双波长一元线性回归分光光度法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量
作者:朱美红 詹少卿 陈桂平
单位:朱美红 詹少卿 陈桂平(南通 226001 江苏南通市第一人民医院)
关键词:盐酸乙基吗啡;双波长一元线性回归分光光度法;羟苯乙酯
980320摘要 采用双波长一元线性回归分光光度法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量,消除了附加剂羟苯乙酯对主药测定的干扰,方法简便,回收率为100.0%,RSD=0.53%。
盐酸乙基吗啡滴眼液系常用于炎症引起的晶状体浑浊的医院制剂,其含量测定方法原料采用非水滴定法[1],滴眼液采用双相酸碱中和法[2],原秀萍等采用双波长法测定其滴眼液的含量[3]。本文依据一组含有不同比例待测和干扰组分标准混合液的吸收值,采用一元线性回归的方法[4],在选择最佳测定波长对的同时建立标准曲线方程[5],使其更符合实际样品测定时的情况,克服了通常系数倍率法中实际样品测定时的由纯组分建立的浓度计算模型的偏离而造成的误差,提高了结果的精度和可靠性,其原理简单,测定点少,计算量小并能有效地克服羟苯乙酯的影响,采用本法测定能得到较满意的效果。
, http://www.100md.com
1 基本原理
对于多组分体系中的某一组分i,根据双波长系数倍率法的定义有
A1-KA2=(εi1-Kεi2)LCi=kLCi (1)
其中A1、A2分别为混合溶液在测定波长对λ1和λ2处的吸收值,εi1,εi2为组分i在λ1和λ2处的吸收系数,Ci为组分i的浓度,L为光路长,K为常数,现以A2(A2≠0)除(1)式两边并将所测数据带入由笔者用QBasic编制的程序,进行一元线性回归得方程
, 百拇医药
y=kx+K
其中y=A1/A2,x=LCi/A2
通过相关系数r来考察线性关系的优劣。r最大者所对应的直线方程即为浓度计算模型,相应的波长对为最佳测定波长对。
2 仪器与试药品
岛津UV-260分光光度计,Intel-486(QBasic编程)计算机;盐酸乙基吗啡对照品(南通市药品检验所);羟苯乙酯(上海星火制药厂,批号931126-2);盐酸乙基吗啡滴眼液(本院制剂室配制)。
3实验与结果
3.1 吸收曲线的绘制
, http://www.100md.com 按处方比例,精密称取已恒重的盐酸乙基吗啡和羟苯乙酯适量,分别配制成1和0.03mg/ml的贮备液。
取上述二贮备液各10ml,分别配成含盐酸乙基吗啡100μg/ml和羟苯乙酯3μg/ml的水溶液,从220~400nm在紫外分光光度计上扫描(以蒸馏水为空白),得各组分的吸收曲线,由于双波长法波长对的选择应尽量避免在吸收曲线的陡坡和肩峰处,故选择250~300nm为测定范围。
3.2 最佳测定波长对的选择及浓度计算模型的建立
按正交实验设计原则,分别吸取二贮备液8~12ml,共配制25份浓度比例不同的标准混合液,从250~300nm间隔1nm,测定在各波长处的吸收值,按基本原理项下处理,求得最佳测定波长对及浓度计算模型。
波长对:260,272nm
K=1.9139,k=-0.004234,r=0.9978
, 百拇医药
计算模型:y=-0.004234x+1.9139
3.3 模拟回收率测定
按处方比例,分别配制3份浓度比例不同的混合液,测定在选定波长处的吸收值,分别代入浓度计算模型,求得回收率为100.0%±0.53%。
3.4 重现性试验
为考察方法的重现性,分别对批号为970316的样品进行了天内和天间分析精度的测定。在同一天内按3.3项下对上述样品测定5次,所得RSD为0.62%;分在5d内对上述样品按3.3项下测定,所得RSD为0.80%。
3.5 样品测定与方法比较
精密吸取滴眼液1ml,用蒸馏水稀释成100ml,在选定波长对处测定其吸收值,分别代入浓度计算模型,求得其含量,并算出百分标示量,同时用双相酸碱中和法测定其含量,相应的算出百分标示量,两种方法所得结果比较,见附表。
, http://www.100md.com
附表 样品测定结果比较 批号
标示量(%)
平均相对偏差(%)
本法
双相酸碱中和法
本法
双相酸碱中和法
960624
98.73
97.45
0.31
0.32
, http://www.100md.com 960906
99.78
101.17
0.52
0.66
970316
102.03
101.09
0.49
1.06
4 讨 论
4.1 双相酸碱中和法操作较繁,且终点判断可引起误差,导数法既要消除干扰组分又要使待测组分有较大吸收的点不易找,双波长等吸收点法选择的等吸收点是211nm,而此处是吸收曲线的陡坡处,为使测定结果准确应避免此点才是。
, 百拇医药
4.2 本法既保留了系数倍率法测定点少,计算量小的特点,又可通过在选择最佳测定波长对的同时建立浓度计算模型,使计算量和测定工作得以进一步降低,对混合物中欲测组分进行测定时,有其独到的优点,适合医院制剂快检的要求。
4.3 所用一元线性回归方法程序,编写简便,易于实现。
参考文献
1 中国药典.二部.1995∶554.
2 中国医院制剂规范.西药制剂.第2版∶176.
3 原秀萍,杨晓胜.双波长法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量.中国药学杂志,1991,26(4)∶225.
4 相秉仁,张尊建,戴敬朴,等.双波长一元线性回归分光光度法测定复方氨基比林注射液中三组分含量.药学学报,1992,27(2)∶130.
5 相秉仁.计算药学.北京:中国医药科技出版社,1990.
收稿日期:1997-06-09, 百拇医药
单位:朱美红 詹少卿 陈桂平(南通 226001 江苏南通市第一人民医院)
关键词:盐酸乙基吗啡;双波长一元线性回归分光光度法;羟苯乙酯
980320摘要 采用双波长一元线性回归分光光度法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量,消除了附加剂羟苯乙酯对主药测定的干扰,方法简便,回收率为100.0%,RSD=0.53%。
盐酸乙基吗啡滴眼液系常用于炎症引起的晶状体浑浊的医院制剂,其含量测定方法原料采用非水滴定法[1],滴眼液采用双相酸碱中和法[2],原秀萍等采用双波长法测定其滴眼液的含量[3]。本文依据一组含有不同比例待测和干扰组分标准混合液的吸收值,采用一元线性回归的方法[4],在选择最佳测定波长对的同时建立标准曲线方程[5],使其更符合实际样品测定时的情况,克服了通常系数倍率法中实际样品测定时的由纯组分建立的浓度计算模型的偏离而造成的误差,提高了结果的精度和可靠性,其原理简单,测定点少,计算量小并能有效地克服羟苯乙酯的影响,采用本法测定能得到较满意的效果。
, http://www.100md.com
1 基本原理
对于多组分体系中的某一组分i,根据双波长系数倍率法的定义有
A1-KA2=(εi1-Kεi2)LCi=kLCi (1)
其中A1、A2分别为混合溶液在测定波长对λ1和λ2处的吸收值,εi1,εi2为组分i在λ1和λ2处的吸收系数,Ci为组分i的浓度,L为光路长,K为常数,现以A2(A2≠0)除(1)式两边并将所测数据带入由笔者用QBasic编制的程序,进行一元线性回归得方程
, 百拇医药
y=kx+K
其中y=A1/A2,x=LCi/A2
通过相关系数r来考察线性关系的优劣。r最大者所对应的直线方程即为浓度计算模型,相应的波长对为最佳测定波长对。
2 仪器与试药品
岛津UV-260分光光度计,Intel-486(QBasic编程)计算机;盐酸乙基吗啡对照品(南通市药品检验所);羟苯乙酯(上海星火制药厂,批号931126-2);盐酸乙基吗啡滴眼液(本院制剂室配制)。
3实验与结果
3.1 吸收曲线的绘制
, http://www.100md.com 按处方比例,精密称取已恒重的盐酸乙基吗啡和羟苯乙酯适量,分别配制成1和0.03mg/ml的贮备液。
取上述二贮备液各10ml,分别配成含盐酸乙基吗啡100μg/ml和羟苯乙酯3μg/ml的水溶液,从220~400nm在紫外分光光度计上扫描(以蒸馏水为空白),得各组分的吸收曲线,由于双波长法波长对的选择应尽量避免在吸收曲线的陡坡和肩峰处,故选择250~300nm为测定范围。
3.2 最佳测定波长对的选择及浓度计算模型的建立
按正交实验设计原则,分别吸取二贮备液8~12ml,共配制25份浓度比例不同的标准混合液,从250~300nm间隔1nm,测定在各波长处的吸收值,按基本原理项下处理,求得最佳测定波长对及浓度计算模型。
波长对:260,272nm
K=1.9139,k=-0.004234,r=0.9978
, 百拇医药
计算模型:y=-0.004234x+1.9139
3.3 模拟回收率测定
按处方比例,分别配制3份浓度比例不同的混合液,测定在选定波长处的吸收值,分别代入浓度计算模型,求得回收率为100.0%±0.53%。
3.4 重现性试验
为考察方法的重现性,分别对批号为970316的样品进行了天内和天间分析精度的测定。在同一天内按3.3项下对上述样品测定5次,所得RSD为0.62%;分在5d内对上述样品按3.3项下测定,所得RSD为0.80%。
3.5 样品测定与方法比较
精密吸取滴眼液1ml,用蒸馏水稀释成100ml,在选定波长对处测定其吸收值,分别代入浓度计算模型,求得其含量,并算出百分标示量,同时用双相酸碱中和法测定其含量,相应的算出百分标示量,两种方法所得结果比较,见附表。
, http://www.100md.com
附表 样品测定结果比较 批号
标示量(%)
平均相对偏差(%)
本法
双相酸碱中和法
本法
双相酸碱中和法
960624
98.73
97.45
0.31
0.32
, http://www.100md.com 960906
99.78
101.17
0.52
0.66
970316
102.03
101.09
0.49
1.06
4 讨 论
4.1 双相酸碱中和法操作较繁,且终点判断可引起误差,导数法既要消除干扰组分又要使待测组分有较大吸收的点不易找,双波长等吸收点法选择的等吸收点是211nm,而此处是吸收曲线的陡坡处,为使测定结果准确应避免此点才是。
, 百拇医药
4.2 本法既保留了系数倍率法测定点少,计算量小的特点,又可通过在选择最佳测定波长对的同时建立浓度计算模型,使计算量和测定工作得以进一步降低,对混合物中欲测组分进行测定时,有其独到的优点,适合医院制剂快检的要求。
4.3 所用一元线性回归方法程序,编写简便,易于实现。
参考文献
1 中国药典.二部.1995∶554.
2 中国医院制剂规范.西药制剂.第2版∶176.
3 原秀萍,杨晓胜.双波长法测定盐酸乙基吗啡滴眼液的含量.中国药学杂志,1991,26(4)∶225.
4 相秉仁,张尊建,戴敬朴,等.双波长一元线性回归分光光度法测定复方氨基比林注射液中三组分含量.药学学报,1992,27(2)∶130.
5 相秉仁.计算药学.北京:中国医药科技出版社,1990.
收稿日期:1997-06-09, 百拇医药