百会穴埋线疗法对血管性痴呆大鼠学习记忆及SOD、NO的影响.PDF
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埋线与膏药,埋线疗法文献资料,埋线2008
第1页 |
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针灸临床杂志 2 O O 8年第 2 4卷第 6 期
实 验 研 究
百会穴埋线疗法对血管性
痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响*
’ 王延武 , 陈华德2
( 1 . 浙江中医药大学附属广兴医院, 浙江 杭州 3 1 0 0 0 7 ; 2 . 浙江中医药大学, 浙江 杭州 3 1 0 0 5 3 )
摘 要: 目的: 观察百会穴埋线疗法对血管性痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响。方法: 采用夹闭再
通大鼠双侧颈总动脉的方法建立缺血再灌注损伤 V D模型。设立假手术对照组、 模型对照组、 电针组和
埋线组。通过 M o r r i s 水迷宫观察 V D大鼠的学习和记忆能力; 并检测 V D大鼠脑组织 s o D活性和 N O含
量。结果: 百会穴位埋线疗法能显著缩短 V D大鼠定位航行试验的潜伏期; 在空间探索试验中, 能提高
跨越原平台位置的次数; 埋线组较模型组脑内S O D活性和 N O含量均明显升高。结论: 埋线疗法能改善
V D大鼠的空间学习和记忆能力, 提高V D大鼠脑组织 N O的含量、 增强 S O D活力, 疗效与电针相近。
关键词: 埋线疗法; 百会穴; 血管性痴呆; 学习记忆
中图分类号: R 2 4 5 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 5— 0 7 7 9 ( 2 0 0 8 ) 0 6—0 0 4 7 —0 3
血管性痴呆 ( V a s c u l a r d e m e n t i a , V D) 是我 国最常见
的老年期痴呆类型…, 不仅影响病人的健康和生活质
量, 而且造成巨大的社会和家庭负担。学习记忆障碍
是血管性痴呆的首要表现, 改善学习记忆能力是防治
V D的关键。对 V D的治疗, 目前国内外尚无特效疗
法, 针灸对 V D有肯定的治疗作用[ 。穴位埋线疗法
与针灸疗法相比, 具有操作简单、 作用时间长、 疗效持
久的优点, 目前未见有穴位埋线疗法治疗血管性痴呆
的研究报道。本实验观察了百会穴埋线疗法对 V D大
鼠学习记忆的影响及 S O D、 N O含量的变化。现将结
果报告如下。
1 材料
1 . 1 实验动物 选用健康雄性 S p r a g u e —D a w l e y ( S D )
大鼠6 5只, 体重 1 8 0~2 0 0 g , 购自中国科学院上海实
验动物中心, 由浙江中医药大学实验动物中心饲养。
1 . 2 主要仪器设备 穴位埋线器: 北京任晓艳穴位埋
线医学研究中心; 药物羊肠线: 北京任晓艳穴位埋线医
学研究中心; 韩氏穴位神经刺激仪: 北京华卫产业开发
公司, I J - I 2 02 H; B T S 1 5 A半 自动生化分析仪: 上海精宏
实验设备有限公司; Mo r r i s 水迷宫实验系统: 北京现代
太极电子有限公司;
1 . 3 试剂 S O D检测试剂盒: 南京建成生物工程研究
所, 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 ; N O检测试剂盒: 南京建成生物
*基金项目: 浙江省中医药管理局资助课题, 编号: 2 0 0 6 0 2 1 2
作者简介: 王延武( 1 9 7 9 一) , 男, 医师, 医学硕士, 主要从事针灸调节脑功
能障碍的研究。
工程研究所 , 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 5 ; 考马斯亮蓝检测试剂
盒: 南京建成生物工程研究所, 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 。
2 方法
2 . 1 Mo r r i s 水迷宫游泳训练 把大鼠置于 M o r r i s 水迷
宫学习训练 3天, 训练过程具体如下: M o r r i s 水迷宫为
一
圆形不锈钢水池, 直径 1 2 0 c m, 高5 8 c m, 池壁池底黑
色, 水池内水深约 3 1 . 5 c m, 水温保持 2 3±2 ~ C, 池壁上
4个等距离点将水池均分为第 1至第4个象限, 任选 1
个象限( 第 1 象限) 并在其中央放置一直径 1 1 c m, 高
3 0 . 5 c m的圆形透明站台, 站台顶没于水面下 1 c m, 距
离池壁 3 0 c m, 站台在整个实验中位置保持不变, 水池
正上方悬挂摄像头, 通过视频采集系统采集水迷宫内
信息并输入计算机。把每只大鼠从第一象限的中点,头贴水池壁放入水池中, 让大鼠在迷宫里游 2 n l l ‘ n 。将
2 m i n内不能找到站台的大鼠引导至平台, 使大鼠在平
台站立 1 m i n ; 2 r ai n内能找到站台的大鼠, 也使之在平
台站立 1 m i n , 使大鼠熟悉周围的环境和站台的位置。
每只大鼠在第 1 象限做完以后, 再依次将大鼠从第 2 、第 3 、 第 4象限放入水池中, 方法同上。第 1天和第 2
天为训练期, 不记录成绩。第 3天开始记录大鼠游泳
成绩。记录大鼠从入水到寻找并爬上站台的时间( 定
位航行实验) , 2 r ai n内不能找到站台的大鼠, 其逃避潜
伏期以2 m i n 计。将6 5只大鼠全部完成定位航行实验
后, 撤去站台, 按顺序从第 3 象限池壁中点头贴壁放入
水中, 让大鼠在水池中游 2 m i n , 系统将自动记录大鼠
在水池的运动轨迹( 空间探索实验) 。这样每只大鼠共
记录5次实验成绩, 其中前 4次为与 1 、 2 、 3 、 4象限相
维普资讯 http://www.cqvip.com 对应的定位航行实验成绩, 第 5次为空间探索成绩。
实验过程中, M o r r i s 水迷宫分析参数、 水温、 室温、 周围
环境等基本保持不变, 以避免外界因素对实验的干扰。
2 . 2 造模方法 V D大鼠模型制备参考李氏[ 3 ] 的方法
并加以改进: 用 3 %异戊巴比妥钠( 0 . 1 5 m l / 1 0 0 g体
重) 腹腔注射麻醉大鼠, 把大鼠头部朝上固定于自制大
鼠固定仪上, 充分暴露颈部, 颈正中行约 1 c m长的纵
向切口, 分离双侧颈总动脉, 套以“ 4 ” 号医用丝线, 阻断
双侧颈总动脉血流 2 0 mi n后再灌注 1 0 m i n , 然后再阻
断2 0 m i n , 再灌注后缝合切口。第 1 次阻断颈总动脉
的同时在距大鼠尾端约 1 c m处剪尾放血, 放血量为大
鼠总血容量( 占体重的7 . 4 %) 的 1 0 %, 然后结扎止血。
假手术对照组大鼠只分离双侧颈总动脉, 不阻断血流
和剪尾放血, 其余同模型制备的操作。术后常规饲养
大鼠2 天, 造模后第 3天选择符合脑缺血征象以及无
肢体残疾和视力受损的大鼠作为合格的实验动物模
型。
2 . 3 实验分组 把造模成功的 V D大鼠模型随机分
为模型对照组、 电针治疗组和埋线治疗组, 加上假手术
对照组, 实验共分4组。每组有9只大鼠。实验处理:
①埋线治疗组: 对百会穴进行埋线治疗。埋线时需 2
人配合, 一人左手固定大鼠头颈部, 右手固定大鼠后
肢, 另一人穿刺埋线。埋线方法: 先将羊肠线置于消毒
弯盘中, 并剪成 0 . 6 c m长的小段。参照《 实验针灸
学》 ] 中大鼠穴位定位方法取“ 百会” 穴( 顶骨正中处) ......
实 验 研 究
百会穴埋线疗法对血管性
痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响*
’ 王延武 , 陈华德2
( 1 . 浙江中医药大学附属广兴医院, 浙江 杭州 3 1 0 0 0 7 ; 2 . 浙江中医药大学, 浙江 杭州 3 1 0 0 5 3 )
摘 要: 目的: 观察百会穴埋线疗法对血管性痴呆大鼠学习记忆及 S O D、 N O的影响。方法: 采用夹闭再
通大鼠双侧颈总动脉的方法建立缺血再灌注损伤 V D模型。设立假手术对照组、 模型对照组、 电针组和
埋线组。通过 M o r r i s 水迷宫观察 V D大鼠的学习和记忆能力; 并检测 V D大鼠脑组织 s o D活性和 N O含
量。结果: 百会穴位埋线疗法能显著缩短 V D大鼠定位航行试验的潜伏期; 在空间探索试验中, 能提高
跨越原平台位置的次数; 埋线组较模型组脑内S O D活性和 N O含量均明显升高。结论: 埋线疗法能改善
V D大鼠的空间学习和记忆能力, 提高V D大鼠脑组织 N O的含量、 增强 S O D活力, 疗效与电针相近。
关键词: 埋线疗法; 百会穴; 血管性痴呆; 学习记忆
中图分类号: R 2 4 5 文献标识码: A 文章编号: 1 0 0 5— 0 7 7 9 ( 2 0 0 8 ) 0 6—0 0 4 7 —0 3
血管性痴呆 ( V a s c u l a r d e m e n t i a , V D) 是我 国最常见
的老年期痴呆类型…, 不仅影响病人的健康和生活质
量, 而且造成巨大的社会和家庭负担。学习记忆障碍
是血管性痴呆的首要表现, 改善学习记忆能力是防治
V D的关键。对 V D的治疗, 目前国内外尚无特效疗
法, 针灸对 V D有肯定的治疗作用[ 。穴位埋线疗法
与针灸疗法相比, 具有操作简单、 作用时间长、 疗效持
久的优点, 目前未见有穴位埋线疗法治疗血管性痴呆
的研究报道。本实验观察了百会穴埋线疗法对 V D大
鼠学习记忆的影响及 S O D、 N O含量的变化。现将结
果报告如下。
1 材料
1 . 1 实验动物 选用健康雄性 S p r a g u e —D a w l e y ( S D )
大鼠6 5只, 体重 1 8 0~2 0 0 g , 购自中国科学院上海实
验动物中心, 由浙江中医药大学实验动物中心饲养。
1 . 2 主要仪器设备 穴位埋线器: 北京任晓艳穴位埋
线医学研究中心; 药物羊肠线: 北京任晓艳穴位埋线医
学研究中心; 韩氏穴位神经刺激仪: 北京华卫产业开发
公司, I J - I 2 02 H; B T S 1 5 A半 自动生化分析仪: 上海精宏
实验设备有限公司; Mo r r i s 水迷宫实验系统: 北京现代
太极电子有限公司;
1 . 3 试剂 S O D检测试剂盒: 南京建成生物工程研究
所, 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 ; N O检测试剂盒: 南京建成生物
*基金项目: 浙江省中医药管理局资助课题, 编号: 2 0 0 6 0 2 1 2
作者简介: 王延武( 1 9 7 9 一) , 男, 医师, 医学硕士, 主要从事针灸调节脑功
能障碍的研究。
工程研究所 , 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 5 ; 考马斯亮蓝检测试剂
盒: 南京建成生物工程研究所, 批号: 2 0 0 5 . 1 2 . 1 4 。
2 方法
2 . 1 Mo r r i s 水迷宫游泳训练 把大鼠置于 M o r r i s 水迷
宫学习训练 3天, 训练过程具体如下: M o r r i s 水迷宫为
一
圆形不锈钢水池, 直径 1 2 0 c m, 高5 8 c m, 池壁池底黑
色, 水池内水深约 3 1 . 5 c m, 水温保持 2 3±2 ~ C, 池壁上
4个等距离点将水池均分为第 1至第4个象限, 任选 1
个象限( 第 1 象限) 并在其中央放置一直径 1 1 c m, 高
3 0 . 5 c m的圆形透明站台, 站台顶没于水面下 1 c m, 距
离池壁 3 0 c m, 站台在整个实验中位置保持不变, 水池
正上方悬挂摄像头, 通过视频采集系统采集水迷宫内
信息并输入计算机。把每只大鼠从第一象限的中点,头贴水池壁放入水池中, 让大鼠在迷宫里游 2 n l l ‘ n 。将
2 m i n内不能找到站台的大鼠引导至平台, 使大鼠在平
台站立 1 m i n ; 2 r ai n内能找到站台的大鼠, 也使之在平
台站立 1 m i n , 使大鼠熟悉周围的环境和站台的位置。
每只大鼠在第 1 象限做完以后, 再依次将大鼠从第 2 、第 3 、 第 4象限放入水池中, 方法同上。第 1天和第 2
天为训练期, 不记录成绩。第 3天开始记录大鼠游泳
成绩。记录大鼠从入水到寻找并爬上站台的时间( 定
位航行实验) , 2 r ai n内不能找到站台的大鼠, 其逃避潜
伏期以2 m i n 计。将6 5只大鼠全部完成定位航行实验
后, 撤去站台, 按顺序从第 3 象限池壁中点头贴壁放入
水中, 让大鼠在水池中游 2 m i n , 系统将自动记录大鼠
在水池的运动轨迹( 空间探索实验) 。这样每只大鼠共
记录5次实验成绩, 其中前 4次为与 1 、 2 、 3 、 4象限相
维普资讯 http://www.cqvip.com 对应的定位航行实验成绩, 第 5次为空间探索成绩。
实验过程中, M o r r i s 水迷宫分析参数、 水温、 室温、 周围
环境等基本保持不变, 以避免外界因素对实验的干扰。
2 . 2 造模方法 V D大鼠模型制备参考李氏[ 3 ] 的方法
并加以改进: 用 3 %异戊巴比妥钠( 0 . 1 5 m l / 1 0 0 g体
重) 腹腔注射麻醉大鼠, 把大鼠头部朝上固定于自制大
鼠固定仪上, 充分暴露颈部, 颈正中行约 1 c m长的纵
向切口, 分离双侧颈总动脉, 套以“ 4 ” 号医用丝线, 阻断
双侧颈总动脉血流 2 0 mi n后再灌注 1 0 m i n , 然后再阻
断2 0 m i n , 再灌注后缝合切口。第 1 次阻断颈总动脉
的同时在距大鼠尾端约 1 c m处剪尾放血, 放血量为大
鼠总血容量( 占体重的7 . 4 %) 的 1 0 %, 然后结扎止血。
假手术对照组大鼠只分离双侧颈总动脉, 不阻断血流
和剪尾放血, 其余同模型制备的操作。术后常规饲养
大鼠2 天, 造模后第 3天选择符合脑缺血征象以及无
肢体残疾和视力受损的大鼠作为合格的实验动物模
型。
2 . 3 实验分组 把造模成功的 V D大鼠模型随机分
为模型对照组、 电针治疗组和埋线治疗组, 加上假手术
对照组, 实验共分4组。每组有9只大鼠。实验处理:
①埋线治疗组: 对百会穴进行埋线治疗。埋线时需 2
人配合, 一人左手固定大鼠头颈部, 右手固定大鼠后
肢, 另一人穿刺埋线。埋线方法: 先将羊肠线置于消毒
弯盘中, 并剪成 0 . 6 c m长的小段。参照《 实验针灸
学》 ] 中大鼠穴位定位方法取“ 百会” 穴( 顶骨正中处) ......
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