·技术与方法·

    突变扩增系统法检测SRD 5A 2 基因

    R 227Q 突变

    光炜 周李 曾瑞萍3

    杜传书

    【摘要】 目的 建立一种简易、准确的2 型 5A还原酶(SRD5A 2)基因分析方法。方法 采用突变扩增

    系统, 对23 例先天性尿道下裂患儿及正常标本进行SRD5A 2 基因R227Q 突变分析, 对阳性者进行DNA 测

    序证实。结果 23 例先天性尿道下裂患儿中, 3 例为SRD5A 2 基因R227Q 突变阳性(2 例为突变纯合子, 1

    例为杂合子) , 与测序结果一致; 其余及正常对照均为阴性。结论 此法简单、快速、准确、易于推广, 可作为

    先天性尿道下裂中SRD5A 2 基因突变的筛查方法。

    【关键词】 5A 2 还原酶基因 突变 突变扩增系统 尿道下裂

    Detect ion of R227Qmutat ion of SRD5A2 gene by ampl if icat ion refractorymutat ion system GUA N GW ei,ZH OU L i, Z EN G R u ip ing

    3

    ,DU Chuanshu. 3 D ep artm ent of M ed ical Genet ics, S un Y at2 sen U niversity of

    M ed ical S ciences,Guang z hou 510089 P. R. Ch ina .

    【Abstract】 Object ive To set up a simp le method fo r ident ifying the mutat ion of R227Q of SRD5A 2

    gene w h ich is one of themo st common mutat ions in congenital hypo spadias in Ch ina . Methods The amp li2

    f icat ion ref racto ry mutat ion system (ARM S) w as emp loyed in detect ing the SRD5A 2 gene R227Q mutat ion

    in congenital hypo spadias conf irmed by po lymerase chain react ion2single st rand confo rmat ion po lymo r2

    ph ism and DNA sequencing . Results The ARM S w as successfully app lied to the detect ion of the R227Q

    mutat ion of SRD5A 2 gene . Th ree out of 23 congenital hypo spadias w ere po sit ive fo r R227Q mutat ion . The

    mutat ions determ ined by ARM S w ere in full agreement w ith tho se obtained by the DNA sequencing . Con-

    clus ion Th is is a simp le, rap id and accurate method . It can be used fo r detect ing the SRD5A 2 gene R227Q

    mutat ion in congenital hypo spadias and male p seudohermaph rodit ism.

    【Key words】 SRD5A 2 gene M utat ion Amp lif icat ion ref racto rymutat ion system Hypo spa2

    dias

    研究表明, 胚胎期男性外生殖器的发育与睾丸内

    雄激素 (睾酮和双氢睾酮) 水平密切相关。双氢睾酮

    生物学效应是睾酮的50 倍, 是促使胚胎期男性外生殖

    器发育的主要雄激素。5A还原酶催化睾酮还原成双氢

    睾酮, 如发生遗传缺陷将导致不同程度男性外生殖器

    发育障碍, 其中2 型还原酶与生殖器发育关系密切。现

    已用5A还原酶抑制剂建立了尿道下裂动物模型, 并证

    实部分男性假两性畸形患者有 5A还原酶活性的降

    低[ 1- 3 ]。为探讨小儿常见的先天性尿道下裂与 2 型 5A

    还原酶(SRD5A 2)基因突变的关系, 我们采用聚合酶链

    反应2单链构象多态性(po lym erase chain react ion2sin2

    gle st rand confo rm at ion po lymo rph ism , PCR 2 SSCP )

    结合DNA 测序方法, 在23 例尿道下裂患儿中, 发现 3

    例为SRD5A 2 基因R227Q 突变纯合子或杂合子(另文

    发表) , 提示该突变为中国人尿道下裂SRD5A 2 基因的

    作者单位: 510089 广州, 中山医科大学医学遗传学教研室(光炜、曾瑞萍、杜伟书) , 第一附属医院小儿外科(周李) ; 3 通信联系人

    常见突变 ......