不同产地灵芝中多糖含量的比较
作者：唐力 邢继强 韩玉泽
单位：佳木斯大学医学院
关键词：灵芝多糖；葡萄糖
黑龙江医药科学990317
提要 以灵芝水溶性多糖作为灵芝中多糖含量进行测定和比较。结果表明，不同产地的同种灵芝由于其人工栽培条件的不同，多糖含量存在差异，提示不能简单的以灵芝的外观评价其质量。
灵芝(Ganoderma lucidum)是我国医药学宝库中的一种珍贵药、食两用菌，据《中医大辞典》记载：灵芝性温、味甘，以养病为主，有益心气、生血、助心安神、益肺气、坚筋骨、利关节、安神补肝等多种功能[1]。现代科学研究表明：灵芝含有多糖、多种氨基酸、甾类、三萜类、碱类、生物碱、有机酸、甘露醇，并含有多种微量元素，其中灵芝多糖是一重要有效成分。灵芝多糖能增强小鼠腹腔巨细胞的吞噬功能，促进蛋白质、核酸的形成及提高免疫功能[2]。我室在开展灵芝增加白细胞、促进免疫功能的研究中，对不同产地的灵芝进行多糖含量的测定，以此作为灵芝质量鉴定的基本指标。
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1 实验材料、仪器及试剂
灵芝多糖纯品由北京医科大学药学院提供，泰山灵芝、广洲灵芝、北京灵芝、佳木斯灵芝均购于当地；LXJ-Ⅱ型离心机(上海医用分析仪器厂)，CX-100型超声振荡器(北京宣武电子仪器厂)，M8500自动记录紫外/可见光分光光度计(泰洲无线电设备厂)；临用新配制的5%苯酚试剂，葡萄糖对照品(105℃干燥恒重)及其它试剂。
2 实验方法及结果
2.1 多糖标准曲线的制备[3]
①标准溶液的配制：精确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖1.00g，置于100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度；②苯酚液的配制：取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏，收集182℃馏分，称取10g，加水稀释至200ml，置棕色瓶中保存；③标准曲线的绘制：精确吸取标准品液10、20、40、60、80、100μl，分置具塞试管中，加蒸馏水至体积2.0ml，再加苯酚试液1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0ml，放置5min，置沸水浴中加热15min，冷至室温。另取蒸馏水2.0ml，加苯酚和硫酸，同法操作为空白对照，于490nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线。回归方程为A=6.431×10-3C+1.0×10-2，回归系数r=0.9981，(其中A为吸收度，C为葡萄糖浓度)。
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2.2 供试液的制备
将灵芝粉碎，60℃干燥5h，精确称取5.00g，加10，10，5倍量水置沸水浴依次加热，1，1，0.5h，过滤，滤液合并浓缩，加95%乙醇，离心，沉淀用95%乙醇洗涤，60℃烘干恒重，依次加入25，15，10ml水，沸水浴10min，超声振荡10min，离心，上清液合并，加水定容至100ml备用。
2.3 换算系数的测定
精密称取60℃干燥恒重的灵芝多糖纯品约200mg，置100ml容量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀。精确吸取1ml置10ml容量瓶中，定容。精确吸取1ml，照“标准曲线制备”项下方法测定吸收度，从回归方程求出多糖供试液中葡萄糖浓度C，按下式计算换算系素F=W/(C×D)，式中W为多糖纯品重量(mg)，D为多糖的稀释因素，测得F=1.60。
2.4 样品测定
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精确吸取供试液2ml，按“标准曲线的制备”项下方法测定吸收度，按下式计算样品中的多糖含量。
多糖含量%＝(C×D×F)/W×100%
式中：C为供试液中葡萄糖浓度(mg/ml)，D为供试液的稀释因素系数，F为换算，W为灵芝重量(g)。结果以两次平行实验平均值计，见附表。附表 不同产地灵芝多糖含量测定结果 供试品产地
外形
部位
含量(%)
泰山
鹿角状
子实体
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1.12
广洲
鹿角状
子实体
1.61
北京
云头状
子实体
0.91
佳木斯
云头状
子实体
1.58
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3 小结
本文以灵芝有效成分之一灵芝水溶性多糖作为灵芝中多糖含量进行了测定和比较。结果表明不同产地的同种灵芝由于其人工栽培条件的不同，会导致多糖含量的差异。鹿角状灵芝中的多糖含量不总高于云头状灵芝多糖的含量，说明灵芝的外形并不影响灵芝多糖的含量。现市售灵芝的品种较多，其价格多以外形而定，本实验为灵芝的内在质量评价提供了依据。
参考文献
1.赵根楠.中国菇类栽培手册.北京:科学普及出版社,1991,394
2.李兆兰.灵芝菌丝体和发酵液有效成分及含量测定.中草药,1994,25(1):17
3.王强.枸杞子中多糖的含量测定.中草药,1991,22(2):67
(1999-02-20收稿), http://www.100md.com
单位：佳木斯大学医学院
关键词：灵芝多糖；葡萄糖
黑龙江医药科学990317
提要 以灵芝水溶性多糖作为灵芝中多糖含量进行测定和比较。结果表明，不同产地的同种灵芝由于其人工栽培条件的不同，多糖含量存在差异，提示不能简单的以灵芝的外观评价其质量。
灵芝(Ganoderma lucidum)是我国医药学宝库中的一种珍贵药、食两用菌，据《中医大辞典》记载：灵芝性温、味甘，以养病为主，有益心气、生血、助心安神、益肺气、坚筋骨、利关节、安神补肝等多种功能[1]。现代科学研究表明：灵芝含有多糖、多种氨基酸、甾类、三萜类、碱类、生物碱、有机酸、甘露醇，并含有多种微量元素，其中灵芝多糖是一重要有效成分。灵芝多糖能增强小鼠腹腔巨细胞的吞噬功能，促进蛋白质、核酸的形成及提高免疫功能[2]。我室在开展灵芝增加白细胞、促进免疫功能的研究中，对不同产地的灵芝进行多糖含量的测定，以此作为灵芝质量鉴定的基本指标。
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1 实验材料、仪器及试剂
灵芝多糖纯品由北京医科大学药学院提供，泰山灵芝、广洲灵芝、北京灵芝、佳木斯灵芝均购于当地；LXJ-Ⅱ型离心机(上海医用分析仪器厂)，CX-100型超声振荡器(北京宣武电子仪器厂)，M8500自动记录紫外/可见光分光光度计(泰洲无线电设备厂)；临用新配制的5%苯酚试剂，葡萄糖对照品(105℃干燥恒重)及其它试剂。
2 实验方法及结果
2.1 多糖标准曲线的制备[3]
①标准溶液的配制：精确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖1.00g，置于100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度；②苯酚液的配制：取苯酚100g，加铝片0.1g和碳酸氢钠0.05g，蒸馏，收集182℃馏分，称取10g，加水稀释至200ml，置棕色瓶中保存；③标准曲线的绘制：精确吸取标准品液10、20、40、60、80、100μl，分置具塞试管中，加蒸馏水至体积2.0ml，再加苯酚试液1.0ml，摇匀，迅速滴加浓硫酸5.0ml，放置5min，置沸水浴中加热15min，冷至室温。另取蒸馏水2.0ml，加苯酚和硫酸，同法操作为空白对照，于490nm波长处测定吸收度，绘制标准曲线。回归方程为A=6.431×10-3C+1.0×10-2，回归系数r=0.9981，(其中A为吸收度，C为葡萄糖浓度)。
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2.2 供试液的制备
将灵芝粉碎，60℃干燥5h，精确称取5.00g，加10，10，5倍量水置沸水浴依次加热，1，1，0.5h，过滤，滤液合并浓缩，加95%乙醇，离心，沉淀用95%乙醇洗涤，60℃烘干恒重，依次加入25，15，10ml水，沸水浴10min，超声振荡10min，离心，上清液合并，加水定容至100ml备用。
2.3 换算系数的测定
精密称取60℃干燥恒重的灵芝多糖纯品约200mg，置100ml容量瓶中，加水溶解至刻度，摇匀。精确吸取1ml置10ml容量瓶中，定容。精确吸取1ml，照“标准曲线制备”项下方法测定吸收度，从回归方程求出多糖供试液中葡萄糖浓度C，按下式计算换算系素F=W/(C×D)，式中W为多糖纯品重量(mg)，D为多糖的稀释因素，测得F=1.60。
2.4 样品测定
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精确吸取供试液2ml，按“标准曲线的制备”项下方法测定吸收度，按下式计算样品中的多糖含量。
多糖含量%＝(C×D×F)/W×100%
式中：C为供试液中葡萄糖浓度(mg/ml)，D为供试液的稀释因素系数，F为换算，W为灵芝重量(g)。结果以两次平行实验平均值计，见附表。附表 不同产地灵芝多糖含量测定结果 供试品产地
外形
部位
含量(%)
泰山
鹿角状
子实体
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1.12
广洲
鹿角状
子实体
1.61
北京
云头状
子实体
0.91
佳木斯
云头状
子实体
1.58
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3 小结
本文以灵芝有效成分之一灵芝水溶性多糖作为灵芝中多糖含量进行了测定和比较。结果表明不同产地的同种灵芝由于其人工栽培条件的不同，会导致多糖含量的差异。鹿角状灵芝中的多糖含量不总高于云头状灵芝多糖的含量，说明灵芝的外形并不影响灵芝多糖的含量。现市售灵芝的品种较多，其价格多以外形而定，本实验为灵芝的内在质量评价提供了依据。
参考文献
1.赵根楠.中国菇类栽培手册.北京:科学普及出版社,1991,394
2.李兆兰.灵芝菌丝体和发酵液有效成分及含量测定.中草药,1994,25(1):17
3.王强.枸杞子中多糖的含量测定.中草药,1991,22(2):67
(1999-02-20收稿), http://www.100md.com