第四十八章 医院药品检验
一、医院药品检验的基本条件与要求
医疗单位制剂室必须设立药检室，直属药剂科领导。并按制剂室规模高立化学分析间、仪器间、无菌间、留样观察定,动物饲养实验室等。
(一)药检室应配备药师以上的人员从事药检工作。
(二)药检室必须配备与所配制的制剂相适应的检验设备。如分析天平、酸度计、紫外分光光度计、自动旋光仪、显微镜、干燥箱、恒温培养箱、霉菌培养箱、冰箱、不溶性微粒检查装置、净化工作台、澄明度检测装置等。
(三)动物饲养实验室必须清洁卫生，通风良好，室温国差应符合实验要求，应有排水、污、采光、调温等设施。并应有专人管理。按编号挂牌、定期淘汰、更新，并有使用记录。
(四)制剂的成品要按规定进行全检，合格后方可使用。
(五)药检室必须有完整的检验卡。检验记录应编号归档，内容包括; 质量标准来源，鉴别试验、测试数据；数据处理。结论等原始资料。
(六)根据检验结果应出具检验报告书，检验人、复核人签字后送药检室负责人审核签字(检验报告书一式二联，第一联存根、第二报告书)。全部的原始记录、检验报告单，按批号装订成册保存三年。检验记录应字迹清楚，内容真实完整并签字，不得撕毁和任意涂改。如需要更正时，应有更改人签字，并须使被更正的部分可以辨认。
(七)药检室对所配的制剂必须建立留样观察制度，指令专人管理，制剂在储存条件下的南量变化规律。留样数量，大输液每批4瓶。针剂(眼药制剂)每批20支。其它制剂品种视其质量稳定情况酌情留样。留样时间：灭制剂品种在本批号制剂用完后，留样留半年后可撤去。其它制剂品种可酌情而定。留样观察：在观察期内选取适当的批数进行规定项目的检验，大输液每月检查一次，其它制品种每月检查一次，认真填定记录，并保存三年。
(八)对制品种必须建立质量档案。内容包括原辅料情况、工艺、质量标准、检验方法的改进、留样观察结果及质量事故返工等。
(九)对质量事故和药物不良反应，应及时向医院药事管理委员会、院长和卫生行政部门汇报。
二、药品检验步骤
药品分析前，应对其外形特征如：色、嗅、味、批号、包装等情况进行说细观查。药品检验操作可作检品采取、鉴别、检查及含量测定等几个步骤。
(一)检品采取
1.检品采取要随机抽样。
2.乳浊液、混悬液等药品。要摇匀后采取。
3.散剂或颗粒状固体的检品，在采取前要经过粉碎、缩分。
4.检品取量。
(二)检品最低取样量，取决于下列条件：
1.颗粒愈大，最低取样量应愈大。
2.药品均匀度愈差，最低取样量应愈大。
3.分析要求准确愈高，允许误差愈小，最低取样量应愈大。
(三)鉴别
1.感官检查 检查外形特征如色、臭、昧等。
2.物理常数测定及光谙分析 如比重、折光率、比旋度及紫外、红外光谱分析等。
3.化学特性试验 是根据检品化学反结构特征与试剂产生反应，以示鉴别。常采用的方法有：试管法、点滴反应、显微结晶反应、及荧光反应法等。
(四)检查
一般检查其氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、水分、鞣质、草酸盐及蛋白质等。常用的制剂则可按不同剂型做规定项目的检查。
(五)含量测定
药品经鉴别及检查后，方可按各有关项下规定的方法做含量测定。
(六)注意事项
1.检验人员操作时须谨慎仔细，并随时详细、真实而整洁地做好检验记录。
2.记录的内容可按不同需要而定，一般包括：检品名称、规格、制造日期、批号，检验目的、送检数量，包装。并记录检验方法，检验者校对者等项。
3.检验人员每当检验完毕，要经详细校对，填写检验报告。并注明“可供药用”，“可供注射用”或、“检验不合格”等字样。
报告单需有检验者，校对者的签署，文字均应书定清晰不得涂改。
三、药品的一般鉴别试验
(一)钾盐
(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色炎焰中燃烧，火焰即显紫色。但有少量钠混合时，须隔蓝色玻璃透视方能辨认。
2K++[PtCI6]2-→K2PtCI6
(2)取供试品溶液，加亚硝酸钴钠试液与醋酸，即发生黄色沉淀。
2K++Na++[Co(NO2)6]3-→K2Na[C(NO2)6]↓(黄色)
该反应在中性或微酸性溶液中进行，因而碱和酸均能分解试剂中的[Co(NO2)6]-3离子，妨碍鉴定。
在碱性中：
[Co(NO2)6]3- +3OH-→Co(NH)3↓+6NO-2
在酸性中：
[Co(NO2)6]3- +6H+→Co+3NO↑+3NO2↑+3H2O
NH+4能干扰反应，NH的存在能与NH+4[Co(NO2)6]作用，生成生成(NH4)Na[Co(NO2)6]沉淀。在鉴定K前应除NH(可用灼烧法除去)，I也有干扰作用(可在蒸发皿中加NHO3蒸发至干而除去)。
(3)取供试品，加热除去可能杂有的盐，放冷后，加水溶解，再加深.1%四苯硼钠溶液与醋权即生白色沉淀。
NaB(C6H5)4+K+→KB(C4H5)6↓+Na+
反应条件须在酸笥(PH2-6.)中进行。
(二)钙盐
(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显砖红色。Ca2++[PtCI6]2-→CaPtCI6
(2)取供试品的中性或碱性溶液，加草酸铵试液，即发白色沉淀；分离，所得的沉不溶于醋酸，但溶于酸。
Ca2++(NH4)2C2O4→CaC2O4↓(白色)+2NH4+
CaC2O4+2HCI→CaCI2+HC2O4
(三)钠盐
取铂丝，用盐权湿润后，蘸取供试品，在色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。
s 2Na++[PtCI6]2-→Na2PtCI6
取供试品的中性溶液，加醋酸铀锌试液，即发生黄色沉淀。
Na++Zn(C2H3O2)2+3UO2(C2H3O2)2+ CH3COOH+9HO2→NaZn(UO2)3( CH3COO-)9·9H2O↓9(黄色+H+(醋酸铀酰锌钠)
(若为钠盐之稀溶液，宜在水浴 上浓的后再检查，如氯化钠注射液)。
(四)铁盐
1.亚铁盐(二价铁盐)
(1)取供试品溶液，加铁氰化钾试液，即发生深蓝色沉淀。分离,沉淀在稀盐中不溶，但氢氧化钠试液，即分解成色棕色沉淀。
(2)取供试品溶液，加强团结%邻二氮菲的乙醇溶液数滴，即显桔红色。
铁盐(三价铁盐)
取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即发生深蓝色沉淀，分离，沉离，沉淀在稀盐酸不溶，但加氢氧化钠试液，即分解成棕色沉淀。
4Fe3++3K4Fe(CN)6→Fe4[F(CN)6]3↓(深蓝色)+12K+
Fe4[Fe(CN)6]3+12N2OH→3Na4Fe(CN)3+4Fe(OH)3 ↓
(2) 取供试品溶液，加硫氰酸铵试液，即成血红色。
Fe3++NH4SCN→Fe(SCN)2+(血红色)
(五)铵盐
(1)取供试品，加过量的氢氧化钠试液后，加热，即分解，发出氨臭，遇显润的红色石蕊试纸，能使变蓝色，并能使硝酸亚汞试液湿润的滤纸变为黑色。
(2)取供试品溶液，加碱性碘化汞钾试液压滴，即产生红色沉淀。
(六)锌盐
(1)取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即发生白色沉淀，分离，沉淀在稀盐酸中不溶解。
3Zn2++2K4[Fe(CN)6]→K2Zn[Fe(CN)6]2 ↓(白色)+6K+
(2)取供试品溶液，以鸹硫酸酸化，加深.1%硫酸铜溶液1及硫氰酸汞铵度液数滴，即发生紫色沉淀，继续滴加硫氰酸汞铵试液，沉淀由紫色变为绿色。
Zn2+与Cu2+同时存在，则Zn2+能促使Cu2+的反应立即共同沉淀出来。随着Zn2+与Cu2+的浓度不同，沉淀显浅紫色、深紫色至绿色。
(七)镁盐
(1)取供试品溶液，加碳酸铵试液，即发生白色沉淀，滴化氯化铵试液，沉淀溶解，再加磷酸氢二钠试液，振摇，即发成白色沉淀。分离，沉淀在氨试液中不溶。
Mg2++(NH4)2CO3→MgCO3↓(白色)+2NH4+
Mg CO32NH4CI→MgCL2+(NH4)CO3→2NH3↑+H2O+CO2↑
MgCL2+Na2HPO4+NH4CI→MgNH4PO4↓(白色)+2NaCI+HCI
(2)取供试品溶液,咖氢氧化钠试液，即发生白色沉淀，分离，沉淀分成两耸，一份加过量氢氧化钠试液，沉淀不溶；另一份中加碘试液，沉淀显红棕色。
Mg2++2NaOH→Mg(OH)2↓(白色)+2Na+
(3)取供试品溶液2滴，加氢氧化钠试液1滴，然后加对硝基苯偶氮间苯二酚试液(镁试液)数滴，显天蓝色沉淀所生成的沉淀，溶于氯化铵试液中。
Mg2++2NaOH→Mg(OH)2↓+2Na+
该反应系一种有机染料吸附Mg(OH)2↓而产生的沉。 如下溶液过酸，呈黄色，可再滴加适量的氢氧化钠试液。
Mg2+(OH)2+2NH4CI→MgCI2+2NH3↑+2H2O
(八)钡盐
(1)取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即显黄绿色，自绿色玻璃中透视，火焰显蓝色。
(2)取供试品溶液，加稀硫酸，即发生白色沉淀，分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。
Ba4+H2SO4→BaSO4↓+2H+
(3)与硫酸及高锰酸钾反应 取供试品溶液1滴，加高锰酸试液及2N硫酸溶液各1滴生成紫色沉淀，加热2-3分钟，再加过氧化氢溶液1滴，紫色不褪。
Ba4与SO4+反应生成BaSO4白色沉淀，但在KMnO4存在时即生成紫色沉淀。如KMnO4换以NaMnO4则BaSO4不染色。由于K+与 Ba2+的离子半径(1.33A和蔼.35A)差不多，K-诱导MnO4-进入 BaSO4晶格形成混晶而成紫色。
(九)银盐
(1)取供品溶液，加稀盐酸，即后成白色凝乳状沉淀。分离，沉淀能在氨试液中溶解而形成[Ag(NH3)2]+络离子，继加硝酸，沉淀复生成。
Ag++HCI→H++AgCI↓(白色)
(2)取供品溶液，加铬酸钾试液，即生成砖红色沉淀。分离，沉淀能在硝酸中溶解。
2Ag++K2CrO4→Ag2CrO↓+2K+
Ag2CrSO4+2HNO3→2AgNO3+H2CrO4↓
(十)铜盐
(1)取供试品溶液,滴加氨度,即生成淡蓝色沉淀物, 再加守量的氨试液,沉淀即溶解,生成深蓝色溶液。
2CuSO4+2OH-→Cu(OH)2SO4↓+SO42-
(蓝色碱式铜盐)
Cu(OH)2SO4+8NH3→2[Cu(NH3)4]2++SO42-+2OH
(深蓝色铜铵络离子)
(2)取供试品溶液，加亚铁氰化钾试液，即后成红棕色沉淀物，沉淀不溶于稀酸及氨水中，但溶于氨氯化铵缓冲溶液中，生成蓝色的[Cu(NH3)4]2+与碱作用被分解成CU(OH)2沉淀。
3Cu2+2K4[Fe(CN)6]→K2{Cu3[Fe(CN)6]2}↓+6K+
K2{Cu3[Fe(CN)6]2}+12NH3+→3[Cu(NH3)4]2++2[Fe(CN)6]4-
+2K+(蓝色)
K{Cu3[Fe(CN)6]2}+6OH-→3Cu(OH)2↓+2[Fe(CN)6]4-+2K+
通常反应在醋酸酸性中进行。
(3)取供试品溶液，加氢氧化钠试液，即产生淡蓝色沉淀，煮沸变为棕黑色。
Cu2++2NaOH→Cu(OH)2↓+2Na+
Cu(OH)2 →C0↓+H2O
△
(十一)铋盐
(1)取供试品溶液，加碘化钾试液，即生成红棕色或暗棕色沉淀物，分离，沉淀能溶解于过量的碘化钾试液中，成为黄棕色的溶液。加蒸馏水稀释可又发生橙色沉淀。
Bi3++3KI→BiI3↓+3K+
Bi3++KI→KbiI4
继续加蒸馏水稀释，络合盐即分解，先形成碘化铋而生成橙色的氧碘化铋沉淀物。
KbiI4+HO →BiOI↓+2HI+KI
如Bi3+浓度较小时，此步反应现象不太明显。
(2)取供试品溶液，加稀硫酸酸化，加10%硫脲溶液，即呈深黄色。
硫脲与多数金属离子有颜色反应，如Bi3+对特别敏锐(1μg)，络合物的颜色，视组成不同而异。
[Bi3+:CS(NH2)2:1:1黄褐色;1:2黄色;1:3:黄褐色]。如
BiCI3+CS(NH2)2→Bi[CS(NH2)2]CI3
(黄色络合物)
此反应亦可用于铋的比色测定。
(3)取供试吕溶液，通硫化氢气，即发生棕黑色沉淀，能在热硝酸中溶解，但在氢氧化钠、稀盐酸或硫化液中均不溶。
Bi3++3HS→Bi2S3↓+6H+
Bi2S3+6HCI→2 BiCI3+3H2S↑
(十二)锑盐
(1)取供试品溶液，加稀盐酸成酸性后，加水至恰有白色混浊发生，加热，趁热加入硫代硫酸钠试液，即后成橙红色沉淀。
2Sb3++3S2O32-→4SO2↑+Sb2OS2↓
(橙红色硫氧化锑)
(2)取供试品溶液，加衡盐酸成酸性后，通硫化氢气，即生成橙色沉淀物。分离，沉淀在硫化铵度液或硫化钠试液中溶解。
2Sb3++3H2S→Sb2S3↓+6H+
(橙色)
2Sb5++5H2S→Sb2S5↓+10H+
(橙色)
Sb2S3+3(NH4)2S→2(NH4)3SbS3
Sb2S5+3(NH4)2S→2(NH4)3SbS4
(十三)铝盐
(1)取供试品溶液，加氢氧化钠试液，即了生白色胶状沉淀。分离，沉淀分成二份，一份中加入过量的氢化钠试液；加一份中加入稀盐酸沉淀均即溶解。
AI3++3OH-→AI(OH)3↓(白色)
(2)取供试品溶液，加氨试液至生成白色胶状沉淀，滴加0.1%茜素磺酸钠溶液数滴，沉淀即显樱红色。
AI3++3OH-→AI(OH)3↓
注：试剂茜素磺酸钠(Alizarihn-S)化学名为1，2-二羟基蒽醌磺酸钠(1，2-dihydroxy-anlhraquinone)。
(3)取供试品溶液，加硫化钠试液，即后成白色胶状沉淀，分离，沉淀在过量的硫化试液中溶解。
2AI3++3Na2S+6H2O→2AI(OH)3↓+3H2S↑+6Na+
2AI(OH)3+Na2S→2Na(AIO2)+H2S↑+2H2O
(十四)汞盐
亚汞盐(一价汞盐)
(1)取供试品，加氨试液或氢氧化钠试液，即变黑色。
Hg2(NO3)2+2NH4OH→HgNH2NO3↓+Hg↓+NH4NO3+H2O
Hg2(NO3)2+2NaOH→Hg(OH)2↓+2NaNO3
Hg2(OH)2→Hg2O↓+H2O
(2)取供试品，加碘化钾试液振摇，即发生黄绿色沉淀，瞬即变为灰绿色，并逐渐转变为灰黑色，灰绿色沉淀在过量碘化钾试液中溶解。
Hg2(NO3)2+2KI→Hg2I2↓(黄绿色)+2KNO3
Hg2I2+2KI→Hg()↓(黑色)+K[HgI2](溶解)
(3)取供试品溶液，加盐酸，即产生白色沉淀，在水中不溶，加氨试液即变黑色。
Hg22++2HCI→Hg2CL2↓+2H+
Hg2CL2+2NH3→Hg(NH)CI↓+Hg↓NH4CI
汞盐(二价汞盐)
(1)取供试品溶液，加氢氧化钠试液，即发生黄色沉淀。
Hg(NO3)2+2NaOH→HgO↓(黄色)+2NaNO3+H2O
(2)取供试品的中性溶液，加碘化钾试液，即发生猩红色沉淀，能在量过的碘化钾试液中溶解。再以氢氧化钠试液碱化，加铵盐即生成红棕色的沉淀。
HgCI2+2KI→HgI2↓(猩红色)+2KCI
HgI2+2KI(过量)→K[HgI4](溶解)↓
(3)取供试品溶液，通硫化氢气，即产生黑色沉淀，分离沉淀的硫化铵试液或沸稀硝酸中不溶。
Hg2++H2S→HgS↓+2H+
(十五)铅盐
(1)取供试品溶液，加盐酸，即产生白色沉淀，在沸水中溶解，但冷却后结晶析出。
Pb2++2HCI→PbCI2↓+2H+
(2)取供试品溶液，加铬酸钾试液，即产生黄色沉淀，在氢氧化钠试液或热硝酸中易溶，在稀硝酸微深，在醋液中不溶。
Pb2++K2CrO4→PbCrO4↓+2H+
PbCrO4+3NaOH→NaHPbO2+Na2CrO4+H2O
PbCrO4+2HNO3(热)→Pb(NO3)2+H2CrO4
(3)取供试品溶液，加碘化钾试液，即产生黄色沉淀，煮沸，即可溶解。放冷，则析有光的板状结晶。
(十六)氯化物
取供试品溶液，加氨试液使成碱性，如有沉淀生成需过滤，滤液分成2份。
(1)加销酸使成酸性，加硝酸银试液，即发生白色凝乳状沉淀，分离出沉淀能在氨试液中溶解，再加硝酸沉淀复生成。
CI-+AgNO3→AgCI↓(白色)+NO3-
AgCI+2NH4OH→[Ag(NH3)2]CI(银氨铬离子而溶解)+2H2O
[Ag(NH3)2]CI+2HNO3→AgCI↓+2NH4NO3
(2)加稀硫酸使成酸性，加锰酸钾结晶数粒，加热，即放出氯气，能使碘化钾淀粉试纸显蓝色。
10CI-+2KMnO4+8H2SO4→5CI2↑+K2SO4+2MnSO4+8H2O+5SO42-
2KI+CI2→2KCI+I2
I2+淀粉→显蓝色(吸附化合物)
(十七)溴化物
(1)取供试品溶液，加硝酸钾试液，即产生淡黄色凝乳状沉淀。分离，沉淀能在 试液中微溶，但几乎不溶于硝酸中。
Br-+AgNO3→AgBr↓(黄色)+NO-3
AgBr+2NH4OH→Ag(NH3)2++ Br-+2H2O
在硝酸中几乎不溶，与其他银盐的沉淀区分(AgS↓、AgCO3↓等溶于硝酸中)。
(2)取供试品溶液，滴加氯试液，溴即游离，加氯仿振摇，氯仿层黄色或红棕色。
2Br-+CI2→Br+2CI-
Br-+氯仿→溶于氯仿层中，低浓度时呈黄色，高浓度时呈红棕色。
(十八)磺化物
(1)取供试品溶液，加硝酸银试液，即发生黄色凝乳状沉淀。分离沉淀在硝酸或氨试液中均不溶解。
I-+AgNO3→AgI↓(黄色)+NO3-
(2)取供试品溶液，加少量的氯试液，碘即游离，如加氯仿振摇，氯仿层显紫色，如加淀粉指示液，溶液显蓝色。
2I-+CI2→I2+2CI-
I2+氯仿→溶于氯仿层中显紫色
I2+淀粉→蓝色(吸附化合物)
(3)取供试品溶液，加二氯化汞试液，即发生猩红色沉淀。在过量的二氯化汞试液中微溶，在化碘钾试液中易溶。
2I-+HgCI2→HgI2↓(猩红色)+2CI-
HgCI2+2KI→K2[HgI4](碘化汞钾，溶解)
(十九)有机氟化物
取供试品约7 mg照氧瓶燃烧法(中国药典77年版附录74页)进行有机破坏，用水20ml与N/100氢氧化钠液6.5ml为吸收液，俟燃烧完毕后，充分振摇，取吸收液2ml，加茜 素氟蓝试液0.5ml，再加含有12%醋酸钠与6%醋酸溶液0.2ml，用水稀释至4ml，加硝酸琰亚钸液0.5ml，即显蓝紫色。
(二十)水杨酸盐
(1)取供试品稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。
(2)取供试品溶液，加稀盐酸，即析出白色杨酸沉淀，分离，沉淀在醋酸铵试液中溶解。
(二十一)苯甲酸盐
(1)取供试品的中性溶液，加三氯化铁试液，即发生赭色沉淀，加稀盐酸变为白色沉淀。
(2)取供试品，置干燥试管中，加硫酸后，加热，碳化，但析出苯甲酸在试管内壁，凝结白色升华物。
(二十二)醋酸盐
(1)取供试品溶液，加硫酸后，加热，即分解发生醋酸的特臭。
(2)取供试品溶液，加硫酸和少量的乙醇，加热即发生，醋酸乙酯的特殊臭气。
2CH3COO-+H2SO4→2CH3COOH+SO42-
(3)取供试品溶液，加三氯铁试液，应显深红色，煮沸后产生红棕色沉淀，再加盐权，即分解成黄色溶液。
3CH3COO-+FeCI3→(CH3COO-)3Fe(深红色)+3CI-
Fe(OH)2(CH3COO-)+3HCI→FeCI3+2H2O+CH3COOH
(二十三)磷酸盐
(1)取供试品的中性溶液，加硝酸银试液，即发生浅黄色沉淀，分离沉淀氨试液或稀硝酸中均易溶解(与Br-产生的AgBr↓相区别)。
Po43+3AgNO3→AgPO4↓(浅黄色)+3NO3-
AgPO4+6NH4OH→3Ag(NH3)2OH(溶解)+H3PO4+3H2O
AgPO4+3HNO3→3AgNO+H3PO4
(2)取供试品溶液，加化铵镁试液，即发生白色结晶性沉淀。
HPO42-+MgCI+NH4OH→Mg(NH4)PO4↓(白色)+2CI-+H2O
(3)取供试品溶液，加钼酸铵试液与硝酸后，加热，即产生黄色沉淀。分离,沉淀能在氨试液中溶解。
在NH4OH或NaOH碱性溶液中，反应平衡向左方移动，而使沉淀溶解。
(二十四)乳酸盐
取供试品溶液，加硫酸使成酸性后，加高锰酸钾试液，加热，即发生乙醛的特臭。
(二十五)硫酸盐
(1)取供试品溶液，加氯化钡试液，即发生白色沉淀，分离，沉淀在盐酸或硝酸中均不溶解。
SO42-+Ba2+→BaSO4↓()
在硝酸和盐酸均不溶解，以与碳酸盐区别，因为若碳权 存在，则加入氯化钡试液也能生成BaCO3↓，但它溶解于盐酸和硝酸中(生成氯化钡和硝酸钡，放出二氧化碳)。
(2)取供试品溶液，加醋酸铅试液，即发生白色沉淀，分离，沉淀在醋酸试液或氢氧化试液中溶解。
SO42-+Pb(CH3COO-)2 →PbSO4↓()+2CH3COO-
PbSO4+2CH3COONH3→Pb(CH3COO-)2+(NH4)2SO4
(二十六)硝酸盐
(1)取供试品溶液置试管中，加等量的硫酸，注意混合冷后，沿管壁加硫酸亚铁试液，使成两液层，接界面显棕色。
NO3-+H2SO4→HSO4-+HNO3
6FeSO4+2HNO3+3H2SO4→3Fe2(SO4)3+2NO+4H2O
FeSO4+NO→[Fe(NO)]SO4(棕色)
(2)取供试品溶液，加硫酸与铜丝或铜屑加热，即发生红棕色的蒸气。
(二十七)亚硝酸盐
(1)取供试品溶液，加小量醋酸， 再加硫酸亚铁试液，即显深棕色。
NO2-+CH3COOH→CH3COO-+HNO2
3HNO2→H2O+HNO3+2NO
FeSO4+NO→[Fe(ON)]SO4(深棕色)
(2)取供试品溶液，加稀硫酸，碘化钾试液与淀粉指示液的混合液数滴，即显蓝色。
2NHO2-+H2SO4→2HNO2+SO4-
2HNO2+2KI+H2SO4→I2+K2SO4+2NO+H2O
(3)取供试品溶液，加稀硫酸使成酸性后，加入高锰酸钾试液数滴，颜色即消退。
3NO2++KMnO4+2H+→Mn(NO3)2+KNO3+H2O
(二十八)硼酸盐
(1)取供试品溶液，加盐酸使成酸性后，能使姜黄试纸变成棕红色，放置干燥，颜色即变深，用氨试液湿润，即变为绿黑色。
B4O72-+2HCI+5H2O→4H3BO3+2CI-
姜黄素
(2)取供试品，加硫酸，混合后，加甲醇，点火燃烧，即发生过缘带绿色的火焰。
B4O72-+H2SO4+5H2O→4H3BO3+SO42-
H3BO3+3CH3OH→B(OCH3)3+3H2O
(1)取供试品溶液，加稀酸，即泡沸，发生二氧化碳气，此气通入氢氧化钙试液中，即发生白色沉淀。
CO32-+2H+→H2CO3→H2O+CO2↑
HCO32-+H+→H2CO3→H2O+CO2↑
CO2+Ca(OH)2→CaCO3↓(白色)+H2O
(2)取供试品溶液，加硫酸镁试液，如为碳酸盐溶液，即发生白色沉淀,如为碳酸氢盐溶液，须煮沸，始发白色沉淀。
(3)取供试品溶液，加酚酞指示液，如为碳酸盐溶液，即显深红色，如为碳酸氢盐溶液，不变色或仅显微红色。
(三十)枸橼酸盐
(1)取供试品溶液，加稀硫酸1滴，加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失，加硫酸汞试液1滴，发生白色沉淀。
(2)取供试品的中性溶液，加过量的氯化钙试液，冷时无变化，煮沸，即产生白色的颗粒的性沉淀，能在醋酸或稀酸中溶解，但在氢氧化钠中不溶。
(3)取供试品的的中性溶液，加过量的硝酸银试液，即产生白色沉淀，；能中硝酸或氨试液中溶解，取氧性溶液置试管中，加热，管壁不显银镜。
(三十一)亚砷酸盐
(1)取供试品的中性溶液，加硝酸银试液，即发生黄沉淀，能在氯试液或稀硝酸中溶解。
AsO33+3AgNO3→Ag3AsO3↓(黄色)+3NO3-
Ag3AgO3+6NH4ON→3Ag(NH3)2OH(溶解)+3H3AsO3+3H2O
Ag3AgO3+3HO3→3AgNO3+H3AsO3
沉淀在氨试液或稀硝酸中溶解，而与产生的溴化银、碘化银黄色的沉淀所区别。
(2)取供试品的中性溶液，加硫酸铜试液。即产生绿色沉淀，再加氢氧化钠试液，煮沸，沉淀变为红色。
2AsO33-+3CuSO4→Cu3(AsO3)2↓()+3SO42-
Cu3(AsO3)2+6NaOH→3Cu(OH)2+2Na3AsO3
(三十二)砷酸盐
(1)取供试品1滴，加硝酸银试液1滴，应发生红棕色的沉淀，能溶于氨试液中。
AsO33-+3AgNO3→Ag3AsO4↓+3NO3-
Ag3AsO4+6NH4OH→3Ag(NH3)2OH+H3AsO4+3H2O
(2)取供试品1滴，加盐酸1滴，加碘化钾试液，1滴，应析出游离碘。
AsO33-+2HCI+2KI→I2+2KCI+ AsO32++H2O
(三十三)硫代硫酸盐
(1)取供试品溶液，加盐酸，即产生白色沉淀，迅速又变成黄色并发出二氧化硫的特殊剌激性臭气。
(2) 取供试品溶液，加三氯化铁试液，即显紫堇色，振摇后即消褪。
SO2232-+FCI→[Fe(S2O3)2]-()+3CI-
[Fe(S2O3)2]-+CI-+FeCI3→SO2262-+2FeCI2
(3) 取供试品溶液，加醋酸铅试液，即产生白色沉淀，如再加过量醋酸铅试液，即溶解，如煮沸，沉淀变黑色。
SO2232-+(CH3COO-)2Pb→PbS2O3↓(紫堇色)+2CH3OO-
PbS2O3+H2O→PsS0(白色)↓
(三十四)亚硫酸盐或亚硫酸氢盐
(1)取供试品溶液，加盐酸，即发生二氧化硫的气体，有剌激性特臭，并能使润湿的硝酸亚汞试纸变成黑色。
Hg2(NO3)2+SO2+2H2O→2Hg↓+2HNO3+H4SO4
(2) 取供试品溶液，滴加碘试液，碘的颜色即消褪。
SO32-+I2+H2O→SO42-+2HI
HSO3-+I2+2H2O→2H2SO4+2HI
(三十五)酒石酸盐
(1)供试品的中性溶液，置试管中，加硝酸银试液数滴，即发生白色沉淀，用少量氨试液使沉淀溶解后，将试管置水浴中，银即游离，附在试管内形成银镜。
(2)供试品溶液，加醋酸呈酸性后，加硫酸亚铁试液1滴，过氧化氢试液1滴，俟溶液褪色后，用氢氧化钠试液碱化，溶液即显紫色。
(三十六)哌生物碱类
供品约为10mg，加发烟硝酸5滴，置水浴上蒸干，即得黄色的残渣，放冷，加取乙醇制氯化钾试液3-3滴，即湿深紫色。
(三十七)芳香第一胺类
取供试品约5mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加M/10亚硝酸钠液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴视供试品不同，发生由橙黄到猩红色沉淀。如普鲁卡因。
普鲁卡因，苯佐卡因及磺胺类药物均呈此反应。
(三十八)苯酚(酚羟基反应)
(1)取供试品溶液1滴，加三氯化铁试液2滴，呈紫堇色。
(2)取供试品1滴，加溴试液，生成黄色白色沉淀。
根据不同的酚羟基物质呈现蓝色、绿色、紫色等。肾上腺素、吗啡、雷琐辛及水亿酸盐等呈此反应。
(三十九)玫瑰药青素(Rosecranine)
取供试品溶液，加硫酸混合后，加甲醇，点火燃烧，即发生边缘带绿色的火焰。
B4O72-+H2SO4+5H2O→4H3BO3+SO42-
H3BO3+3CH3OH→(CH3)3BO3+3H2O
(四十)丙二酰脲类
(1)取供试品约0.1g加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2分钟，滤过，滤液中逐渐滴加入硝酸银试液，即发生白色沉淀，振摇，沉淀溶解，继续滴加过量的硝银试液，沉淀不再溶解。
(2)丙二酰类分子中含有一CONHCONHCO-的结构，与铜盐作用能产生类似双缩脲的颜角反应，与吡啶和硫酸铜溶液作用，显紫色(ZW-ikker反应)。
(四十一)乙醇基(C2H5O-)及甲基酮(CH3CO-)
取供试品溶液，加入碘试液及氢氧化钾试液，稍加温后，即生成特殊臭的碘仿，量大时可生成黄色的碘仿沉淀。
C2H5OH+4I2+6KOH→CHI3↓+5DI+HCOOK+5H2O
CH3·CO-R+3I2+4KOH→CHI3↓+RCOOK+3KI+3H2O
乙醇、苯佐卡因、优奎宁，普卡因狄奥宁等均呈此反应。
(四十二)乙酰基(CH3COO-R)
取供试品溶液，加乙醇2～3滴及硫酸2ml，加热，即发生乙酸乙酯的香气。
乙酰胂胺、乙酰唑胺及冰醋酸等均呈此反应。
(四十三)生物碱沉淀反应。
取供试品加水(或酸性水溶液)溶解后，滴加碘一碘化钾试液或碘化钾试液，即形成沉淀。生物碱及季铵等均呈此反应；如咖啡因，用盐酸酸化，加碘化铋钾试液，生成棕红色沉淀。
BH+KbiI4→BH·BiI4
而可待因的沉淀级成为(BH)(BiI4)I2
(四十四)卤素化合物的反应
取铜片于无色的火焰中，加热后放冷，蘸取供试品少许，再置无色火焰中燃烧，即显绿色火焰。
一溴樟脑及水合氯醛等卤素化合物均呈此反应(极为灵敏)。
(四十五)还原糖反应
取碱性酒石酸铜试液，加放供试品，缓缓加热，即生成氧化亚铜的红色沉淀。
CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2+Na2SO4
葡萄糖、果糖及水解邱的乳糖和丁均呈此反应。其它如维生素C及含有20一酮一21羟基甾体(如化泼尼松、氟美松、氟氢可的松及肤因松等)，因其具有还原性，亦有此反应。
(四十六)氨基酸、肽类、蛋白质纸层析呈色反应。
用0.2%茚三酮乙醇溶液鉴别，反应灵敏，层析滤纸等不宜用手指多接触，亦不宜与氨气接触，否则纸背呈红色。
茚三酮不仅与α氨基酸作用，也与某些β氨基酸和伯、仲脂肪胺等作用，生成相似的有色物质。对脂肪族叔胺或芳无作用。对多肽也能显色，但肽越大度越低。吲哚醌试剂也有相似作用，其灵敏度不及茚三酮高。但对不同氨基显不同色调。
茚三酮反应原理：对α氨基酸先起氧化，脱氨化应之分解成氨，二氧化碳和醛，茚三酮本身被还原，再与生成的氨缩合成紫色物质。
吲哚醌与α氨基酸反应：对辅氨酸、组氨酸呈蓝色；对色氨酸、甲硫氨基酸呈绿色；对亮氨酸、丝氨酸呈红色等。对一些小肽也能显色，但肽越大灵敏芳越低，色差也小，接近黄色。
(四十七)甾体类、三萜类
甾体类、三萜类的显色剂，均属酸类，其中有强酸如硫酸、磷酸、氯磺酸高氯酸、三氟乙酸；中等强度的酸如三氯乙酸，也有三氯化锑、二氯化锌等Lewis氏酸。
挥发油属萜类，若油斑未消失前，喷5%香蓝醛的浓盐酸试液后，可呈现黄、红、蓝等色。油脂无此反应。
四、中草药化学成分一般鉴别方法
中草药主要来源于植物。植物的化学成分较复杂，有些成分是植物所共有的，如纤维素、蛋白质、油脂、淀粉、糖类、色素等。有些成分仅是某些植物所特有的，如生物碱类、甙类、挥发油、有机酸、鞣质等。
各类化学成分均具有一定的特性，一般可由药材的外观、色、嗅、味等作为初步检查判断的手段之一。如药材样品折断后，断面不油点或挤压后有油迹者，多含油脂或挥发油；有粉层的多含淀粉、糖类；嗅之有特殊气味者，大多含有挥发油、香豆精、内酯；有甜奈者多含糖类；味若者大多含生物碱、甙类、苦味质；味酸者含有有机酸；味涩者多含有鞣质等等。
中草药所含化学成分均为多类的混合物，分析时常常互相干扰，不易得到正确结果。因此需根据中草药所含各种化学成分的溶解度、酸碱度、极性等理化性质，再用各类成分的鉴别反应加以鉴别。
(一)鉴别注意事项
1.根据各灰成分不同性质，选用适宜的溶剂提取，以保证等成分能被提取出来。
2.检品提取液的浓度应足以达到各该反应的灵敏度。
3.检品提取液的酸碱度(pH)值应不致影响鉴别反应中所需要的pH值。相差甚大时应事先调节。
4.提取液较深时，常易影响观察鉴别反应的效果，此时可适当稀释，或进一步提纯。
5.鉴别反应时应注意防止多类成分的相互干扰，以免出现假阳性，或颜色不正等情况。最好在化学鉴别的同时，做空白试验和对照试验(用已知含某类成分的中草药或纯品做阳性对照)。
6.在鉴别试验中，如果某一类成分的几个鉴别反应结果不一致时(即有的呈阳性反应，有的呈阴性)则应进行全面分析。首先应注意呈阳性反应的试验是否属于该类成分的专一反应，否则应检查其他类成分能否产生该反应，从多方面加以判断。但也应注意，某些反应只能对某一类成分中的某个化学基团呈性反应，如检查黄酮类的盐酸――镁粉试验，它只对黄酮类中的羟基黄酮类(黄酮醇类)反应明显，其余类的黄酮类则不甚明显，但也不能轻易否定不是黄酮类，为了避免孤立和片面的下结论，一定要全面考虑综合分析。
中草药化学成分一般鉴别试验屯只是一个初步判断，最后确证尚需进一步提纯，以鉴定后才能予以肯定。
(二)鉴别方法
蛋白质、多肽、氨基酸
(1)加热或矿酸试验：取检品的水溶液1ml于试管中，加热至沸或加5%盐酸，如发生混浊或有沉淀示含有水溶性蛋白质。
(2)缩二脲试验：取检品的水溶液1ml，加10%氧化钠溶液2滴，充分摇匀，逐渐加入硫酸铜试液，随加摇匀，注意观察，如呈现紫色或紫红色示可能含有蛋白质和氨基酸。
凡蛋白质结构中含有两个或两个以上肽键(-CONH-)者均有此反应，能在碱性溶液中与Cu2+生成仙络合物，呈现一系列的颜色反应，二肽呈蓝色，三肽呈紫色，加肽以上呈红色，肽键越多颜色越红。
(3)茚三酮试验，取检品的水溶液1ml，加入茚三酮试液2-3滴，加热煮沸4-5分钟，待其冷却，呈现红色棕色或蓝紫色(蛋白质、胨类、肽类及氨基酸)。
α氨基酸与茚三酮的水合作物作用，氨其酸氧化成醛、氨和二氧化碳，而茚三酮被还原成仲醇，与所后成的氨及另一分子茚三酮缩合生成有蓝紫色的化合物。
【注】①茚三酮试剂主要是多肽和氨基酸的显色剂，反应在1小时内稳定。试剂溶液pH值以5-7为宜，必要时可加吡啶数滴或醋酸钠调整。
②此反应非常灵敏，但有个别氨基酸不能呈紫色，而呈黄色，如脯氨酸。
(4)氨基酸薄层层析检出反应：
①吸附剂：硅胶G。
②展开剂：(1)正丁醇：水(1：1)(2)正丁醇：醋酸：水(4：1：5)
③显色剂：0.5%茚三酮丙酮溶液，喷雾后于1100烘箱放置5分钟，显蓝紫允或紫色。
2.皂甙
(1)泡沫试验：取检品的水溶液2ml于带塞试管中，用力振摇3分钟，即产生持久性蜂窝状泡沫(维持10分钟以上)，且泡沫量不少于液体体积的1/3。
【注】常用的增溶剂吐温、司盘，振摇时均能产生持久性泡沫，要注意区别。
(2)溶血试验：取试管4支，分别加入滤液0.25、0.5、0.75 ml，然后依次分别加入生理盐水2.25、2.0、1.75、1.5 ml，使每一个试管中的溶液都成为2.5ml, 再将各试管加入2%的血细胞悬液2.5ml，振摇均匀后，同置于370水浴或25-270的室温中注意观察溶血情况，一般观察3小时即可，或先滴红细胞于显微镜下，然后滴加检液看血细胞是否消失。如有溶血现象示正反应。
【注】①鞣质对血红细胞有凝集作用，干扰溶血试验的观察，应事先除去(可用取胜酰胺粉吸附或用明胶沉淀)。
②检液应为中性溶液。
(3)醋酐浓硫酸试验(Liebrmann Burchard反应)取检品的水溶液置蒸发皿中，于水浴上蒸干，残渣加入少量冰醋酸使溶解，再加入醋酐浓硫酸(19：1)试液，呈现红紫色并变成污色绿色(甾类、三萜类成分或皂甙)
(4)区别甾体皂甙和三萜皂甙：取带塞试管两支，各盛检品的水溶解1 ml，1支加0.1N盐酸溶液2ml，另一支加0.1N氢氧化钠溶液2ml用力振摇1分钟(需左右手交替振摇各半分钟)，观察两管泡沫的多少，若两管泡沫体积相同或酸管多，示含三萜式皂甙；若加碱管泡沫多于加酸管示含甾示含甾体皂甙。
三萜皂甙为酸性皂甙在酸性水溶液中形成较稳定的泡沫；甾体皂甙为中性皂甙在碱笥溶液中能形成较稳定的泡沫。
3.糖、多糖或甙类
(1)碱性酒石酸铜试液：取检品的水溶液1-2ml(如为醇溶液须将醇蒸发除去)，加入碱笥酒石酸铜试液1ml，于沸水浴上加热5分钟，产生棕红色或砖红色氧化亚铜沉淀，示有还原糖。
还原糖能使二价铜盐(蓝色)还原成氧化亚铜，醛糖的醛基氧化成羧基：
【注】①如检液呈酸性，应先碱化。
②此反应所产生的沉淀由于条件不同，其颜色也不同，质点上的呈黄色，质点大的呈红色。有保持性胶体存在时，也常产生黄色沉淀。
③职样品中含有其他醛、酮及还原较强的其他成分，或中划药制剂中附加的抗氧剂、；葡萄糖等均可显阳性反应。
(2)α萘酚试验(Molisch紫环反应)：取检品的水溶液1ml，加5%萘酚试液数滴振摇后，沿管壁滴入5-6滴浓硫酸，使成两液层，待2-3分钟后，两层液面出现紫红色环(糖、多糖或甙类)。
多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱水闭环，形成糠醛类化合物，在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应，生成紫红色缩合物。
【注】①甙的分子结构中含有糖基，一般属于单糖类，如葡萄糖，鼠李糖、半乳糖，但也有含二分子糖(双糖)或多分子糖(多糖)。在上述反应条件下，甙被水解成单糖，因此甙萘酚试验，系分子中糖部分的反应。
②由于此反应较为灵敏，如有微量滤纸纤维或中草药粉末存在于溶液中，都能产生上述反应。故滤过时应加注意。
(3)多糖的确证试验：取检品的水溶液5ml于水 蒸发至干，加入1ml蒸馏水，再加入乙醇5ml，如出现沉淀，滤过收集后用少量热乙醇洗涤，再将沉淀物溶于3ml蒸馏水中，做下例试验。
①碘试验：取检品的不溶液1ml，加碘试液1滴，观察颜色变化，如呈蓝黑色为地衣糖；紫黑色为糊精；蓝色加热消失，冷后蓝色再现为淀粉。
②多糖水解：取检品的水溶液1ml，加入稀盐酸5滴，置沸水浴中加热10-15分钟，然后用10%氢氧化钠液中和至中性，再加新配制的碱性酒石酸铜试淮4滴，另取检液1ml，不加酸水解直接加入上述试液4滴，两管同置水浴上煮沸5-6分钟。如果水解后生成棕红色常常物的量比未经水解的多，则示有多糖。
多糖水解后产生单糖，利用单糖的还原性，使铜离子还原成氧化亚铜。
4.鞣质及酚类
(1)三氯化铁试验：取检品的水溶液1ml，加三氯化铁试液1-2滴，呈现绿色、污绿色、蓝黑色或暗紫色(可水解鞣质显蓝一蓝黑色，缩合鞣 显绿色一污绿色)。
鞣质均是多羟基酚的衍生物，即多元酚，能和三价铁离子发生颜色反应生成复杂的络盐。
【注】此反应如遇有矿酸或有机酸、醋酸盐等存在，能阻碍颜色的生成。硝基酚类对三氯化铁试剂无明显反应。
(2)明胶试验：取检品的水溶液1ml，加氯化钠明溶液2-3滴，即生成白色沉淀物。
鞣质有凝固蛋白的性能。
(3)溴试验：取检品的水溶液1ml，加溴试液1-2滴，生成白色或沉淀物，示可能含有酚或儿茶酚鞣质。
【注】过多的溴会阻碍鞣质的沉淀，因此溴水不宜多加。
(4)香草醛一酸试验：取检品的水溶液点于滤纸片上，干后，喷雾或滴加香草醛一盐酸试液，呈现红色斑点(多元酚类物质)。
(5)鞣质、酚类薄层层析检出反应：
①吸附剂：聚酰胺；硅胶；硅胶；石膏：水(5：1：7)调成状，涂成薄板，1050烘干45分钟。
②展开剂：乙醇：醋酸(100：2)；正丁醇：乙酸乙酯：水(5：4：1)；苯：甲醇(95：5)。
③显色剂：10%三氯化铁溶液；1%三氯化铁乙醇溶液与1%铁氰化钾水溶液(1：1)显蓝一紫色斑点。
5.黄酮及其甙类
(1)盐酸一镁(或锌)粉试验：取检品的乙醇溶液1ml，加放少量镁粉(或锌粉)，然后加浓盐酸4-5滴，置沸水浴中加热2-3分钟，如出现红色示有游离黄酮类或黄酮甙(以同法不加镁或粉做一对照，如两管都显红色则有花色素存在。如继续加碳酸试液使成碱笥即变成紫色双转变为蓝色，即证明含花色素)。
黄酮类的乙醇溶液，在盐酸存在的情况下，能被镁粉还原，生成花色甙元而呈现红色或紫色反应(个别为淡黄色、橙色、紫色或蓝色)。这是由于酮类化合物分子中含有一个碱性氧原子，致能溶于稀酸中被还原成带四价的氧原子即锌盐。本法是鉴别黄酮类的一个反应。但花色素本身在酸性下(不需加镁粉)呈红色，应加以区别。
【注】①此反庆仅在化学结构中，第三位上带羟基的酮醇类显色较明显，而其它黄酮烷酮类均不甚明显。因此试验呈阴性反庆是不能做出否定的结论，尚需结合其他实验再做结论。
②试验应在醇中进行，水分多会影响颜色的生成。此反庆较慢，有时需置水浴上加热，以促使反应的进行。
(2)荧光试验：
①三氯化铝试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上(干后再点1次，使其浓度庥中)，干后，喷雾1%三氯化铝乙醇试液，在紫外光灯下观察，呈现黄色、绿色、橙色等荧光为黄酮类；呈现天蓝色或黄绿色；荧光，则为二氢黄酮类。这是区别二氢黄酮类化合物的一种鉴别反应。
②硼酸丙酮枸橼酸丙酮试验：取检品的乙醇溶液1ml，在沸水浴上蒸干加入饱和硼酸丙酮溶液及10%枸橼酸丙酮溶液各0.5ml，蒸去丙酮后，在紫外光灯下观察，管内呈现强烈的绿色荧光(黄酮或其甙类)。
(3)碱液试验：取检品的乙醇溶液点于滤纸片上(干后，再点一次，使其溶液集中)，干后，喷1%碳酸钠溶液或在氨蒸气中熏几分钟，呈现亮黄、绿或橙黄色。如将氨气熏过的滤纸露置空气中，颜色逐渐裉去而变为原有的颜色(黄酮或其甙类)。
| 试剂 |
一 |
NH3 |
AICI3 |
Na2CO3 | |||||
| 光线 |
ViS. |
U.V |
ViS. |
U.V |
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