瑞香狼毒化学成分的研究
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摘 要 从瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)中分离得到3个化合物，根据理化数据和NMR数据分别鉴定为S-(+)-3-羟基-1，5-二苯基-1-戊酮(1)，西瑞香素(2)和(-)-7-甲氧基狼毒素(3).其中化合物1为新化合物，化合物3为首次分得的旋光纯的7-甲氧基狼毒素.关键词 瑞香狼毒；化学成分；S-(+)-3-羟基-1，5-二苯基-1-戊酮
瑞香狼毒又名断肠草，为瑞香科植物，广泛分布于中国西北、西南、东北及河北等地.该科植物在世界上约有50属500余种，其中狼毒属只有瑞香狼毒一种.其甲醇提取物具有抗癌活性，可使小鼠P-388和L-1210腹水型的生存期延长.近年来研究发现，瑞香狼毒具有很好的抗惊厥活性，为了研究其活性成分，对其化学成分进行了研究.从中分离得到3个化合物.经鉴定分别为S-(+)-3-羟基-1，5-二苯基-1-戊酮(1)、西瑞香素(2)和(-)-7-甲基狼毒素(3)提取与分离
取瑞香狼毒干燥根5 kg,粉碎后，用95%的工业乙醇回流提取3次，每次2 h.回收乙醇，浓缩提取液得乙醇浸膏(1 kg)，依次用石油醚、乙醚、丙酮超声提取，分为极性不同的4部分.丙酮提取部分(15 g)采用硅胶柱层析进行分离，以氯仿-甲醇梯度洗脱.
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氯仿-甲醇(V∶V=10∶1)洗脱部分用制备硅胶薄层分离，以石油醚-乙酸乙酯(6∶1)进行分离，制得化合物1(10 mg)；氯仿-甲醇(5∶1)洗脱部分经硅胶减压柱分离，以石油醚-丙酮(10∶1)洗脱，第20～26份重结晶得化合物(45 mg)；氯仿-甲醇(3∶1)洗脱部分用制备薄层分离，以石油醚-丙酮(1∶1)进行展开，制得化合物3(20 mg).结果与讨论
化合物1：无色油状.［α］D+34.4°(23℃，c=3.6，CHCl3).ESI-MS测得其分子量为254.1H-NMR谱中δ7.90(2H,d,J=7.5 Hz)，7.54(1H,t,J=7.5 Hz)和7.42(2H,t,J=7.5 Hz)的3组氢信号显示结构中可能存在羰基取代的苯环；δ7.22(5H,m)这组信号示有一个单取代的苯环.13C-NMR中δ200.6为羰基的信号；芳香区δ125.7-141.8的多个碳信号显示有两个苯环；脂肪区δ31.7，38.0，44.9和66.9显示有4个碳存在，其中δ66.9为连氧碳.1H-1H COSY谱中δ1.80(1H,m)和1.93(1H, m)相关，δ2.74(1H,m)和2.86(1H, m)也相关，这两组氢之间也相关，这说明存在相连的2个亚甲基；而后者又与δ4.23(1H,m)连氧碳上的氢相关，这个连氧碳上的氢又与δ3.08 2个氢相关，这样结构中存在一个连氧碳两边分别连有1个亚甲基和2个亚甲基的结构.该化合物的NMR及ESI-MS所显示的分子量数据与合成得到的R-(-)-3-羟基-1,5-二苯基-1-戊酮的基本一致，但是旋光方向相反.故鉴定化合物1为S-(+)-3-羟基-1,5-二苯基-1-戊酮.1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ:1.80(1H,m,H-4),1.93(1H,m,H-4),2.74(1H,m,H-5),2.86(1H,m,H-5),3.08(2H,t-like,2-CH2-),4.23(1H,m,H-3),7.22(5H,m,5-苯基),7.42(2H,t,J=7.8 Hz,H-2′,6′),7.54(1H,t,J=7.8 Hz,J-4′),7.90(2H,t,J=7.8 Hz,H-3′,5′).13C-NMR(CDCl3,75 MHz)δ:31.7(C-5),38.0(C-4),44.9(C-2),66.8(C-3),125.6～141.7(12C,苯环上C信号)，200.6(C-2).
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化合物2：无色针晶，mp 244～246℃(丙酮).紫外灯(254nm)下呈蓝色荧光，推测可能为香豆素类化合物.FeCl3反应阳性，说明结构中存在酚羟基.1H-NMR中δ6.38(1H,d,J=9.3 Hz)和8.04(1H,d,J=9.3 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号.δ6.84(1H,brs),7.10(1H,dd,J=8.5,2.3 Hz)与7.71(1H,d,J=8.5 Hz)香豆素母核1，2，4三取代苯环的信号；δ6.84归属为H-8′，因为H-4′和H-8′之间存在远程偶合使H-8′成为宽单峰；这样同时也确定了7′位被取代.1H-NMR中δ7.87(1H,s),7.20(1H,s)及7.15(1H,d,J=1.5 Hz)信号显示可能还存在一个3位被取代的香豆素.δ7.87(1H,s)为另一个香豆素母核α，β不饱和内酯环β-H的信号；由于其未裂分，说明α-H未被取代.NOESY谱中δ7.20(1H,s)与δ7.87(1H,s,H-4)相关，所以将其归属为H-5；由于H-8与H-4之间存在远程偶合，故δ7.15(1H,d,J=1.5 Hz)归属为H-8.δ3.81(3H,s)为取代在苯环上的甲氧基的信号；NOESY谱中该甲氧基与δ7.20(1H,s,H-5)相关，故该甲氧基取代在6位.将其光谱数据及熔点与文献〔3〕中西瑞香素对照基本一致，故鉴定化合物2为西瑞香素.1H-NMR(CD3COCD3,300 MHz)δ:3.80(3H,s,6-OCH3),6.38(1H,d,J=9.3 Hz,H-3′),6.84(1H,brs,H-8′),7.10(1H,dd,J=8.5,2.3 Hz,H-6′),7.15(1H,d,J=1.5 Hz,H-8),7.20(1H,s,H-5),7.71(1H,d,J=8.5 Hz,H-5′),7.87(1H,s,H-4),8.04(1H,d,J=9.3 Hz,H-4′).
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辽宁省自然科学基金资助项目冯宝民(沈阳药科大学中药系，沈阳110015)裴月湖(沈阳药科大学中药系，沈阳110015)韩冰(北京生物技术研究所，北京 100780)参考文献1，Kobayashi Shü,Hachiya Twao,Takahori Takashi,et al.Lanthanidetrifluoromethanesulfonates as reusable catalysts.Aldor reaction in organic solvent.Synthesis,1993,(4):371～3732，Narasaka Koichi,Miwa Tetsuo,Hayashi Hiroki,et al.Highly enantioselective Aldorreaction of methyl ketones via chiral stannousazaenolates.Chemistry Letters,1984,61(8):1399～14023，刘桂芳，付玉芹，侯风飞，等.瑞香狼毒化学成分的研究(Ⅰ).中草药，1996，27(2)：67～704，扬伟文，邢有权，宋茂森，等.7-甲氧基狼毒素的分离与结构鉴定.高等学校化学学报，1984，5(5)：671～673, 百拇医药
瑞香狼毒又名断肠草，为瑞香科植物，广泛分布于中国西北、西南、东北及河北等地.该科植物在世界上约有50属500余种，其中狼毒属只有瑞香狼毒一种.其甲醇提取物具有抗癌活性，可使小鼠P-388和L-1210腹水型的生存期延长.近年来研究发现，瑞香狼毒具有很好的抗惊厥活性，为了研究其活性成分，对其化学成分进行了研究.从中分离得到3个化合物.经鉴定分别为S-(+)-3-羟基-1，5-二苯基-1-戊酮(1)、西瑞香素(2)和(-)-7-甲基狼毒素(3)提取与分离
取瑞香狼毒干燥根5 kg,粉碎后，用95%的工业乙醇回流提取3次，每次2 h.回收乙醇，浓缩提取液得乙醇浸膏(1 kg)，依次用石油醚、乙醚、丙酮超声提取，分为极性不同的4部分.丙酮提取部分(15 g)采用硅胶柱层析进行分离，以氯仿-甲醇梯度洗脱.
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氯仿-甲醇(V∶V=10∶1)洗脱部分用制备硅胶薄层分离，以石油醚-乙酸乙酯(6∶1)进行分离，制得化合物1(10 mg)；氯仿-甲醇(5∶1)洗脱部分经硅胶减压柱分离，以石油醚-丙酮(10∶1)洗脱，第20～26份重结晶得化合物(45 mg)；氯仿-甲醇(3∶1)洗脱部分用制备薄层分离，以石油醚-丙酮(1∶1)进行展开，制得化合物3(20 mg).结果与讨论
化合物1：无色油状.［α］D+34.4°(23℃，c=3.6，CHCl3).ESI-MS测得其分子量为254.1H-NMR谱中δ7.90(2H,d,J=7.5 Hz)，7.54(1H,t,J=7.5 Hz)和7.42(2H,t,J=7.5 Hz)的3组氢信号显示结构中可能存在羰基取代的苯环；δ7.22(5H,m)这组信号示有一个单取代的苯环.13C-NMR中δ200.6为羰基的信号；芳香区δ125.7-141.8的多个碳信号显示有两个苯环；脂肪区δ31.7，38.0，44.9和66.9显示有4个碳存在，其中δ66.9为连氧碳.1H-1H COSY谱中δ1.80(1H,m)和1.93(1H, m)相关，δ2.74(1H,m)和2.86(1H, m)也相关，这两组氢之间也相关，这说明存在相连的2个亚甲基；而后者又与δ4.23(1H,m)连氧碳上的氢相关，这个连氧碳上的氢又与δ3.08 2个氢相关，这样结构中存在一个连氧碳两边分别连有1个亚甲基和2个亚甲基的结构.该化合物的NMR及ESI-MS所显示的分子量数据与合成得到的R-(-)-3-羟基-1,5-二苯基-1-戊酮的基本一致，但是旋光方向相反.故鉴定化合物1为S-(+)-3-羟基-1,5-二苯基-1-戊酮.1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ:1.80(1H,m,H-4),1.93(1H,m,H-4),2.74(1H,m,H-5),2.86(1H,m,H-5),3.08(2H,t-like,2-CH2-),4.23(1H,m,H-3),7.22(5H,m,5-苯基),7.42(2H,t,J=7.8 Hz,H-2′,6′),7.54(1H,t,J=7.8 Hz,J-4′),7.90(2H,t,J=7.8 Hz,H-3′,5′).13C-NMR(CDCl3,75 MHz)δ:31.7(C-5),38.0(C-4),44.9(C-2),66.8(C-3),125.6～141.7(12C,苯环上C信号)，200.6(C-2).
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化合物2：无色针晶，mp 244～246℃(丙酮).紫外灯(254nm)下呈蓝色荧光，推测可能为香豆素类化合物.FeCl3反应阳性，说明结构中存在酚羟基.1H-NMR中δ6.38(1H,d,J=9.3 Hz)和8.04(1H,d,J=9.3 Hz)为香豆素母核H-3，H-4的特征信号.δ6.84(1H,brs),7.10(1H,dd,J=8.5,2.3 Hz)与7.71(1H,d,J=8.5 Hz)香豆素母核1，2，4三取代苯环的信号；δ6.84归属为H-8′，因为H-4′和H-8′之间存在远程偶合使H-8′成为宽单峰；这样同时也确定了7′位被取代.1H-NMR中δ7.87(1H,s),7.20(1H,s)及7.15(1H,d,J=1.5 Hz)信号显示可能还存在一个3位被取代的香豆素.δ7.87(1H,s)为另一个香豆素母核α，β不饱和内酯环β-H的信号；由于其未裂分，说明α-H未被取代.NOESY谱中δ7.20(1H,s)与δ7.87(1H,s,H-4)相关，所以将其归属为H-5；由于H-8与H-4之间存在远程偶合，故δ7.15(1H,d,J=1.5 Hz)归属为H-8.δ3.81(3H,s)为取代在苯环上的甲氧基的信号；NOESY谱中该甲氧基与δ7.20(1H,s,H-5)相关，故该甲氧基取代在6位.将其光谱数据及熔点与文献〔3〕中西瑞香素对照基本一致，故鉴定化合物2为西瑞香素.1H-NMR(CD3COCD3,300 MHz)δ:3.80(3H,s,6-OCH3),6.38(1H,d,J=9.3 Hz,H-3′),6.84(1H,brs,H-8′),7.10(1H,dd,J=8.5,2.3 Hz,H-6′),7.15(1H,d,J=1.5 Hz,H-8),7.20(1H,s,H-5),7.71(1H,d,J=8.5 Hz,H-5′),7.87(1H,s,H-4),8.04(1H,d,J=9.3 Hz,H-4′).
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辽宁省自然科学基金资助项目冯宝民(沈阳药科大学中药系，沈阳110015)裴月湖(沈阳药科大学中药系，沈阳110015)韩冰(北京生物技术研究所，北京 100780)参考文献1，Kobayashi Shü,Hachiya Twao,Takahori Takashi,et al.Lanthanidetrifluoromethanesulfonates as reusable catalysts.Aldor reaction in organic solvent.Synthesis,1993,(4):371～3732，Narasaka Koichi,Miwa Tetsuo,Hayashi Hiroki,et al.Highly enantioselective Aldorreaction of methyl ketones via chiral stannousazaenolates.Chemistry Letters,1984,61(8):1399～14023，刘桂芳，付玉芹，侯风飞，等.瑞香狼毒化学成分的研究(Ⅰ).中草药，1996，27(2)：67～704，扬伟文，邢有权，宋茂森，等.7-甲氧基狼毒素的分离与结构鉴定.高等学校化学学报，1984，5(5)：671～673, 百拇医药