以胃癌Mg7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗构建成功
本报讯(驻地记者张中桥)日前，记者从第四军医大学西京医院获悉，一项国家自然科学基金资助项目——以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗，在该院全军消化病研究所构建成功。
近年来，肿瘤疫苗的研究成为肿瘤免疫治疗的热点领域。将编码肿瘤抗原的基因克隆入真核表达载体构建的DNA疫苗具有容易大量制备，诱导免疫反应广谱、高效、持久等优点。胃癌作为消化系统常见的恶性肿瘤，由于缺少特异性抗原，目前尚未研究出一种有效的疫苗。胃癌MG7-Ag是西京医院全军消化病研究所发现的一种特异性较好的胃癌标记物，并已初步证实可以诱导抗肿瘤免疫。
为构建以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗，该所研究人员将Hind Ⅲ酶切位点、MG7-Ag模拟表位和通用性辅助性T淋巴细胞(Th细胞)表位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中，通过2次聚合酶链反应将2种表位连接于一段载体基因，HindⅢ酶切位点位于载体片段与表位基因之间，将目的基因插入pUCm-T载体和pcDNA3.1+载体共有的Kpn1和Xba1酶切位点，将目的基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1+载体上的HindⅢ酶切位点，HindⅢ酶切除去载体基因片段，得到胃癌MG7-Ag模拟表位和通用性Th细胞表位的真核表达载体。经序列测定证实：PCR产物为载体基因、HindⅢ酶切位点、MG7-Ag模拟表位及通用性Th细胞表位的融合片段；最终得到的重组pcDNA3.1+质粒含有正确编码胃癌MG7-Ag模拟表位和通用性Th细胞表位的基因片段。
据该所研究人员介绍，他们将MG7-Ag模拟表位和一种通用性Th细胞表位PADRE的基因克隆入pcDNA3.1+真核表达载体，构建了以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的胃癌DNA疫苗，希望能利用PADRE的高效辅助作用和DNA疫苗制备容易、诱导免疫持久、广谱的特点，研制出一种新型的胃癌疫苗，应用于胃癌免疫治疗。, http://www.100md.com
近年来，肿瘤疫苗的研究成为肿瘤免疫治疗的热点领域。将编码肿瘤抗原的基因克隆入真核表达载体构建的DNA疫苗具有容易大量制备，诱导免疫反应广谱、高效、持久等优点。胃癌作为消化系统常见的恶性肿瘤，由于缺少特异性抗原，目前尚未研究出一种有效的疫苗。胃癌MG7-Ag是西京医院全军消化病研究所发现的一种特异性较好的胃癌标记物，并已初步证实可以诱导抗肿瘤免疫。
为构建以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的DNA疫苗，该所研究人员将Hind Ⅲ酶切位点、MG7-Ag模拟表位和通用性辅助性T淋巴细胞(Th细胞)表位编码序列的反向互补序列顺次设计于下游引物中，通过2次聚合酶链反应将2种表位连接于一段载体基因，HindⅢ酶切位点位于载体片段与表位基因之间，将目的基因插入pUCm-T载体和pcDNA3.1+载体共有的Kpn1和Xba1酶切位点，将目的基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1+载体上的HindⅢ酶切位点，HindⅢ酶切除去载体基因片段，得到胃癌MG7-Ag模拟表位和通用性Th细胞表位的真核表达载体。经序列测定证实：PCR产物为载体基因、HindⅢ酶切位点、MG7-Ag模拟表位及通用性Th细胞表位的融合片段；最终得到的重组pcDNA3.1+质粒含有正确编码胃癌MG7-Ag模拟表位和通用性Th细胞表位的基因片段。
据该所研究人员介绍，他们将MG7-Ag模拟表位和一种通用性Th细胞表位PADRE的基因克隆入pcDNA3.1+真核表达载体，构建了以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础的胃癌DNA疫苗，希望能利用PADRE的高效辅助作用和DNA疫苗制备容易、诱导免疫持久、广谱的特点，研制出一种新型的胃癌疫苗，应用于胃癌免疫治疗。, http://www.100md.com