羟基苯甲醛。, http://www.100md.com