尼索地平β-环糊精包合物的制备
作者：徐建军 鞠福祥 孙德清 王志刚
单位：徐建军(青岛市第三人民医院 青岛266041)；鞠福祥(青岛市北区医院)；孙德清(山东医科大学第二附属医院)；王志刚(山东医药工业研究所)
关键词：尼索地平；β-CD，包合物；溶出度；紫外分光光度法
中国医院药学杂志990334 摘要 目的：研究尼索地平β-环糊精(β-CD)1∶1包合物的制备。方法：通过研究了β-CD对尼索地平的包合作用及包合后的溶解性，并比较了尼索地平β-CD包合物与原料药及PVP固体分散物片的溶出度。结果：尼索地平在包合后，其水中溶解度由包合前的7.10 μg.ml-1提高到15.75 μg.ml-1。结论：包合物的溶出度优于原料药，但不及固体分散物片。
β-CD由7个葡萄糖分子通过糖苷键结合而呈环状中空圆筒型，其空隙的开口处或外部呈亲水性，而内部呈疏水性，故常用于包合疏水性药物，形成β-CD包合物，即“分子微囊”。β-CD包合物在药剂学上主要用于增加药物的溶解度，提高药物稳定性，液体或气体药物粉末化，遮盖药物不良臭味，调节释药速度及提高生物利用度等。
, 百拇医药
尼索地平因其水中溶解度小，其制剂的生物利用度较差。尼索地平β-CD包合物的制备国内外有报道[1]，本文探讨了该包合物的制备、水中溶解度及溶出度等。
1 仪器与试药
1.1 仪器 751G紫外分光光度计(上海分析仪器厂)，UV-2201紫外分光光度计(日本岛津)，IRS-4智能溶出试验仪(天津大学无线电厂)。
1.2 药品 尼索地平原料及其精制品(山东省医工所提供)；β-CD(哈尔滨方正生物化工厂提供)。
1.3 试剂 无水乙醇(AR)，丙酮(AR)，盐酸(AR)。
2 实验方法与结果
2.1 尼索地平β-CD包合物的制备 采用共沉淀法，按尼索地平与β-CD 1∶1包合，考察其它因素对包合物制备的影响。见表1。
, 百拇医药
表 1 尼索地平β-CD包合物制备考察 包合物
水
丙酮
搅拌时间
温度
Ⅰ
40 ml
3 ml
24 h
常温
Ⅱ
40 ml
21 ml
, 百拇医药
24 h
常温
Ⅲ
10 ml
2 ml
6 h
80 ℃
Ⅳ
10 ml
9 ml
6 h
80 ℃
所用尼索地平均为0.2 g，β-CD均为1.6 g。制备工艺：将尼索地平溶于丙酮中得(1)，β-CD溶于一定量蒸馏水中得(2)，不断搅拌下将(1)滴加到(2)中，继续搅拌一定时间(必要时采用回流装置)，然后蒸发溶剂至剩约10 ml，冷却后置冰箱中12 h，抽滤，结晶，用少量丙酮洗涤3次，60 ℃干燥即得。
, http://www.100md.com
2.2 标准曲线的建立 精密称取尼索地平精制品0.1 g于100 ml容量瓶中，以无水乙醇定容，混匀后精密吸取10 ml于100 ml容量瓶中，加无水乙醇20 ml，以蒸馏水定容。摇匀后，精密吸取1，2，4，5，6，8 ml于50 ml容量瓶中，以30%乙醇定容，浓度C分别为2.004，4.008，8.016，10.020，12.024，16.032 μg.ml-1。采用紫外分光光度法，以30%乙醇为空白，于237 nm处测A分别为0.152，0.247，0.456，0.556，0.664，0.856 μg.ml-1(如表2)，求得的回归方程为：
C=19.752 A-0.965 0 r=0.999 9
2.3 回收率测定 精密配制5种不同浓度的尼索地平溶液，依法测A，代入标准曲线方程求C，如下表2。表 2 回收率的测定
, 百拇医药
A
0.325
0.428
0.507
0.661
0.772
所测C/μg.ml-1
5.45
7.49
9.04
12.10
14.29
, 百拇医药
所配C/μg.ml-1
5.52
7.43
9.24
12.14
14.05
回收率/%
98.65
100.82
97.80
99.72
101.75
, 百拇医药
得平均回收率为99.75%，RSD=1.60%。
2.4 含量测定 精密称取包合物20 mg于100 ml中容量瓶中，以30%乙醇定容，摇匀后精密吸取2 ml于10 ml容量瓶中，以30%乙醇定容，依法测A，代入标准曲线求C，计算含量。表 3 含量测定
包合物
取样量/mg
A值
含量/%
Ⅰ
20.8
0.541
23.38
, 百拇医药
Ⅱ
20.4
0.503
22.0
Ⅲ
20.0
0.809
37.58
Ⅳ
20.2
0.851
39.22
2.5 溶出度测定 精密称取尼索地平原料5 mg及相当含量的包合物，另取其PVP固体分散物片一片(山东医工所制)，以盐酸(0.1 M)-乙醇9∶1为介质，采用桨法，恒温37 ℃，转速100 r.min-1自药物与介质接触时计时，分别在5，10，30，60，90，120 min吸取介质5 ml(同时补加37 ℃介质5 ml)经0.8 μm微孔滤膜过滤，取滤液依法测A，求不同时间累积溶出百分率。见表4。表 4 不同时间溶出液的A值 时间
, 百拇医药
min
原料药
50 mg
包 合 物
固体分散
物1片
Ⅰ
21.4 mg
Ⅱ
22.9 mg
Ⅲ
13.3 mg
Ⅳ
, 百拇医药
12.7 mg
5
0.035
0.097
0.067
0.045
0.036
0.288
10
0.048
0.120
0.084
0.069
, http://www.100md.com
0.045
0.332
30
0.068
0.165
0.087
0.085
0.074
0.348
60
0.089
0.212
0.118
, http://www.100md.com
0.110
0.091
0.364
90
0.106
0.255
0.122
0.116
0.108
0.375
120
0.112
0.294
, 百拇医药
0.128
0.125
0.116
0.354
另精密称取尼索地平精制品10 mg于50 ml容量瓶中，以无水乙醇定容，摇匀后精密吸取5 ml于50 ml容量瓶中，以0.1 M盐酸定容，然后分别吸取0.5，1，2，4 ml于10 ml容量瓶中，以溶出介质定容，于237 nm处测A作为对照，A值分别为0.068，0.107，0.223，0.441，求得上述溶出液的浓度分别为1.08，2.16，4.32，8.64 μg.ml-1。
由表4可看出包合物Ⅰ溶出情况最好，Ⅱ、Ⅲ同原料药相比，溶出速率、溶出度有一定程度的改善，但不明显[2]。Ⅳ则几乎与原料药相同，说明几乎未形成包合物，故我们只作包合物Ⅰ与原料药及固体分散物的溶出速率曲线，如图1。
, 百拇医药
图 1 溶出速率曲线
●—原料 ○—包合物Ⅰ ▲—固体分散物
2.6 包合物的证明
2.6.1 包合物紫外吸收 将尼索地平原料及包合物用30%乙醇溶解，分别进行紫外扫描如图2。二者紫外吸收图谱相同，说明包合过程中未发生化学变化。
图 2 包合物紫外线吸收扫描
1 原料 2 包合物
2.6.2 包合物的水中溶解度 以蒸馏水600 ml为介质，测原料药(20 mg)及相当量的物理混合物，包合物Ⅰ的溶出度，温度25 ℃，采用桨法，转速100 r.min-1。分别在0.5，1，3，5，8 h取溶出液10 ml(同时补加同温度的介质10 ml)，经0.8 μm微孔滤膜过滤，取滤液7 ml于10 ml容量瓶中，以无水乙醇定容。然后以30%乙醇为空白，于237 nm处测A，换算出不同时刻溶出介质中的尼索地平浓度，以求其25 ℃在水中的溶解度。
, 百拇医药
由图3可看出，包合物的溶出速度最快，而物理混合物和原料药的溶出速度较慢。同时可推出尼索地平原料的水中溶解度为7.10 μg.ml-1，物理混合物基本与之相同，而包合物的水中溶解度大大提高，为15.75 μg.ml-1。
表 5 不同时间溶出液的A值 时间
h
原料药
(1)
物理混合物
(2)
包合物Ⅰ
(3)
, 百拇医药
0.5
0.095
0.107
0.320
1
0.137
0.156
0.387
3
0.295
0.300
0.602
5
, 百拇医药
0.300
0.305
0.307
8
0.302
0.306
0.607
图 3 包合物的溶出速度
3 讨论
3.1 由于尼索地平遇光不稳定，易分解，故本实验皆在避光条件下进行。
3.2 据有关文献[3]，二氢吡啶类钙拮抗剂，如硝苯地平、尼莫地平等的β-CD包合物多为1∶1包合，本实验尼索地平包合物的制备采用共沉淀法，也按1∶1包合而成。
, http://www.100md.com
3.3 本实验采用紫外分光光度法测尼索地平的含量溶出度，其浓度在1～20 μg.ml-1范围内线性关系良好(r=0.999 9)。
3.4 尼索地平制成β-CD包合物后，溶解度显著提高，可增加一倍多。
3.5 由含量测定、溶出度测定可得出，尼索地平β-CD包合物的制备时，有机溶剂用量不宜太多，即水与有机溶剂的比例适当提高。因有机溶剂用量多，可使溶剂疏水性增加，从而使尼索地平只溶解于溶剂中而无法进入β-CD所提供的疏水腔道以形成包合物；同时，温度也不宜过高，常温下即可。另外，在溶出度的测定中，因固体分散物片的辅料在237 nm处有一定吸收，故其测定结果略微偏高，但我们仍可看出，尼索地平β-CD包合物与原料药相比，其溶出速率大大加快，溶出度显著提高，但其效果尚不及固体分散物。
参考文献
1 M.吉伯尔迪，D.佩里索.药物动力学.天津科技出版社译，1992：253
2 奚念朱，顾学裘.药剂学(第二版).北京：人民卫生出版社，1992：472
3 涂家生，王 平.中国医药工业杂志，1996，27(12)：539
(1997年12月22日收稿), http://www.100md.com
单位：徐建军(青岛市第三人民医院 青岛266041)；鞠福祥(青岛市北区医院)；孙德清(山东医科大学第二附属医院)；王志刚(山东医药工业研究所)
关键词：尼索地平；β-CD，包合物；溶出度；紫外分光光度法
中国医院药学杂志990334 摘要 目的：研究尼索地平β-环糊精(β-CD)1∶1包合物的制备。方法：通过研究了β-CD对尼索地平的包合作用及包合后的溶解性，并比较了尼索地平β-CD包合物与原料药及PVP固体分散物片的溶出度。结果：尼索地平在包合后，其水中溶解度由包合前的7.10 μg.ml-1提高到15.75 μg.ml-1。结论：包合物的溶出度优于原料药，但不及固体分散物片。
β-CD由7个葡萄糖分子通过糖苷键结合而呈环状中空圆筒型，其空隙的开口处或外部呈亲水性，而内部呈疏水性，故常用于包合疏水性药物，形成β-CD包合物，即“分子微囊”。β-CD包合物在药剂学上主要用于增加药物的溶解度，提高药物稳定性，液体或气体药物粉末化，遮盖药物不良臭味，调节释药速度及提高生物利用度等。
, 百拇医药
尼索地平因其水中溶解度小，其制剂的生物利用度较差。尼索地平β-CD包合物的制备国内外有报道[1]，本文探讨了该包合物的制备、水中溶解度及溶出度等。
1 仪器与试药
1.1 仪器 751G紫外分光光度计(上海分析仪器厂)，UV-2201紫外分光光度计(日本岛津)，IRS-4智能溶出试验仪(天津大学无线电厂)。
1.2 药品 尼索地平原料及其精制品(山东省医工所提供)；β-CD(哈尔滨方正生物化工厂提供)。
1.3 试剂 无水乙醇(AR)，丙酮(AR)，盐酸(AR)。
2 实验方法与结果
2.1 尼索地平β-CD包合物的制备 采用共沉淀法，按尼索地平与β-CD 1∶1包合，考察其它因素对包合物制备的影响。见表1。
, 百拇医药
表 1 尼索地平β-CD包合物制备考察 包合物
水
丙酮
搅拌时间
温度
Ⅰ
40 ml
3 ml
24 h
常温
Ⅱ
40 ml
21 ml
, 百拇医药
24 h
常温
Ⅲ
10 ml
2 ml
6 h
80 ℃
Ⅳ
10 ml
9 ml
6 h
80 ℃
所用尼索地平均为0.2 g，β-CD均为1.6 g。制备工艺：将尼索地平溶于丙酮中得(1)，β-CD溶于一定量蒸馏水中得(2)，不断搅拌下将(1)滴加到(2)中，继续搅拌一定时间(必要时采用回流装置)，然后蒸发溶剂至剩约10 ml，冷却后置冰箱中12 h，抽滤，结晶，用少量丙酮洗涤3次，60 ℃干燥即得。
, http://www.100md.com
2.2 标准曲线的建立 精密称取尼索地平精制品0.1 g于100 ml容量瓶中，以无水乙醇定容，混匀后精密吸取10 ml于100 ml容量瓶中，加无水乙醇20 ml，以蒸馏水定容。摇匀后，精密吸取1，2，4，5，6，8 ml于50 ml容量瓶中，以30%乙醇定容，浓度C分别为2.004，4.008，8.016，10.020，12.024，16.032 μg.ml-1。采用紫外分光光度法，以30%乙醇为空白，于237 nm处测A分别为0.152，0.247，0.456，0.556，0.664，0.856 μg.ml-1(如表2)，求得的回归方程为：
C=19.752 A-0.965 0 r=0.999 9
2.3 回收率测定 精密配制5种不同浓度的尼索地平溶液，依法测A，代入标准曲线方程求C，如下表2。表 2 回收率的测定
, 百拇医药
A
0.325
0.428
0.507
0.661
0.772
所测C/μg.ml-1
5.45
7.49
9.04
12.10
14.29
, 百拇医药
所配C/μg.ml-1
5.52
7.43
9.24
12.14
14.05
回收率/%
98.65
100.82
97.80
99.72
101.75
, 百拇医药
得平均回收率为99.75%，RSD=1.60%。
2.4 含量测定 精密称取包合物20 mg于100 ml中容量瓶中，以30%乙醇定容，摇匀后精密吸取2 ml于10 ml容量瓶中，以30%乙醇定容，依法测A，代入标准曲线求C，计算含量。表 3 含量测定
包合物
取样量/mg
A值
含量/%
Ⅰ
20.8
0.541
23.38
, 百拇医药
Ⅱ
20.4
0.503
22.0
Ⅲ
20.0
0.809
37.58
Ⅳ
20.2
0.851
39.22
2.5 溶出度测定 精密称取尼索地平原料5 mg及相当含量的包合物，另取其PVP固体分散物片一片(山东医工所制)，以盐酸(0.1 M)-乙醇9∶1为介质，采用桨法，恒温37 ℃，转速100 r.min-1自药物与介质接触时计时，分别在5，10，30，60，90，120 min吸取介质5 ml(同时补加37 ℃介质5 ml)经0.8 μm微孔滤膜过滤，取滤液依法测A，求不同时间累积溶出百分率。见表4。表 4 不同时间溶出液的A值 时间
, 百拇医药
min
原料药
50 mg
包 合 物
固体分散
物1片
Ⅰ
21.4 mg
Ⅱ
22.9 mg
Ⅲ
13.3 mg
Ⅳ
, 百拇医药
12.7 mg
5
0.035
0.097
0.067
0.045
0.036
0.288
10
0.048
0.120
0.084
0.069
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0.045
0.332
30
0.068
0.165
0.087
0.085
0.074
0.348
60
0.089
0.212
0.118
, http://www.100md.com
0.110
0.091
0.364
90
0.106
0.255
0.122
0.116
0.108
0.375
120
0.112
0.294
, 百拇医药
0.128
0.125
0.116
0.354
另精密称取尼索地平精制品10 mg于50 ml容量瓶中，以无水乙醇定容，摇匀后精密吸取5 ml于50 ml容量瓶中，以0.1 M盐酸定容，然后分别吸取0.5，1，2，4 ml于10 ml容量瓶中，以溶出介质定容，于237 nm处测A作为对照，A值分别为0.068，0.107，0.223，0.441，求得上述溶出液的浓度分别为1.08，2.16，4.32，8.64 μg.ml-1。
由表4可看出包合物Ⅰ溶出情况最好，Ⅱ、Ⅲ同原料药相比，溶出速率、溶出度有一定程度的改善，但不明显[2]。Ⅳ则几乎与原料药相同，说明几乎未形成包合物，故我们只作包合物Ⅰ与原料药及固体分散物的溶出速率曲线，如图1。
, 百拇医药
图 1 溶出速率曲线
●—原料 ○—包合物Ⅰ ▲—固体分散物
2.6 包合物的证明
2.6.1 包合物紫外吸收 将尼索地平原料及包合物用30%乙醇溶解，分别进行紫外扫描如图2。二者紫外吸收图谱相同，说明包合过程中未发生化学变化。
图 2 包合物紫外线吸收扫描
1 原料 2 包合物
2.6.2 包合物的水中溶解度 以蒸馏水600 ml为介质，测原料药(20 mg)及相当量的物理混合物，包合物Ⅰ的溶出度，温度25 ℃，采用桨法，转速100 r.min-1。分别在0.5，1，3，5，8 h取溶出液10 ml(同时补加同温度的介质10 ml)，经0.8 μm微孔滤膜过滤，取滤液7 ml于10 ml容量瓶中，以无水乙醇定容。然后以30%乙醇为空白，于237 nm处测A，换算出不同时刻溶出介质中的尼索地平浓度，以求其25 ℃在水中的溶解度。
, 百拇医药
由图3可看出，包合物的溶出速度最快，而物理混合物和原料药的溶出速度较慢。同时可推出尼索地平原料的水中溶解度为7.10 μg.ml-1，物理混合物基本与之相同，而包合物的水中溶解度大大提高，为15.75 μg.ml-1。
表 5 不同时间溶出液的A值 时间
h
原料药
(1)
物理混合物
(2)
包合物Ⅰ
(3)
, 百拇医药
0.5
0.095
0.107
0.320
1
0.137
0.156
0.387
3
0.295
0.300
0.602
5
, 百拇医药
0.300
0.305
0.307
8
0.302
0.306
0.607
图 3 包合物的溶出速度
3 讨论
3.1 由于尼索地平遇光不稳定，易分解，故本实验皆在避光条件下进行。
3.2 据有关文献[3]，二氢吡啶类钙拮抗剂，如硝苯地平、尼莫地平等的β-CD包合物多为1∶1包合，本实验尼索地平包合物的制备采用共沉淀法，也按1∶1包合而成。
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3.3 本实验采用紫外分光光度法测尼索地平的含量溶出度，其浓度在1～20 μg.ml-1范围内线性关系良好(r=0.999 9)。
3.4 尼索地平制成β-CD包合物后，溶解度显著提高，可增加一倍多。
3.5 由含量测定、溶出度测定可得出，尼索地平β-CD包合物的制备时，有机溶剂用量不宜太多，即水与有机溶剂的比例适当提高。因有机溶剂用量多，可使溶剂疏水性增加，从而使尼索地平只溶解于溶剂中而无法进入β-CD所提供的疏水腔道以形成包合物；同时，温度也不宜过高，常温下即可。另外，在溶出度的测定中，因固体分散物片的辅料在237 nm处有一定吸收，故其测定结果略微偏高，但我们仍可看出，尼索地平β-CD包合物与原料药相比，其溶出速率大大加快，溶出度显著提高，但其效果尚不及固体分散物。
参考文献
1 M.吉伯尔迪，D.佩里索.药物动力学.天津科技出版社译，1992：253
2 奚念朱，顾学裘.药剂学(第二版).北京：人民卫生出版社，1992：472
3 涂家生，王 平.中国医药工业杂志，1996，27(12)：539
(1997年12月22日收稿), http://www.100md.com