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编号:223551
医院消毒灭菌的效果监测(一)
http://www.100md.com 《医院消毒技术规范》
     20.1 前言

    医院消毒是预防医院内感染的重要措施之一,消毒效果的监测是评价其消毒方法是否合理、消毒效果是否可靠的手段,因而在医院消毒工作中至关重要.

    医院消毒效果监测时需遵循以下原则:监测人员需经过专业培训,掌握一定的消毒知识,具备熟练的检验技能;选择合理的采样时间(消毒后、使用前);遵循严格的无菌操作。

    20.2 热力灭菌效果的监测方法

    20.2.1 压力蒸汽灭菌效果监测方法

    20.2.1 化学监测法

    (1)化学指示卡(管)监测方法:将既能指示温度,又能指示温度持续时间的化学指示管(卡)放人每一待灭菌的物品包中央,经一个灭菌周期后,取出指示管(卡),根据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。
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    (2)化学指示胶带监测法:将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外,经一个灭菌周期后,观察其颜色的改变,以指示是否经过灭菌处理。

    (3)结果判定:检测时,所放置的指示管(卡)的性状或颜色均变至规定的条件,可认为该包灭菌合格。

    (4)注意事项:监测所用化学指示剂须经卫生部批准,并在有效期内使用。

    20.2.1.2 生物监测法

    (1)指示菌株:指示菌株为嗜热脂肪杆菌芽胞(ATCC7953或SSIK31株),菌片含菌量为5.0X105-5.0x106cfu/片,在121℃±0.5℃条件下,D值为13-1.9min,杀灭时间(KT值)≤19min,存活时间(ST值)为≥3.9min。。

    (2)培养基:试验用培养基为溴甲酚紫蛋白胨水培养基。
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    (3)检测方法:将两个嗜热脂肪杆菌芽胞菌片分别装人灭菌小纸袋内,置于标准试验包中心部位。

    灭菌柜室内,排气口上方放置一个标准试验包(由3件平纹长袖手术衣,4块小手术巾,2块中手术巾,1块大手术中,3O块10cm x 10cm8层纱布敷料包裹成25cm X 30cm x 30cm大小)。手提压力蒸汽灭菌器用通气贮物盒(22cm x 13cm x 6cm)代替标准试验包,盒内盛满中试管,指示菌片放于中心部位的两只灭菌试管内(试管口用灭菌牛皮纸包封),将贮物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部。

    经一个灭菌周期后,在无菌条件下,取出标准试验包或通气贮物盒中的指示菌片,投人溴甲酚紫蛋白胨水培养基中,经56℃培养7天(自含式生物指示物按说明书执行),观察培养基颜色变化。检测时设阴性对照和阳性对照。

    (4)结果判定:每个指示菌片接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色,判定为灭菌合格;指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基,由紫色变为黄色时,则灭菌不合格。
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    (5)注意事项:监测所用菌片须经卫生部认可,并在有效期内使用。

    20 .2.2 干热灭菌效果监测方法

    20.2.2.1 化学检测法

    (1)检测方法:将既能指示温度又能指示该温度持续时间的化学指示剂分别放人待灭菌的物品中。经一个灭菌周期后,取出化学指示剂,据其颜色及性状的改变判断是否达到灭菌条件。

    (2)结果判定:检测时,所放置的指示管的颜色及性状均变至现定的条件,则可认为该包达到灭菌条件。

    (3)注意事项:检测所用的化学指示剂需经卫生部认可,并在有效期内使用。

    20.2.2.2 物理检测法:(热电偶检测法)

, 百拇医药     (l)检测方法:检测时,将多点温度检测仪的多个探头分别放于灭菌器各层内、中、外各点。关好柜门;将导线引出,由记录仪中观察温度上升与持续时间。

    (2)结果判定:若所示温度(曲线)达到预定温度,则灭菌温度合格.

    20.2.2.3 生物检测法:

    (1)指示菌株:枯草杆菌黑色变种芽胞(ATCC9372),菌片含菌量为5.0XI05一5.0XI06cfu/片。其抗力应符合以下条件:在温度160±2℃时,其D值为1.3-1.9min,存活时间≥3.9min,死亡时间 ≤1.9min。

    (2)检测方法:将枯草杆菌芽胞菌片分别装人灭菌中试管内(1片/管)。灭菌器与每层门把手对角线内,外角处放置2个含菌片的试管,试管帽置于试管旁,关好柜门,经一个灭菌周期后,待温度降至80℃时,加盖试管帽后取出试管。在无菌条件下,加人普通营养肉汤培养基(5ml/管),以37℃培养48h,观察初步结果,无菌生长管继续培养至第七日。
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    (3)结果判定:若每个指示菌片接种的肉汤管均澄清,判为灭菌合格,若指示菌片之一接种的肉汤管混浊,判为不合格,对难以判定的肉汤管,取0.1ml接种于营养琼脂平板,用灭菌L棒涂匀,放37℃培养48h,观察菌落形态,并做涂片染色镜检,判断是否有指示菌生长;若有指示菌生长,判为灭菌不合格;若无指示菌生长,判为灭菌合格。

    (4)注意事项:检测所用的指示菌片需经卫生部认可,并在有效期内使用。

    20.3 紫外线消毒效果的监测

    20.3.1 紫外线灯管辐照度值的测定

    门)检测方法:开启紫外线灯5min后,将测定波长为254nm的紫外线辐照计探头置于被检紫外线灯下垂直距离1m的中央处,待仪表稳定后,所示数据即为该紫外线灯管的辐照度值。

    (2)结果判定:普通30w。直管型紫外线灯,新灯辐照强度≥90Uw/cm2为合格;使用中紫外线灯辐照强度≥70Uw/cm2对为合格;30W高强度紫外线新灯的辐照强度≥180 Uw/cm2行为合格。
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    (3)注意事项:测定时电压220v土5v,温度20一25℃,相对湿度<60%,紫外线辐照计必须在计量部门检定的有效期内使用。

    20.3.2 生物监测法

    (1)空气消毒效果监测:监测按20.7执行。

    ①表面消毒效果监测:监测按20.6执行。

    20.4 医疗器械灭菌效果的监测

    20.4.1 采样时间:在灭菌处理后,存放有效期内采样。

    20.4.2 常规监测

    (1)检测方法:用无菌的方法将拟检缝合针、针头、手术刀片等小件医疗器械各5支,分别投人5ml的无茵洗脱液中;注射器则取5副在5ml无菌肉汤中分别抽吸5次;手术钳、镊子等大的医疗器械在无菌操作下取2份以上用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂擦采样,并将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中。将采样管用力振打80次,用无菌吸管吸取lml待检样品放于灭菌平皿内,加人已熔化的45℃-48℃的营养琼脂15-18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置37℃温箱培养48h,计数菌落数。
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    (2)结果判定:平板上无菌生长为灭菌合格。

    (3)注意事项:若消毒因子为化学消毒剂时,采样液中应加人相应中和剂。

    20.4.3 无菌检验

    20.4.3.1 无菌检验前准备

    (1)洗脱液与培养基无菌性试验:无菌试验前3天,于需一厌养培养基与霉菌培养基内各接种Iml洗脱液,分别置30-35℃与20-25℃培养72h,应无菌生长。

    (2)阳性对照管菌液制备:在试验前一天取金黄色葡萄球菌(26003)的普通琼脂斜面新鲜培养物,接种1环至需一厌氧培养基内,在30-35℃培养16-18h备用。

    20.4.3.2 无菌操作:取缝合针、针头、刀片等小件医疗器械5件直接浸人6管需一厌氧培养管(其中一管作阳性对照)与4管霉菌培养管C培养基用量为15ml/管。
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    取5副注射器,在5ml洗脱液中反复抽吸5次,洗下管内细菌,混和后接种需一厌养菌培养管(共6管,其中1管作阳性对照)与霉菌培养管(共4管)。接种量:lml注射器为0.5ml,2ml注射器为Iml,5-10ml注射器为2ml,20-50ml注射器为5ml,培养基用量:接种量为2ml以下为15ml/管,接种量5ml为40ml/管。

    手术钳、镊子等大件医疗器械取2件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样,将棉拭子投人sml无菌洗脱液中,将采样液混匀,接种于需一厌氧培养管(共6管,其中1管作阳性对照)与霉菌培养基(共4管)。接种量为lml/管,培养基用量为15ml/管。

    20.4.3.3 培养:在待检样品的需一厌氧培养管中,接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管液1:1000稀释1ml,将需一厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于30-35℃培养5天,霉菌培养管与阴性对照管于20-25℃培养7天,培养期间逐日检查是否有菌生长,如加人供试品后培养基出现混浊或沉淀,经培养后不能从外观上判断时,可取培养液转种人另一支相同的培养基中或斜面培养基上,培养48-72h后,观察是否再现混浊或在外面上有无菌落生长,并在转种的同时,取培养液少量,涂片染色,用显微镜观察是否有菌生长。
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    20.4.3.4 结果判定:阳性对照在24h内应有菌生长,阴性对照在培养期间应无菌生长,如需一厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或更显混浊但经证明并非有菌生长,判为灭菌合格;如需一厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显混浊并证实有菌生长,应重新取样,分别同法复试2次,除阳性对照外,其他各管均不得有菌生长,否则判为灭菌不合格。

    20.4.4 注意事项

    (1)送检时间不得超过6h,若样品保存于0-4℃,则不超过24h。

    (2)被采样本表面积<100cm2取全部表面;被采样本表面积 ≥ 100Cm2,取 100cm2

    (3)若消毒因子为儿学消毒剂,采样液中应加人相应中和剂。

    20.4.5 热原检查法:
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    20.4.5.鲎试验

    本法系利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的机理,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。细菌内毒素国家标准品(以下简称RSE)系自大肠杆菌提取精致得到的内毒素。以细菌内毒素国际标准品为基准,经过协作标定,使其与国际标准品单位含义一致.RSE用于标定、复核、仲裁鲎试剂灵敏度和标定细菌内毒素工作标准品(以下简称CSE)。CSE系经RSE为基准进行标定,确定其重量的相当效价。每毫微克(Ing)CSE的效价应不小于 2EU,不大于50EU,并具备均一性和稳定性的实验数据。CSE用于试验中空试剂灵敏度复核、干扰试验及设置的阳性对照。

    (1)试验准备:试验所用器皿,需经处理,除去可能存在的外源性内毒素,常用的方法是250℃于烤至少lh或180℃干烤至少2h,也可用其他适宜的方法。试验所用器皿应确证无吸附细菌内毒素的作用。试验操作过程应防止微生物的污染。
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    (2)鲎试剂灵敏度复核:根据尝试剂灵敏度的标示值(λ),将RSE或CSE用细菌内毒素检查用水(与批号鲎试剂24h不产生凝集反应的灭菌注射用水,以下简称BET水)溶解,在旋涡混合器上混合15min,然后制备成2.0λ、λ、0.5λA和0.25λ等4个浓度的内毒素标准溶液,每稀释一步均应在旋涡混合器上混合30秒钟,按“检查法”项下试验,每一浓度平行做4管,同时用BET水做4管阴性对照,如最大浓度(2.0λ)4管为阳性,最低浓度(0.25λ)4管均为阴性,阴性对照4管均为阴性,按下式计算反应终点浓度的几何平均值即为鲨试剂灵敏度的测定值(λ)。

    λc=Lg-1(∑X/4)

    式中X为反应终点浓度的对数值(Lg)。反应终点浓度是系列浓度递减的内毒素溶液中最后一个呈阳性结果的浓度。

    当λc在0.5λ-2.0λ(包括0.5λ和2.0λ)时,方可用于细菌内毒素检查,并以λ为该批空鲎剂的灵敏度。每批新的鲨试剂在用于试验前都要进行灵敏度的复核。鲎试剂灵敏度定义为在本检查法规定的条件下能检测出标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度,用EU/ml表示。
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    (3)供试品干扰试验:按“鲎试剂灵敏度复核”项下试验,用BET水和未检出内毒素的供试品溶液或其不超过最大有效稀释倍数(MVD)的稀释液分别制成合CSE2.0λ、λ、0.5λ和0.25λ等4种浓度的内毒素溶液。用BET水和供试品溶液或稀释液制成的每一浓度平行做4管,另取BET水和供试品溶液或稀释液各做4管阴性对照。如标准溶液最大浓度(2.0λ)4管均为阳性,最低浓度(0.25λ)4管均为阴性,两种阴性对照8管均为阴性时,按下式计算用BET水制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值(ES)和用供试品溶液或稀释液制成的内毒素溶液的反应终点浓度的几何平均值(ET).

    ES =ig-1(∑Xs/4)

    ET二ig-1(∑XT/4)
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    式中Xs\ XT分别为用BET水和供试品溶液或稀释液制成的内毒素溶液的反应终点浓度的对数值(Lg)。

    当ET在0.5Es-2.0Es(包括0.5Es和2.0Es)时测认为供武品在该浓度下不干扰试验,否则需进行适当处理后重复试验,或使用更灵敏的鲎试剂,对供试品进行更大倍数稀释,是排除干扰因素的简单有效的方法。每个品种要求至少对三个批号的供试品进行干扰试验,若鲎试剂的来源、供试品的配方或生产工艺有变化时,须重复进行干扰试验。

    供试品的最大有效稀释倍数(MVD)按下式计算:

    MVD二L/λ

    L为供试品的细菌内毒素限值,以EU/ml表示,当正文中的限值以EU/mg或EU/U表示时,应乘以供试品溶液的浓度,再以所得值代人上式。
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    (4)检查法:取装有0.1ml鲎试剂溶液的10×75mm试管或0.1ml/支规格的鲨试剂原安瓿6支,其中2 支加人0.1ml或0.2ml供试品溶液(其稀释倍数不得超过MVD)作为供试品管,2支分别加人0.1mll或 0.2ml用 BET水将 CSE制成的 20则需进行适当处理后重复试验,或使用更灵敏的餐试剂,对供试品进行更大倍数稀释,是排除干扰因素的简单有效的方法。每个品种要求至少对三个批号的供试品进行干扰试验,若鲨试剂的来源、供试品的配方或生产工艺有变化时,须重复进行干扰试验。

    供试品的最大有效稀释倍数(MVD)按下式计算:

    MVD二L/λ

    L为供试品的细菌内毒素限值,以EU/ml表示,当正文中的限值以EU/mg或EU/U表示时,应乘以供试品溶液的浓度,再以所得值代人上式。

    (4)检查法:取装有0.1ml鲎试剂溶液的10×75mm试管或0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿6支,其中2支加人0.1ml或0.2ml供试品溶液(其稀释倍数不得超过MVD)作为供试品管,2支分别加人0.1ml或 0.2m1用 BET水将 CSE制成的 2.0λ和0.25λ浓度的标准内毒素溶液,一支加人0.1ml或0.2mlBET水作为阴性对照,1支加人0.1ml或0.2ml供试品阳性对照溶液(相当于用供试品溶液将CSE制成2λ浓度的内毒素溶液)作为阳性对照管.将试管中溶液轻轻混匀后,封闭管口,垂直放人37±1℃水浴或适宜恒温器中,保温60±2min。保温和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果.
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    (5)结果判断:将试管从水浴中轻轻取出,缓缓倒转180度时,管内凝胶不变形,不从管壁滑脱者为阳性,记录为(+);凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性,记录为(-)。供试品2管均为(-),应认为符合规定。当供试品的稀释倍数等于MVD时,如2管均为(+),应认为不符合规定;如两管中1管为(+),1管为(-),按上述方法复试,其中供试品管增加为4管,供试品4管中如有1管为(+),即认为不符合规定。若第一次试验时供试品的稀释倍数小于MVD而结果出现2管均为(十)域2管中1管为(+),l管为(-)时,按同样方法复试和判定,复试时要求将其稀释至MVD。加人标准内毒素溶液的2管中最大浓度(2.0λ)管应为(+),最低浓度(0.25λ)管应为(-),供试品阳性对照均应为(十),阴性对照均应为(-),否则试验无效。

    20.4.5.2 动物试验法

    (1)原理:将一定剂量的供试品,在规定的时间内,观察家兔体温升高情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定.0
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    (2)供试家兔:试验用的家兎应健康无伤;体重1.7-3.0kg,雌兔应无孕。预测体温前7日起,即应用同一饲料饲养。在此期间内,体重应不减轻,精神、食欲、排泄等不得有异常现象。未经使用于热原检查的家兔,或供试品判定为符合规定,但组内升温达06T的家兔;或供试品判定为不符合规定,但其组内家兔平均升温未达0.8℃,且已休息两周以上的家兔;或三周内未曾使用的家兔,均应在检查供试品前3-7日内预测体温,进行挑选。挑选试验的条件与检查供试品时相同;仅不注射药液,每隔lh测量体温1次,共测4次,4次体温均在38.0-39.6℃的范围内,且最高最低体温的差数不超过0.4℃的家兔,方可供热原检查用。用于热原检查后的家兔,如供试品判定为符合规定,至少休息2日方可供第2次检查用。用于热原检查后的家兔,如供试品判定为不符合规定,且其组内家兔平均升温达0.8℃或更高时,则组内全部家兔不再使用,每一家兔的使用次数,用于一般药品的检查,不应超过10次。

    (3)试验前的准备:在作热原检查前l-2日,供试用家兔应尽可能处于同一温度的环境中,实验室和饲养室的温度相差不得大于5℃,实验室的温度应在17-28℃,在试验全部过程 中,应注意室温变化不得大于3℃,应避兔噪音干扰。家兔在试验前至少lh开始停止给食并置于适宜的装置中,直至试验完毕c家兔体温应使用精密度为±0.1℃的肛温计,或其他同样精确的测温装置。肛温计插人肛门的深度和时间各兔应相同,深度一般约为6cm,时间不得少于Imin,每隔30-60min测量体温1次,一般测量2次,两次体温之差不得超过0.2℃,以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。当日使用的家兔,正常体温应在38.0-39.6℃的范围内,且各兔间正常体温之差不得超过l℃。
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    (4)试验用的注射器、针头及一切和供试品溶液接触的器皿,应置烘箱中用250℃加热30min或用180℃加热2h,也可用其他适宜的方法除去热原。

    (5)检查法:取适用的家兔3只,测定其正常体温后15min内,自耳静脉缓缓注人规定剂量并温热至约38℃的供试品溶液,然后每隔lh 按前法测量其体温1次,共测3次,以3次体温中最高一次减去正常体温,即为该兔体温的升高度数。如 3只家兔中有 1只体温升高 0.6℃或0.6℃以上,或 3只家兔体温升高均低于 0.6℃,但升高的总数达 l.4℃或 l.4℃以上,应另取 5只家兔复试,检查方法同上。

    (6)结果判定:在初试3只家兔队体温升高均低于0.6℃,并且3只家兔体温升高总数低于1.4℃,或在复试的5只家兔中,体温升高0.6℃或0.6℃以上的兔数仅有1只,并且初试,复试合并8只家兔的体温升高总数为3.5℃或3.5℃以下,均认为供试品符合热原检查条例规定.
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    在初试3只家兔中,体温升高0.6℃或0.6℃以上的家兔超过1只,或在复试的5只家兔中;体温升高0.6℃或0.6℃以上的兔数超过1只,或在初试、复合并8只家兔的体温升高总数超过3.5℃,均认为供试品的热原检查不符合规定。

    20.5 手和皮肤粘膜消毒效果监测

    20.5.1 采样时间;在消毒后立即采样.

    20.5.2 采样方法

    (1)手的采样:被检人五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2),并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手接触部位,将棉拭子投人10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。

    (2)皮肤粘膜采样:用 5cm × 5crn灭菌现格板,放在被检皮肤处;用没有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投人10ml含相应中和剂的无菌洗脱液的试管内,立即送检。不规则的粘膜皮肤处可用棉拭子直接涂擦采样。
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    20.5. 3 检测方法

    (1)细菌总数检测:将采样管用力振打80次,用无菌吸管吸取1.0ml待检样品接种于灭菌平皿内加人已熔化的45-48℃的营养琼脂15-18ml,边倾注边摇匀,待琼脂凝固,置37℃温箱培养48h,计数菌落数。

    采样结果计算方法:

    细菌总数(cfu/cm2)=平板上菌落数×稀释倍数/采样面积(cm2)

    (2)致病菌检测:致病菌检测按2015原则执行。

    20.5.4 结果判定

    (1)消毒洗手

    l、ll类区域工作人员:细菌总数≤5Cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
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    lll类区域工作人员:细菌总数≤10 Cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

    lV类区域工作人员:细菌总数 ≤15 Cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

    母婴同室\婴儿室、新生儿室及儿科病房的工作人员手上,不得检出沙门氏菌及其它致病菌。

    (2)皮肤粘膜:参照手的卫生学标准执行。

    20.5.5 注意事项

    皮肤粘膜采样处,若表面不足 5cm × 5cm可用相应面积的规格板采样。

    20.6 物品和环境表面消毒效果的监测

    20.6.1 采样时间:在消毒处理后进行采样。
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    20.6.2 采样方法:用5cm×5cm灭菌规格板,放在被检物体表面,采样面积≥100cm2,连续采样4个,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭于1支;在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次,并随之转动棉拭子,剪去手接触部位后,将棉拭子投人10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内,立即送检。

    门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。

    20.6.3 检测方法

    (1)细菌总数检测:检测方法按20.5.3(1)执行。小型物体表面的结果计算,用cfu/件表示。

    (2)致病菌检测:检测方法按 20 .14执行。

    20.6.4 结果判定

    l、ll类区域:细菌总数≤5cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格。
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    Ill类区域:细菌总数≤10 cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格c

    lV类区域:细菌总数≤15 cfu/Cm2,并未检出致病菌为消毒合格。

    母婴同室、早产儿室、婴儿室、新生儿室及儿科病房的物体表面不得检出沙门氏菌。

    20.6.5 注意事项

    (1)送检时间:按20.4.4(1)执行。

    (2)采样面积;按20.4.4(2)执行。

    20.7 空气消毒效果的监测

    20.7.1 采样时间:在消毒处理后、操作前进行采样c
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    20.7.2 采样方法

    (1)布点方法;室内面积≤30Cm2,设内、中、外对角线3点,内、外点布点部位距墙壁IM处;室内面积>30M2,设4角及中央5点,4角的布点部位距墙壁lm处。

    (2)平板暴露法:将普通营养琼脂平板(直径为9CM)放在室内各采样点处,采样高度为距地面1.5m,采样时将平板盖打开,扣放于平板旁,暴露5min,盖好立即送检。

    20.7.3 检测方法:将送检的平板置37℃温箱培养48h,计数菌落数,并分离致病菌。

    平板暴露法结果计算公式:

    细菌总数(cfu/m3)=50000N/A×T

    式中A认为平板面积(CM2);
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    T为平板暴露时间(MIN);

    N为平均菌落数(Cfu)。

    20.7.4 结果判定

    工类区域:细菌总数≤10cfu/m3,未检出致病菌为消毒合格;

    ll类区域:细菌总数≤200 cfu/m3,未检出致病菌为消毒合格;

    叮类区域:细菌总数≤500 cfu/m3,未检出致病菌为消毒合格。

    20 .8 消毒液的监测

    20.8.1 常用消毒液有效成分测定

    (1)有效氯含量测定
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    配制2mol/L硫酸、10%碘化钾与0.5%淀粉等溶液。配制并标定0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液。

    对液体含氯消毒剂,吸取0.1ml放容量瓶中,加蒸馏水至刻度,混匀。对固体含氯消毒剂,称取1g(精确至0.001g),置研钵研磨后以蒸馏水溶解,转人100ml容量瓶中(溶水中无残渣者可免研磨)。称量杯及研钵需用蒸馏水洗3次,洗液全部转人容量瓶。

    向 100ml碘量瓶中加 2mol/L硫酸 10ml,10%碘化钾溶液 10ml和混匀的消毒剂稀释液10.0ml。此时,溶液出现棕色。盖上盖并振摇混匀后加蒸馏水数满于碘量瓶盖缘,置暗处5min.打开盖,让盖缘蒸馏水流人瓶内。用硫代硫酸钠标准溶液(装于25ml滴定管中)滴定游离碘;边滴边摇匀。待溶液呈淡黄色时加人0.5%淀粉溶液10滴,溶液立即变蓝色。继续滴定至蓝色消失,记录用去的硫代硫酸钠溶液总量。重复测3次,取3次平均值进行以下计算。

, 百拇医药     因lmol/L硫代硫酸钠标准溶液Iml相当于0.03545g有效氯,故可按下式计算有效氯含量:

    有效氯含量二 C × V × 0.03545/W × 100%

    [C为硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度(MOL/L)]V为滴定用去硫代硫酸钠标准溶液毫升数;w为碘量瓶中所含消毒剂原药克数(液体消毒剂则为毫升数)、]

    (2)有效碘含量的测定

    配制0.5%淀粉溶液。备36%醋酸溶液。配制并标定0.1moL/L硫代硫酸钠标准溶液。

    向ltolnl碘量瓶中精确加含碘消毒剂样液50ml及醋酸1滴。用0.led/L硫代硫酸钠标准溶液滴定(通常用25ML滴定管,若预计有效碘浓度>5%时用50ml滴定管),边滴边摇匀。待溶液呈淡黄色时加人0.5%淀粉溶液10滴(溶液立即变蓝色),继续滴定至蓝色消失,记录用去的硫代硫酸钠溶液总量。重复测3次,取3次平均值进行以下计算。
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    由于 lmol/L硫代硫酸钠标准溶液 lml相当于 0.1269g有效碘,故可按下式计算有效碘含量:

    有效碘含量=C × V × 0.1269/W × 100%”“”””””“W

    [c为硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度(mol/L)v为满定用去硫代硫酸钠标准溶液毫升数;W为碘量瓶中所含消毒剂原药克数(液体消毒剂则为毫升数)]

    (3) 戊二醛(C5h 8O2。)含量的测定

    配制6.5%三已醇胺溶液、0.04%澳酚蓝乙醇溶液与盐酸羟胺中性溶液(17.5g盐酸羟胺加蒸馏水75ml溶解,并加异丙醇稀释至500ml,摇匀。加0.04%澳酚蓝乙醇溶液15rnl,用6.5%三乙醇胺溶液滴定至溶液显蓝绿色)。配制并标定0.25mol/L硫酸标准溶液。
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    取戊二醛消毒剂样液10.0ml(非消毒浓度的浓溶液需用50ml容量瓶稀释后取样)置250ml碘量瓶中,精确加 6.5%三乙醇胺溶液 20.0ml与盐酸羟胺中性溶液0.25ml,摇匀。静量反应 lh后,用0.25mol/L硫酸标准溶液滴定。待溶液显蓝绿色,记录硫酸溶液用量。同时,以不含戊二醇的三乙醇胺、盐酸羟胺中性溶液重复上述操作(空白对照)。重复测3次,取3次的平均值进行以下计算。

    由于 lmol/L硫酸标准溶液 Iml相当于 0.1001g戊二醛,因此可按下式计算成二醛含量:

    戊二醛含量(w/v)=C × (v2-v1) × 0.1001/w × 100%

    [c为硫酸标准溶液物质的量浓度(mol/L);V1与V2分别为样品与空白对照滴定中用去的硫酸标准溶液毫升数;W为戊二醛样品毫升数。]
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    (4)过氧化氢(H2O2)浓度的测定

    配制2mol/L硫酸与10%硫酸锰等溶液。另外配制井标定0.02rnol/L高锰酸钾标准溶液。

    取1.0ml过氧化氢样液,于100ml容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度,混匀。

    取过氧化氢稀释液10.0ml,置100ml碘量瓶中,加人2mol/L硫酸20ml与10%硫酸锰3滴,摇匀。用0.02mol/L高锰酸钾标准溶液(装于25ml滴定管中)滴定至溶液呈粉红色,记录高锰酸钾溶液用量。重复测3次,取3次平均值进行以下计算。

    因lmol/L高锰酸钾标准溶液lml相当于0.08505g过氧化氢,故可按下式计算过氧化氢含量:

    过氧化氢浓度(w/v)=C × V × 0.08505/w × 100%
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    {C与V分别为高锰酸钾标准溶液物质的量浓度(MOL/L)与满定中用去的毫升数w为碘量瓶中所含过氧化氢样液毫升数J}

    (5)过氧乙酸(C2H4O3)浓度的测定

    配制以下溶液:2mol/L硫酸、10%碘化钾、0.01mol/L高锰酸钾、10%硫酸锰、3%铝酸铵与0.5%淀粉。配制并标定0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液。

    取1.0ml过氧乙酸样液,于100ml容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度,混匀。

    向 100ml碘量瓶中加 2mol/L硫酸5ml,10%硫酸锰3滴,混匀的过氧乙酸稀释液5.oml,摇匀并用0.0lmol/L高锰酸钾溶液滴定至溶液呈粉红色。随即加 10%碘化钾溶液 10ml与 3%铅酸铰3滴,摇匀并用0.05mol/L硫代硫酸钠标准溶液(装于25ml滴定管中)滴定至淡黄色。加人0.5%淀粉溶液3滴(溶液立即变蓝色),继续用硫代硫酸钠滴定至蓝色消失,记录硫代硫酸钠标准溶液的总用量。重复测3次,取3次平均值进行以下计算。

    由于lmol/L硫代硫酸钠Iml相当于0.03803g过氧乙酸,故可按下式计算过氧乙酸含量:

    过氧乙酸浓度(w/v)= C × V × 0.03803/w × 100%

    [c与V分别为硫代硫酸钠标准溶液物质的量浓度(mol/L)与滴定中用去的毫升数;w为碘量瓶中所含过氧乙酸样液毫升数.], http://www.100md.com