黑风藤的化学成分
作者：廖永红 郭 剑 徐丽珍 杨世林
单位：永红， 郭 剑， 徐丽珍， 杨世林(中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物研究所,北京 100094
关键词：
药学学报990312 THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF FISSISTIGMA POLYANTHUM MERR.
Liao Yonghong (Liao YH), Guo Jian (Guo J), Xu Lizhen (Xu LZ) and Yang Shilin (Yang SL)
(Institute of Medicinal Plants, Chinese Academy of Medical Sciences
, http://www.100md.com
and Peking Union Medical College, Beijing 100094)
ABSTRACT AIM: Looking for new compounds with strong anti-tumor and anti-virus activities from Fissistigma polyanthum Merr. METHODS: Various chromatographic techniques were used to separate and purify the constituents.Their physical and chemical properties and spectral data were measured for structural elucidation. RESULTS: Five compounds were isolated from the methanol fraction of ethanol extract of Fissistigma polyanthumd Merr, a medicinal plant of Annonaceae family. On the basis of spectral data (UV, MS and NMR) and comparisons with known compounds, their structures were identified as fissistigmoside (1), 3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside (2), glucosyringic acid (3), dacosterol (4) and inositol (5). CONCLUSION: Compound 1 is a new compound, compounds 2, 3 and 4 were reported in this genus for the first time.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Fissistigma polyanthum Merr.; phenylpropanoid glycoside; fissistigmoside
摘要 目的：从药用植物黑风藤(Fissistigma polyanthum Merr.)中寻找新的抗肿瘤和抗病毒活性成份。方法：利用各种色谱技术进行分离纯化，根据理化性质和光谱数据等进行结构鉴定。结果：从黑风藤乙醇浸膏的甲醇部分分得5个化合物。分别鉴定为：黑风藤苷(1)，3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside)(2)，丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3)，肌醇(4)，胡萝卜苷(5)。结论：化合物1为新化合物，命名为黑风藤苷。2,3,4是首次由本属植物中得到。
关键词 黑风藤;苯丙素苷;黑风藤苷
黑风藤(Fissistigma polyanthum Merr.)是番荔枝科瓜馥木属的一种藤本植物,分布在我国海南、广东、云南、贵州和广西等地。民间用于治疗跌打损伤,风湿性关节炎,感冒及月经不调等症[1]。台湾学者从本属植物中曾分离得到一些生物碱类成分[2～4]。经药理研究发现,黑风藤浸膏有抗病毒活性。为研究其活性成分,作者对黑风藤的化学成分进行研究。从其乙醇浸膏的甲醇部分分得一个新化合物黑风藤苷(1)同时还分得4个已知成分,分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷(3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside)(2)，丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3)，肌醇(4)，胡萝卜苷(5)。本文主要报道新化合物黑风藤苷的结构鉴定。
, 百拇医药
黑风藤苷(1) 白色晶体,α-萘酚和FeCl3试验均呈阳性反应。IR光谱1600,1500 cm-1吸收峰显示1存在苯环。13CNMR δ：135.7(C-1),105.7(C-2,C-6)，147.7(C-3,C-5),127.7(C-4)也显示分子存在苯环,并且可能呈1,3,4,5四取代,由1HNMR δ：3.74(6H,s)，6.62(2H,s,2-H,6-H)可知分子中含有2个甲氧基，2个芳香氢，取代基呈对称性,证明了以上推测。EI-MS给出388[M+],结合氢谱和碳谱数据推导出分子式为C17H24O10。综上分析，推断1为3,5-二甲氧基-4-羟基苯取代物。13CNMR谱显示分子中有1个葡萄糖基。但是C-1′和C-2′的化学位移与葡萄糖[5]相比分别向低场位移5.1 ppm和6.1 ppm,说明葡萄糖基C-1′和C-2′羟基苷化。由1H-1H COSY δ：3.33(1H,m,3′-H),3.17(1H,t,J=9.0 Hz,4′-H),3.21(1H,m,6′-H),3.48(1H,dd,J=12.5,4.5 Hz,9-H)与加入重水消失的羟基氢相关，显示C-3′,C-4′,C-6′和C-9分别与1个羟基相连。1H-1H COSY也显示7-H与8-H,8-H与9-H相关。说明C-8分别与C-7,C-9相连。13CNMR显示C-7(δ 78.4),C-8(δ 80.6)为偕氧碳。由NOESY谱7-H与1′-H,8-H与2′-H的相关,推测C-7与C-8分别与C-1′和C-2′通过氧原子相连,并且7-H与1′-H,8-H与2′-H的立体关系均为顺式。1HNMR谱7-H(δ 4.24)与8-H(δ 3.72)的偶合常数为7.8 Hz显示7-H/8-H为α键反式构象。同理1′-H/2′-H也为α键反式构象。NOESY谱7-H与1′-H,8-H与2′-H的相关关系与1HNMR一致。据此确定化合物1的结构如下图。
, 百拇医药
实验部分
熔点用Fisher-John熔点仪测定，温度未校正。NMR用Bruker AM 500型仪测定，用C5D5N或DMSO作溶剂，TMS为内标；UV用Philips PYE Union PU8800型仪测定；IR用Perkin-Elmer 983G型仪测定；EIMS(70 eV)和FABMS用VG-ZAB-2F型仪测定；生药于1992年7月采自云南省西双版纳。
1 提取分离
9.5 kg藤茎粉碎后，用95%工业EtOH回流提取3次，提取液减压浓缩得浸膏380 g。浸膏分别用CH2Cl2,EtOAc和MeOH回流洗脱得3个部分。其中MeOH部分(286 g)经硅胶柱色谱，用CHCl3—MeOH溶剂系统梯度洗脱,TLC检测,合并得5部分(Fr 1～Fr 5)。Fr 2部分经聚酰胺柱色谱，CHCl3—MeOH溶剂系统梯度洗脱,30% CH3OH部分经Sephadex LH-20纯化得化合物2,3。Fr 3部分经硅胶柱色谱用EtOAc—CH3OH溶剂系统梯度洗脱,其中3% CH3OH部分,经Sephadex LH-20纯化,得化合物4。其中10% CH3OH部分,用Sephadex LH-20纯化,得化合物5。Fr 4部分经硅胶柱色谱EtOAc—CH3OH溶剂系统梯度洗脱,20% CH3OH部分经Sephadex LH-20纯化,得化合物1。
, 百拇医药
2 鉴定
黑风藤苷(1) 白色结晶，mp 188～190℃。UVλMeOHmax nm:210,268。IR(KBr) cm-1:3400,1600,1500,1130。EIMS m/z(%):388(M+,30),370(5),226(23),210(12),196(18),182(100),167(22),154(5)。1HNMR和13CNMR数据见表1。
Tab 1 13CNMR (125 MHz, DMSO-d6) and 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) chemical shifts of 1
C
, 百拇医药
H
1
135.7
2,6
105.7
6.62 (s)
3,5
147.7
4
127.7
7
78.4
4.25 (d,J=7.5 Hz)
, 百拇医药
8
80.6
3.72 (m)
9
60.9
3.48 (dd,J=12.5,4.5 Hz)
3.70 (m)
3,5-OMe
56.1
3.74 (s)
Glucose
1′
, 百拇医药
97.8
4.46 (d,7.8)
2′
79.2
2.94 (t,7.8)
3′
73.1
3.33 (t,7.8)
4′
70.5
3.17 (t,7.8)
5′
, http://www.100md.com 78.4
3.27 (m)
6′
60.4
3.21 (m)
3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(2) 白色结晶，mp 200～202℃。UVλMeOHmax nm:200,250。IR(KBr) cm-1:3400,2880,1600,1500,1420,1140,1090,1000,820。EIMS m/z(%):346(M+),184(100),169(50),154(15),141(6)。1HNMR(C5D5N) δ:3.70(6H,s,2 OCH3),3.82(3H,s,OCH3),6.77(2H,s),5.5(1H,d,J=7.4 Hz,glc 1-H)。13CNMR(C5D5N) δ:155.3(C-1),154.3(C-3,5),145.3(C-4),96.4(C-2,6),103(glc C-1′),79.1(C-5′),78.7(C-3′),75.0(C-2′),71.7(C-4′),62.8(C-6′),60.7(OCH3),56.6(2×OCH3)。以上数据与文献[6]报道3,4,5-三甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷一致。
, 百拇医药
丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3) 白色结晶，mp 218～220℃。UVλMeOHmax nm:200,250。IR(KBr) cm-1:3400,1600,1500。EIMS m/z(%):360(M+)。1HNMR(C5D5N) δ:3.70(6H,s,2×OCH3),7.76(2H,s),8.70(s,COOH),6.0(1H,d,J=6.8 Hz,glc 1′-H)。13CNMR(C5D5N) δ:133.0(C-1),108.7(C-2,6),153.4(C-3,5),139.8(C-4),168.6(C-7),104.1(glc C-1′),78.9(C-5′),78.1(C-3′),76.1(C-2′),71.6(C-4′),62.6(C-6′),56.9(2×OCH3)。以上数据与文献[7]报道丁香酸葡萄糖苷一致。
, 百拇医药
肌醇(4) 白色粉末,mp 220℃。IR(KBr) cm-1:3400(OH),2980(C-H),1480,1420,1160(C-O),1120,1080,1010,910。EI-MS m/z:181(M+1),163,102,60。1HNMR(C5D5N) δ:2.9(1H,t,J=9.3 Hz,1-H),3.1(2H,dd,J=9.9,2.9 Hz,3,5-H),3.2(2H,t,J=9.7 Hz,2,6-H),3.6(1H,t,J=2.9 Hz,4-H)。以上数据与文献[8]报导内消旋肌醇相符。
胡萝卜苷(5) 白色粉末,mp>300℃。IR(KBr) cm-1:3400(-OH),2940,1640(C=C),1460,1380,1070,960。EI-MS m/z:414(M+-glc+H),396。与胡萝卜苷标准品对照,Rf值相同,混合熔点不下降。确定化合物5为胡萝卜苷。
, 百拇医药
致谢 本所资源室连文炎教授鉴定植物学名；北京微量化学研究所和医科院药物所代测NMR谱，医科院药物所代测MS谱，本所刘惠灵同志代测IR和UV谱。
联系人 Tel:(010)62899728, E-mail:jian-guo@hotmail.com)
参考文献
1 江苏新医学院.中药大词典.第二版.上海：上海科学技术出版社.1986.2390
2 Lu ST, Wu YC, Leou SP. Alkaloids of Formasan Fissistigma and Goniothalamus Species. Phytochemistry, 1985,24∶1829
3 Wu YC, Lu ST, Wu YS, et al. Kuafumine, a novel cytotoxic oxoporphine alkaloid from Fissistigma glaucescens. Hyterocycles, 1987,26∶9
, http://www.100md.com
4 Wu YC, Kao SC, Huang JF, et al. Two phenanthrene alkaloids from Fissistigma glaucescens. Phytochemistry, 1990,29∶2387
5 于德泉,杨俊山,谢晶曦.分析化学手册-第五分册.北京：化学工业出版社.1989.823
6 Shimomura H, Sashida Y, Oohara M, et al. Phenolic glucosides from Parabenzoin praecox. Phytochemistry, 1988,27∶644
7 Sano K, Sanada S, Ida Y, et al. Studies on the constituents of the bark of Kalopanax pictus Nakai. Chem Pharm Bull, 1991,39∶865
8 常晓丽,马冰如,单敬文,等.狗枣猕猴桃叶化学成分研究.中草药,1996,27∶39
收稿日期: 1998-05-11, http://www.100md.com
单位：永红， 郭 剑， 徐丽珍， 杨世林(中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物研究所,北京 100094
关键词：
药学学报990312 THE CHEMICAL CONSTITUENTS OF FISSISTIGMA POLYANTHUM MERR.
Liao Yonghong (Liao YH), Guo Jian (Guo J), Xu Lizhen (Xu LZ) and Yang Shilin (Yang SL)
(Institute of Medicinal Plants, Chinese Academy of Medical Sciences
, http://www.100md.com
and Peking Union Medical College, Beijing 100094)
ABSTRACT AIM: Looking for new compounds with strong anti-tumor and anti-virus activities from Fissistigma polyanthum Merr. METHODS: Various chromatographic techniques were used to separate and purify the constituents.Their physical and chemical properties and spectral data were measured for structural elucidation. RESULTS: Five compounds were isolated from the methanol fraction of ethanol extract of Fissistigma polyanthumd Merr, a medicinal plant of Annonaceae family. On the basis of spectral data (UV, MS and NMR) and comparisons with known compounds, their structures were identified as fissistigmoside (1), 3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside (2), glucosyringic acid (3), dacosterol (4) and inositol (5). CONCLUSION: Compound 1 is a new compound, compounds 2, 3 and 4 were reported in this genus for the first time.
, http://www.100md.com
KEY WORDS Fissistigma polyanthum Merr.; phenylpropanoid glycoside; fissistigmoside
摘要 目的：从药用植物黑风藤(Fissistigma polyanthum Merr.)中寻找新的抗肿瘤和抗病毒活性成份。方法：利用各种色谱技术进行分离纯化，根据理化性质和光谱数据等进行结构鉴定。结果：从黑风藤乙醇浸膏的甲醇部分分得5个化合物。分别鉴定为：黑风藤苷(1)，3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside)(2)，丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3)，肌醇(4)，胡萝卜苷(5)。结论：化合物1为新化合物，命名为黑风藤苷。2,3,4是首次由本属植物中得到。
关键词 黑风藤;苯丙素苷;黑风藤苷
黑风藤(Fissistigma polyanthum Merr.)是番荔枝科瓜馥木属的一种藤本植物,分布在我国海南、广东、云南、贵州和广西等地。民间用于治疗跌打损伤,风湿性关节炎,感冒及月经不调等症[1]。台湾学者从本属植物中曾分离得到一些生物碱类成分[2～4]。经药理研究发现,黑风藤浸膏有抗病毒活性。为研究其活性成分,作者对黑风藤的化学成分进行研究。从其乙醇浸膏的甲醇部分分得一个新化合物黑风藤苷(1)同时还分得4个已知成分,分别鉴定为:3,4,5-三甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷(3,4,5-trimethoxyphenyl-1-O-β-D-glucoside)(2)，丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3)，肌醇(4)，胡萝卜苷(5)。本文主要报道新化合物黑风藤苷的结构鉴定。
, 百拇医药
黑风藤苷(1) 白色晶体,α-萘酚和FeCl3试验均呈阳性反应。IR光谱1600,1500 cm-1吸收峰显示1存在苯环。13CNMR δ：135.7(C-1),105.7(C-2,C-6)，147.7(C-3,C-5),127.7(C-4)也显示分子存在苯环,并且可能呈1,3,4,5四取代,由1HNMR δ：3.74(6H,s)，6.62(2H,s,2-H,6-H)可知分子中含有2个甲氧基，2个芳香氢，取代基呈对称性,证明了以上推测。EI-MS给出388[M+],结合氢谱和碳谱数据推导出分子式为C17H24O10。综上分析，推断1为3,5-二甲氧基-4-羟基苯取代物。13CNMR谱显示分子中有1个葡萄糖基。但是C-1′和C-2′的化学位移与葡萄糖[5]相比分别向低场位移5.1 ppm和6.1 ppm,说明葡萄糖基C-1′和C-2′羟基苷化。由1H-1H COSY δ：3.33(1H,m,3′-H),3.17(1H,t,J=9.0 Hz,4′-H),3.21(1H,m,6′-H),3.48(1H,dd,J=12.5,4.5 Hz,9-H)与加入重水消失的羟基氢相关，显示C-3′,C-4′,C-6′和C-9分别与1个羟基相连。1H-1H COSY也显示7-H与8-H,8-H与9-H相关。说明C-8分别与C-7,C-9相连。13CNMR显示C-7(δ 78.4),C-8(δ 80.6)为偕氧碳。由NOESY谱7-H与1′-H,8-H与2′-H的相关,推测C-7与C-8分别与C-1′和C-2′通过氧原子相连,并且7-H与1′-H,8-H与2′-H的立体关系均为顺式。1HNMR谱7-H(δ 4.24)与8-H(δ 3.72)的偶合常数为7.8 Hz显示7-H/8-H为α键反式构象。同理1′-H/2′-H也为α键反式构象。NOESY谱7-H与1′-H,8-H与2′-H的相关关系与1HNMR一致。据此确定化合物1的结构如下图。
, 百拇医药
实验部分
熔点用Fisher-John熔点仪测定，温度未校正。NMR用Bruker AM 500型仪测定，用C5D5N或DMSO作溶剂，TMS为内标；UV用Philips PYE Union PU8800型仪测定；IR用Perkin-Elmer 983G型仪测定；EIMS(70 eV)和FABMS用VG-ZAB-2F型仪测定；生药于1992年7月采自云南省西双版纳。
1 提取分离
9.5 kg藤茎粉碎后，用95%工业EtOH回流提取3次，提取液减压浓缩得浸膏380 g。浸膏分别用CH2Cl2,EtOAc和MeOH回流洗脱得3个部分。其中MeOH部分(286 g)经硅胶柱色谱，用CHCl3—MeOH溶剂系统梯度洗脱,TLC检测,合并得5部分(Fr 1～Fr 5)。Fr 2部分经聚酰胺柱色谱，CHCl3—MeOH溶剂系统梯度洗脱,30% CH3OH部分经Sephadex LH-20纯化得化合物2,3。Fr 3部分经硅胶柱色谱用EtOAc—CH3OH溶剂系统梯度洗脱,其中3% CH3OH部分,经Sephadex LH-20纯化,得化合物4。其中10% CH3OH部分,用Sephadex LH-20纯化,得化合物5。Fr 4部分经硅胶柱色谱EtOAc—CH3OH溶剂系统梯度洗脱,20% CH3OH部分经Sephadex LH-20纯化,得化合物1。
, 百拇医药
2 鉴定
黑风藤苷(1) 白色结晶，mp 188～190℃。UVλMeOHmax nm:210,268。IR(KBr) cm-1:3400,1600,1500,1130。EIMS m/z(%):388(M+,30),370(5),226(23),210(12),196(18),182(100),167(22),154(5)。1HNMR和13CNMR数据见表1。
Tab 1 13CNMR (125 MHz, DMSO-d6) and 1HNMR (500 MHz, DMSO-d6) chemical shifts of 1
C
, 百拇医药
H
1
135.7
2,6
105.7
6.62 (s)
3,5
147.7
4
127.7
7
78.4
4.25 (d,J=7.5 Hz)
, 百拇医药
8
80.6
3.72 (m)
9
60.9
3.48 (dd,J=12.5,4.5 Hz)
3.70 (m)
3,5-OMe
56.1
3.74 (s)
Glucose
1′
, 百拇医药
97.8
4.46 (d,7.8)
2′
79.2
2.94 (t,7.8)
3′
73.1
3.33 (t,7.8)
4′
70.5
3.17 (t,7.8)
5′
, http://www.100md.com 78.4
3.27 (m)
6′
60.4
3.21 (m)
3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(2) 白色结晶，mp 200～202℃。UVλMeOHmax nm:200,250。IR(KBr) cm-1:3400,2880,1600,1500,1420,1140,1090,1000,820。EIMS m/z(%):346(M+),184(100),169(50),154(15),141(6)。1HNMR(C5D5N) δ:3.70(6H,s,2 OCH3),3.82(3H,s,OCH3),6.77(2H,s),5.5(1H,d,J=7.4 Hz,glc 1-H)。13CNMR(C5D5N) δ:155.3(C-1),154.3(C-3,5),145.3(C-4),96.4(C-2,6),103(glc C-1′),79.1(C-5′),78.7(C-3′),75.0(C-2′),71.7(C-4′),62.8(C-6′),60.7(OCH3),56.6(2×OCH3)。以上数据与文献[6]报道3,4,5-三甲氧基苯酚-β-D-葡萄糖苷一致。
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丁香酸葡萄糖苷(glucosyringic acid)(3) 白色结晶，mp 218～220℃。UVλMeOHmax nm:200,250。IR(KBr) cm-1:3400,1600,1500。EIMS m/z(%):360(M+)。1HNMR(C5D5N) δ:3.70(6H,s,2×OCH3),7.76(2H,s),8.70(s,COOH),6.0(1H,d,J=6.8 Hz,glc 1′-H)。13CNMR(C5D5N) δ:133.0(C-1),108.7(C-2,6),153.4(C-3,5),139.8(C-4),168.6(C-7),104.1(glc C-1′),78.9(C-5′),78.1(C-3′),76.1(C-2′),71.6(C-4′),62.6(C-6′),56.9(2×OCH3)。以上数据与文献[7]报道丁香酸葡萄糖苷一致。
, 百拇医药
肌醇(4) 白色粉末,mp 220℃。IR(KBr) cm-1:3400(OH),2980(C-H),1480,1420,1160(C-O),1120,1080,1010,910。EI-MS m/z:181(M+1),163,102,60。1HNMR(C5D5N) δ:2.9(1H,t,J=9.3 Hz,1-H),3.1(2H,dd,J=9.9,2.9 Hz,3,5-H),3.2(2H,t,J=9.7 Hz,2,6-H),3.6(1H,t,J=2.9 Hz,4-H)。以上数据与文献[8]报导内消旋肌醇相符。
胡萝卜苷(5) 白色粉末,mp>300℃。IR(KBr) cm-1:3400(-OH),2940,1640(C=C),1460,1380,1070,960。EI-MS m/z:414(M+-glc+H),396。与胡萝卜苷标准品对照,Rf值相同,混合熔点不下降。确定化合物5为胡萝卜苷。
, 百拇医药
致谢 本所资源室连文炎教授鉴定植物学名；北京微量化学研究所和医科院药物所代测NMR谱，医科院药物所代测MS谱，本所刘惠灵同志代测IR和UV谱。
联系人 Tel:(010)62899728, E-mail:jian-guo@hotmail.com)
参考文献
1 江苏新医学院.中药大词典.第二版.上海：上海科学技术出版社.1986.2390
2 Lu ST, Wu YC, Leou SP. Alkaloids of Formasan Fissistigma and Goniothalamus Species. Phytochemistry, 1985,24∶1829
3 Wu YC, Lu ST, Wu YS, et al. Kuafumine, a novel cytotoxic oxoporphine alkaloid from Fissistigma glaucescens. Hyterocycles, 1987,26∶9
, http://www.100md.com
4 Wu YC, Kao SC, Huang JF, et al. Two phenanthrene alkaloids from Fissistigma glaucescens. Phytochemistry, 1990,29∶2387
5 于德泉,杨俊山,谢晶曦.分析化学手册-第五分册.北京：化学工业出版社.1989.823
6 Shimomura H, Sashida Y, Oohara M, et al. Phenolic glucosides from Parabenzoin praecox. Phytochemistry, 1988,27∶644
7 Sano K, Sanada S, Ida Y, et al. Studies on the constituents of the bark of Kalopanax pictus Nakai. Chem Pharm Bull, 1991,39∶865
8 常晓丽,马冰如,单敬文,等.狗枣猕猴桃叶化学成分研究.中草药,1996,27∶39
收稿日期: 1998-05-11, http://www.100md.com