痔痛消中苦参碱的含量测定
作者：刘文 冉云
单位：刘文(贵阳中医学院 贵阳550002)；冉云(贵州省公安医院)
关键词：痔痛消；苦参碱；薄层扫描法
中国医院药学杂志990316 摘要 目的:用薄层扫描法对痔痛消中苦参碱进行了含量测定。方法:以氯仿-甲醇-氨水(5∶0.6∶0.2)为展开剂，在CS-920薄层扫描仪上以反射式锯齿扫描方式进行测定，λs=512 nm。结果:样品含量在5～25 μg范围内呈良好线性关系，r=0.996 5(n=5)，平均回收率99.90%，RSD=0.95%。结论:方法简便、精确、快速、重现性好，可作为痔痛消的质量控制标准。
Quantitative determination of matrine in Zhitongxiao by TCL-scanning
, http://www.100md.com
Liu Wen,Ran Yun (Deparment of Pharmaceutic,Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550002)
ABSTRACT OBJECTIVE:A method of the quantiative determination of matrine in “Zhi tongxiao” was develop by mease of TLC-scanning.METHODS:The mobil phase was clorform∶methyl alcohol∶ammonia water(5∶0.2∶0.2).The scanning method were dual wavelegth and zigzag with cs-920 scanner.The detection wavelength was 512 nm.RESULTS:It showed a good linearity between 5～25 μg with the correlation cofficient 0.996 5.The average recovery was 99.90%,RSD=0.95%.CONCLUSIONS:The method is easy,rapid,accurate and reproducible,it can be a quality contral standard of zhitongxiao.
, 百拇医药
KEY WORDS zhitongxiao,matrine,TCL-scanning
痔痛消为我省苗族验方，收载于《贵州省药品标准》(1994年版修订本，贵州省卫生厅编)，是用于治疗各类痔疮、外阴瘙痒的外用洗剂，由苦参、大黄、秦艽、金银花、枳壳等多种药物组成，成分复杂。为控制产品质量，今采用薄层扫描法测定苦参碱的含量。
1 仪器和试药
日本岛津CS-920型薄层扫描仪(美国科学技术公司)；10 μl定量毛细管；硅胶G(薄层层析用，青岛海洋化工厂)；苦参碱对照品(由中国药品生物制品检定所提供批号805-9001)；痔痛消(贵阳中药厂生产批号见表2)；化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层条件
, 百拇医药
2.1.1 吸附剂与展开剂 硅胶G加适量0.3%的CMC-Na，搅拌均匀后，涂布于10 cm×20 cm的玻璃板上，厚度0.25 mm，阴干，在105 ℃的烘箱内活化30 min后，置干燥器中备用。展开剂：氯仿-甲醇-氨水(5∶0.6∶0.2)，改良碘化铋钾喷雾显色。
2.1.2 薄层扫描条件 采用反射式锯齿扫描，扫描速度10 mm.min-1，线性化参数SX=3，AZS=ON，光束狭缝1.2 mm×1.2 mm。
2.1.3 测定波长的选择 将点样后的薄层板置于CS-920薄层扫描仪上，在390～600 nm波长范围内进行光谱扫描，结果苦参碱在512 nm处有最大吸收。
2.2 样品测定前的准备
2.2.1 苦参碱对照品液的制备 精密称取苦参碱对照品5.0 mg，加氯仿适量转移至10 ml量瓶中并稀释至刻度，备用。
, 百拇医药
2.2.2 痔痛消样品液的制备 精密吸取痔痛消5 ml，置于分液漏斗中，用氨水调pH=11，然后用60 ml氯仿分三次萃取，每次20 ml，合并萃取液。水浴挥去大部氯仿后，转移到10 ml的量瓶中，加氯仿稀释至刻度，即得痔痛消样品液。
2.2.3 痔痛消阴性对照液的制备 根据痔痛消处方剂量及组成，除苦参外，其他组分按原操作规程制备，然后按2.2.2项下方法制得痔痛消阴性对照液，备用。
2.3 稳定性实验 取苦参碱对照品溶液10 μl点于硅胶G板上，按上述薄层层析条件展开。改良碘化铋钾显色后，每隔5 min扫描一次，结果在5～30 min内苦参碱斑点的峰面积值保持稳定，RSD=2.2%。
2.4 同板、异板精密度实验 同一薄层板上同一斑点连续扫描5次，测得峰面积值的RSD=0.9%。测定同一薄层板上的5个相同量的对照品的峰面积值，RSD=1.7%。测定5块不同薄层板相同量的对照品班点峰面积值，其RSD=3.7%，说明精密度较好。
, 百拇医药
2.5 标准曲线的绘制 分别吸取苦参碱对照品溶液10，20，30，40，50 μl点于硅胶G薄层板上，按实验条件薄层展开，作锯齿形扫描，以峰面积值对苦参碱含量绘制标准曲线，得回归方程：Y=2 525+1 175 X,r=0.996 5(n=5)。样品含量在5～25 μg范围内呈良好线性关系。
2.6 干扰因素的考察 在同一硅胶G薄层板上，依次点上苦参碱对照品液、痔痛消样品液和痔痛消阴性对照液各10 μl，按2.1项下薄层层析条件展开，展距15 cm，取出晾干后以改良碘化铋钾喷雾显色。色谱图中可见：痔痛消样品与苦参碱对照品液色谱相应位置上可见橙红色斑点，而相应的痔痛消阴性对照液在相应的位置上无橙红色斑点(见色谱图1)。按2.5项下操作，采用外标两点法进行薄层扫描测定，结果痔痛消阴性对照液中苦参碱的含量为0，说明展开剂选择较好，其他组分对苦参碱的测定无干扰。
图 1 薄层色谱图
1.苦参碱对照品液 2.痔痛消样品液 3.痔痛消阴性对照液
, 百拇医药
2.7 回收率的测定 精密吸取一定量的痔痛消液，分别定量加入苦参碱对照品，以未加苦参碱对照品的痔痛消为对照，按样品测定的方法测定苦参碱的含量，结果见表1。
表 1 加样回收率实验结果 加入量
mg
测得量
mg
回收量
%
平均回收率
%
RSD
%
, 百拇医药
9.21
9.11
98.9
8.74
8.72
99.8
99.9
1.0
11.05
11.14
100.8
2.8 样品含量测定 取痔痛消样品液10 μl点于硅胶G板上，按标准曲线制备方法进行测定，用外标两点法计算含量，结果见表2。
, 百拇医药
表 2 痔痛消中苦参碱的含量测定结果 批 号
含量/mg.ml-1
RSD/%
930804
3.31
2.0
930903
3.17
1.8
931017
3.40
1.9
, http://www.100md.com
950801
3.32
2.3
951101
3.78
1.7
3 讨论
痔痛消由多种药物组成，成分复杂，在我省的地方标准中，对它的质量控制采用薄层层析、定性鉴别的方法进行。但此法比较繁琐，需二次展开，且无定量标准。本次实验采用薄层扫描法测定痔痛消中苦参碱的含量，样品处理简便，只需一次展开，精密度好，结果准确，可作为痔痛消的定量控制标准。 (1998年3月30日收稿), http://www.100md.com
单位：刘文(贵阳中医学院 贵阳550002)；冉云(贵州省公安医院)
关键词：痔痛消；苦参碱；薄层扫描法
中国医院药学杂志990316 摘要 目的:用薄层扫描法对痔痛消中苦参碱进行了含量测定。方法:以氯仿-甲醇-氨水(5∶0.6∶0.2)为展开剂，在CS-920薄层扫描仪上以反射式锯齿扫描方式进行测定，λs=512 nm。结果:样品含量在5～25 μg范围内呈良好线性关系，r=0.996 5(n=5)，平均回收率99.90%，RSD=0.95%。结论:方法简便、精确、快速、重现性好，可作为痔痛消的质量控制标准。
Quantitative determination of matrine in Zhitongxiao by TCL-scanning
, http://www.100md.com
Liu Wen,Ran Yun (Deparment of Pharmaceutic,Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550002)
ABSTRACT OBJECTIVE:A method of the quantiative determination of matrine in “Zhi tongxiao” was develop by mease of TLC-scanning.METHODS:The mobil phase was clorform∶methyl alcohol∶ammonia water(5∶0.2∶0.2).The scanning method were dual wavelegth and zigzag with cs-920 scanner.The detection wavelength was 512 nm.RESULTS:It showed a good linearity between 5～25 μg with the correlation cofficient 0.996 5.The average recovery was 99.90%,RSD=0.95%.CONCLUSIONS:The method is easy,rapid,accurate and reproducible,it can be a quality contral standard of zhitongxiao.
, 百拇医药
KEY WORDS zhitongxiao,matrine,TCL-scanning
痔痛消为我省苗族验方，收载于《贵州省药品标准》(1994年版修订本，贵州省卫生厅编)，是用于治疗各类痔疮、外阴瘙痒的外用洗剂，由苦参、大黄、秦艽、金银花、枳壳等多种药物组成，成分复杂。为控制产品质量，今采用薄层扫描法测定苦参碱的含量。
1 仪器和试药
日本岛津CS-920型薄层扫描仪(美国科学技术公司)；10 μl定量毛细管；硅胶G(薄层层析用，青岛海洋化工厂)；苦参碱对照品(由中国药品生物制品检定所提供批号805-9001)；痔痛消(贵阳中药厂生产批号见表2)；化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 薄层条件
, 百拇医药
2.1.1 吸附剂与展开剂 硅胶G加适量0.3%的CMC-Na，搅拌均匀后，涂布于10 cm×20 cm的玻璃板上，厚度0.25 mm，阴干，在105 ℃的烘箱内活化30 min后，置干燥器中备用。展开剂：氯仿-甲醇-氨水(5∶0.6∶0.2)，改良碘化铋钾喷雾显色。
2.1.2 薄层扫描条件 采用反射式锯齿扫描，扫描速度10 mm.min-1，线性化参数SX=3，AZS=ON，光束狭缝1.2 mm×1.2 mm。
2.1.3 测定波长的选择 将点样后的薄层板置于CS-920薄层扫描仪上，在390～600 nm波长范围内进行光谱扫描，结果苦参碱在512 nm处有最大吸收。
2.2 样品测定前的准备
2.2.1 苦参碱对照品液的制备 精密称取苦参碱对照品5.0 mg，加氯仿适量转移至10 ml量瓶中并稀释至刻度，备用。
, 百拇医药
2.2.2 痔痛消样品液的制备 精密吸取痔痛消5 ml，置于分液漏斗中，用氨水调pH=11，然后用60 ml氯仿分三次萃取，每次20 ml，合并萃取液。水浴挥去大部氯仿后，转移到10 ml的量瓶中，加氯仿稀释至刻度，即得痔痛消样品液。
2.2.3 痔痛消阴性对照液的制备 根据痔痛消处方剂量及组成，除苦参外，其他组分按原操作规程制备，然后按2.2.2项下方法制得痔痛消阴性对照液，备用。
2.3 稳定性实验 取苦参碱对照品溶液10 μl点于硅胶G板上，按上述薄层层析条件展开。改良碘化铋钾显色后，每隔5 min扫描一次，结果在5～30 min内苦参碱斑点的峰面积值保持稳定，RSD=2.2%。
2.4 同板、异板精密度实验 同一薄层板上同一斑点连续扫描5次，测得峰面积值的RSD=0.9%。测定同一薄层板上的5个相同量的对照品的峰面积值，RSD=1.7%。测定5块不同薄层板相同量的对照品班点峰面积值，其RSD=3.7%，说明精密度较好。
, 百拇医药
2.5 标准曲线的绘制 分别吸取苦参碱对照品溶液10，20，30，40，50 μl点于硅胶G薄层板上，按实验条件薄层展开，作锯齿形扫描，以峰面积值对苦参碱含量绘制标准曲线，得回归方程：Y=2 525+1 175 X,r=0.996 5(n=5)。样品含量在5～25 μg范围内呈良好线性关系。
2.6 干扰因素的考察 在同一硅胶G薄层板上，依次点上苦参碱对照品液、痔痛消样品液和痔痛消阴性对照液各10 μl，按2.1项下薄层层析条件展开，展距15 cm，取出晾干后以改良碘化铋钾喷雾显色。色谱图中可见：痔痛消样品与苦参碱对照品液色谱相应位置上可见橙红色斑点，而相应的痔痛消阴性对照液在相应的位置上无橙红色斑点(见色谱图1)。按2.5项下操作，采用外标两点法进行薄层扫描测定，结果痔痛消阴性对照液中苦参碱的含量为0，说明展开剂选择较好，其他组分对苦参碱的测定无干扰。
图 1 薄层色谱图
1.苦参碱对照品液 2.痔痛消样品液 3.痔痛消阴性对照液
, 百拇医药
2.7 回收率的测定 精密吸取一定量的痔痛消液，分别定量加入苦参碱对照品，以未加苦参碱对照品的痔痛消为对照，按样品测定的方法测定苦参碱的含量，结果见表1。
表 1 加样回收率实验结果 加入量
mg
测得量
mg
回收量
%
平均回收率
%
RSD
%
, 百拇医药
9.21
9.11
98.9
8.74
8.72
99.8
99.9
1.0
11.05
11.14
100.8
2.8 样品含量测定 取痔痛消样品液10 μl点于硅胶G板上，按标准曲线制备方法进行测定，用外标两点法计算含量，结果见表2。
, 百拇医药
表 2 痔痛消中苦参碱的含量测定结果 批 号
含量/mg.ml-1
RSD/%
930804
3.31
2.0
930903
3.17
1.8
931017
3.40
1.9
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950801
3.32
2.3
951101
3.78
1.7
3 讨论
痔痛消由多种药物组成，成分复杂，在我省的地方标准中，对它的质量控制采用薄层层析、定性鉴别的方法进行。但此法比较繁琐，需二次展开，且无定量标准。本次实验采用薄层扫描法测定痔痛消中苦参碱的含量，样品处理简便，只需一次展开，精密度好，结果准确，可作为痔痛消的定量控制标准。 (1998年3月30日收稿), http://www.100md.com