大鼠丘脑、基底节及内囊的微血管构筑及其定量研究
作者:戴晓玲 张致身 王元身 张进禄 潘海燕
单位:首都医科大学北京神经科学研究所 戴晓玲 王元身 张进禄 潘海燕;张致身 首都医科大学解剖学教研室
关键词:丘脑;基底节;内囊;微血管构筑;定量研究
首都医科大学学报990402 提要: 用墨汁灌注法、组织化学二氨基联苯胺(DAB)血管染色法及二盐酸联苯胺(BDHC)血管染色法对正常大鼠脑冠状切片进行观察,研究大鼠丘脑、基底节及内囊的微血管构筑,并用Leica显微分光光度计测量光密度值(OD值)来进行定量研究。结果表明,丘脑、基底节及内囊各结构的毛细血管吻合成网,不同神经组织内血管网形态各异,密度差异十分显著。丘脑内毛细血管吻合丰富且复杂。基底节的尾状核及苍白球内血管网形态相似且较密,网孔较小。内囊中血管分布多与内囊脚一致方向排列,管径较粗,网孔较大。各核团的血管密度显著高于神经纤维区的血管密度。
, 百拇医药
中图分类号: R322.81
The Microangioarchitectonic and Quantitative Study on Rat′s Thalamus,Basal Nuclei and Internal Capsule
Dai Xiaoling, Zhang Zhishen*, Wang Yuanshen,Zhang Jinlu, Pan Haiyan
Beijing Institute for Neurosciences, Capital University of Medical Sciences
Abstract:Coronal sections of the normal rat′s brain′s were observed by perfusion with a mixture of prepared Chinese ink and gelatin, staining the blood vessels with 3-3′diamino benzidine (DAB) and benzidine dihydrochloride (BDHC) respectively. The microangioarchitecture of the thalamus, basal nuclei and internal capsule in rat was studied and its OD (optical density) was measured by the Leica microspectroscopy. Results showed that the capillary network from different neural structures anastomosed in to meshes of different forms and their densities varied differently. The capillary network of the thalamus was rich and complex. The capillary network of the caudate putamen and globus pallidus of the basal nuclei was similar and the meshes smaller. The capillary network of the internal capsule was arranged in the same direction of the internal capsule′s peduncle, their diameters were a little bit larger than others. The capillary network density of each nucleus was denser than that of the neurofibrillar areas.
, 百拇医药
Key words:thalamus; basal nuclei; internal capsule; microangioarchitecture; quantitative study Department of Anatomy, Capital University of Medical Sciences
脑内微血管的构筑及其定量研究是研究脑微循环动力学变化规律和调节机制的基础,对阐明脑血管疾患的病理学机制也具有意义[1]。而近年来兴起的脑疾病基因治疗的研究工作发现,中枢神经组织内移植转基因组织的存活和生长与其周围血管构筑有密切关系[2]。本研究用墨汁血管灌注后的脑标本,以及组织化学二氨基联苯胺(DAB)、二盐酸联苯胺(BDHC)血管染色后的脑标本,运用显微分光光度计,采用光密度值(OD值)测量丘脑、基底节及内囊的血管密度,并对其血管构筑进行了观察。
1 材料和方法
, 百拇医药
健康成年SD大鼠(首都医科大学实验动物部提供)15只,雌雄不拘,体质量200~250 g。实验分成墨汁连续灌注固定组、DAB血管染色和BDHC血管染色组3组。
墨汁连续灌注固定组:取5只大鼠用6%水合氯醛(6 mL/kg)腹腔麻醉下经升主动脉快速灌注250 mL温生理盐水,再用250 mL10%温墨汁明胶甲醛液(10%北京牌墨汁、10%甲醛、2.5%明胶)常温下灌注2 h。拔管后夹住血管于4 ℃置放1 d后,再开颅取全脑于含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm。贴片,常规脱水,透明,封固。
DAB血管染色组:取5只大鼠直接断头,立即开颅取全脑于10%甲醛固定液中固定1 d,换入含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm,贴片。切片如下处理:①下行到水,入蒸馏水中洗10~20 min。②入0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4,4 ℃)冲洗。③入0.1%CaCl2 10 min,蒸馏水冲洗。④入0.1 mol/L磷酸缓冲液浸3次。⑤入0.1 mol/L磷酸缓冲液30 mL,其中加入鼠血清100 μL,浸10 min。⑥再加入DAB液(DAB 10 mg,蒸馏水10 mL,0.1 mol/L PB 1 mL,30% H2O2 50 μL。),摇匀,浸20~30 min(室温)。⑦入0.1 mol/L磷酸缓冲液洗5~10 min。⑧常规脱水,透明,封固。
, 百拇医药
BDHC血管染色组:取5只大鼠直接断头,立即开颅取全脑于10%甲醛固定液中固定1 d, 换入含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm,贴片。切片如下处理:①下行到水,入蒸馏水中洗10~20 min。②入0.2 mol/L醋酸缓冲液(pH 5.0,4 ℃)40 mL,其中加入鼠血清100 μL,浸10 min。③入BDHC染液(BDHC 20 mg,蒸馏水32 mL,无水乙醇6 mL,0.2 mol/L醋酸缓冲液2 mL,亚硝基铁氰化钠40 mg),20~30 min。④染液中再加入30% H2O2 50 μL,摇匀,浸20~30 min(室温)。⑤入蒸馏水中洗3次。⑥常规脱水,透明,封固。
另取部分切片不经血管染色,直接 Nissl 染色,辨认组织结构,与墨汁灌注法和血管染色法相对照,并观察毛细血管与神经组织的关系。
丘脑、基底节及内囊处血管密度测定方法:将染色好的切片置于显微镜下观察毛细血管构筑。采用Leica多功能显微分光光度计和MPV-BIO软件。先选取某一无任何组织结构的视野(40 μm×40 μm)作为空白对照,然后选择经墨汁灌注、DAB血管染色和BDHC血管染色后有丘脑、基底节及内囊区结构的组织切片,鼠脑两侧测量部位各随机选取前、中、后3个40 μm×40 μm 大小的取样区(注意避开微动脉和微静脉),以固定的单色光(波长500 nm)测量其光透射率(取样区光强与空白对照区光强之比值),然后转换成OD值。测量毛细血管密度时,用OD值大小显示各部位血管密度的相对高低。在某一取样区内染色部位面积越大,OD值越高,反之亦然。使用SYSTAT医学统计软件用计算机对OD值进行方差分析。
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2 结果
2.1 一般观察
光镜下可见大鼠脑内毛细血管构筑。各神经结构的毛细血管网疏密不等,丘脑、基底节及内囊处的核团及传导纤维束之间的差异显著。在切片上,依据位置及毛细血管网的不同,即可大致分出核团及纤维束。与Nissl染色后的切片相对照,结果吻合。3种方法切片背景皆为无色透明,但血管颜色各不相同。墨汁灌注法呈黑色,DAB法呈棕黑色,BDHC法呈蓝黑色。墨汁灌注显示完整的血管形态(图1a)。血管染色法显示染色的血细胞序列排出毛细血管轮廓,毛细血管柱状间歇排列,中间常有空白区(图1b、c)。血管染色法只染血细胞,毛细血管壁显示不明显。
图1 鼠脑光镜片
a:墨汁灌注法,b:DAB血管染色法,c:BDHC血管染色法
, 百拇医药 2.2 丘脑、基底节和内囊内部血管构筑
从透明切片可见丘脑毛细血管密度极高,以至形成了与周围结构明显不同的丘脑整体轮廓。毛细血管网形态不规则,不同部位的毛细血管密度并非完全一致,但相差不多。毛细血管十分密集弯曲,彼此间重叠吻合成网,其形态也十分复杂。丘脑内有许多细胞构筑及纤维联系不同的核团,大多数核团之间并无天然的边界。分布于基底节区的动脉经2~4级分支形成毛细血管网,血管处形成的神经结构清晰可见。尾壳核血管丰富,它的分支多呈锐角状反复分支,分支走向不定,彼此吻合成不规则形网。苍白球内血管较密,网孔较小。内囊的分支多与内囊脚一致方向排列,各分支再以不同角度分出续支,互相吻合,构成长方形、多边形等。
2.3 丘脑、基底节及内囊处血管密度测定结果
SD大鼠丘脑、基底节区内各核团和内囊毛细血管密度高低不等,核团与神经纤维组织区的毛细血管密度也不同。在丘脑、基底节区内各核团和内囊部位毛细血管密度由高到低依次为:丘脑、尾壳核、苍白球、内囊。丘脑内各亚核团血管密度无差异。但丘脑与基底节核团的密度显著高于内囊,详见表1。
, 百拇医药
表1 墨汁灌注法、DAB血管染色和BDHC血管染色法SD大鼠不同脑区的OD值 脑区
墨汁灌注
DAB
BDHC
薄片
厚片
薄片
厚片
薄片
厚片
丘脑
0.093±0.011
, 百拇医药
0.283±0.015
0.104±0.005
0.221±0.015
0.121±0.009
0.169±0.009
基底节
尾状核
0.055±0.005
0.137±0.007
0.068±0.005
0.109±0.005
, http://www.100md.com 0.083±0.003
0.122±0.004
苍白球
0.033±0.004
0.087±0.005
0.046±0.003
0.075±0.005
0.047±0.007
0.071±0.003
内囊
0.022±0.004
0.047±0.003
, 百拇医药
0.026±0.002
0.044±0.000
0.024±0.002
0.040±0.003
表1数据经过方差分析,各核团之间的数据比较P均<0.01,表明各核团结构之间的血管密度有显著性差异。
3 讨论
3.1 实验方法的选择
使用墨汁灌注法由于受注射液颗粒大小的限制,较微细的毛细血管显示不充分,加上灌注压的影响,保持管壁自然形态,准确反映血管正常直径较为困难[3]。血管染色法是根据血细胞中的内源性过氧化物酶(endogenous peroxidase)作用于底物过氧化氢,释放出原子氧,使联苯胺及其衍生物产生有色沉淀,显示血细胞, 间接显示毛细血管构象[4]。而血细胞又可以变形通过小于血细胞直径的血管,因此血管染色法可以较好地显示脑内毛细血管的构筑情况,并且构象清晰完全。血管染色法只染血细胞,因此血管的连续性没有墨汁灌注法那样完整清晰。
, 百拇医药
3.2 丘脑、基底节区及内囊微血管的吻合
有关丘脑、基底节区及内囊血管构筑学研究较多,但其内部毛细血管是否存在吻合一直是人们争论的问题。1872年Cohnheim首先提出人脑内动脉为终动脉。Anderson等认为大脑内部、纹状体和内囊的毛细血管在不同神经组织内吻合成不同的血管网[5]。从切片可见丘脑、基底节区及内囊内部存在毛细血管网,且其形态在不同神经组织内各不相同。在神经元胞体聚集区,血管网形态多样,网孔较小,密度较大。而神经纤维区内血管网主要为长方形,且与纤维走向同向排列,网眼大,密度小。因此,至少在大鼠丘脑、基底节区和内囊内毛细血管是吻合成网的,且网的形态与其所营养的神经组织结构和功能活动有一定的关系。
3.3 血管密度的研究
血管密度测量的方法和指标很多。王有伟用单位体积内毛细血管总长度、分支数及分支比例等方法[6],Trommer等用单位面积内毛细血管计数方法[7]。我们根据墨汁灌注和血管染色后的切片,使用显微分光光度计测量在某一单色光时取样区的透射率(着色部位/总面积之比值),转换成OD值,来比较各取样区着色面积的大小。Leica显微分光光度计对一个取样区进行多次测量后,给出数据平均值,这样可以较好地避免由于外界因素引起光波动对数据的影响。并且由于它选取的是取样部位与选定空白区之间的比较,较好地避免了由于背景噪声对密度值带来的影响,而且不论微血管粗细,镜下是否容易观察,都能够计算测量,尽可能减少了人为因素的影响,使结果更为可靠。
, 百拇医药
3.4 丘脑、基底节及内囊区毛细血管密度差异的探讨
神经组织不同结构内毛细血管密度差异的原因目前尚未明了。Dunning 和Wolff提出,含有较多突触结构的神经组织比仅在神经细胞内传导冲动的神经组织的(即含较少或不含突触结构的神经组织)血液供应丰富得多[8]。
本研究通过实验推想,神经组织内毛细血管密度是由神经成分、机能和代谢活跃程度等综合因素决定的。神经元是神经组织形态和机能的基本单位,它以胞体为核心,代谢活跃,需氧量大,需要较多的能量,其周围血管密度亦高。神经纤维主要具有电生理和代谢物质的传递功能,因而代谢不十分活跃,需氧量小,血管密度低。
参考文献
1 顾正中.脑循环与临床.上海:上海科学与技术出版社,1983.1~4,12~13
, 百拇医药
2 刘玉军,张国风,蔡青,等.鼠胚胎脑移植物血管构筑的研究.首都医学院学报,1993,14(1):8~15
3 田牛. 微循环学基础与临床.北京:人民军医出版社,1986.340~342
4 Pearse A G E. Histochemistry theoretical and applied, volume 2, analytical technology. London and New York: Churchill Livingstone Edinburgh, 1985.485~488
5 Anderson B G, Anderson W D. Shunting in intracranial microvasculature demonstrated by SEM of corrosion-casts. Am J Anat, 1978,153(4):617
, 百拇医药
6 王有伟,陈以慈. 国人脑基底节区的毛细血管形态计量学研究. 中国医科大学学报,1987,16(6):401
7 Trommer B L. Quantitative analysis of cerebral vessels may predispose homorrhage. Pediatr Res, 1987, 122(1):23
8 Dunning H S, Wolff H G. The relative vascularity of various parts of the central and peripheral nervous system of the cat and its relation to function. J Comp Neurol, 1937,67:433
收稿日期:1998-06-17, http://www.100md.com
单位:首都医科大学北京神经科学研究所 戴晓玲 王元身 张进禄 潘海燕;张致身 首都医科大学解剖学教研室
关键词:丘脑;基底节;内囊;微血管构筑;定量研究
首都医科大学学报990402 提要: 用墨汁灌注法、组织化学二氨基联苯胺(DAB)血管染色法及二盐酸联苯胺(BDHC)血管染色法对正常大鼠脑冠状切片进行观察,研究大鼠丘脑、基底节及内囊的微血管构筑,并用Leica显微分光光度计测量光密度值(OD值)来进行定量研究。结果表明,丘脑、基底节及内囊各结构的毛细血管吻合成网,不同神经组织内血管网形态各异,密度差异十分显著。丘脑内毛细血管吻合丰富且复杂。基底节的尾状核及苍白球内血管网形态相似且较密,网孔较小。内囊中血管分布多与内囊脚一致方向排列,管径较粗,网孔较大。各核团的血管密度显著高于神经纤维区的血管密度。
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中图分类号: R322.81
The Microangioarchitectonic and Quantitative Study on Rat′s Thalamus,Basal Nuclei and Internal Capsule
Dai Xiaoling, Zhang Zhishen*, Wang Yuanshen,Zhang Jinlu, Pan Haiyan
Beijing Institute for Neurosciences, Capital University of Medical Sciences
Abstract:Coronal sections of the normal rat′s brain′s were observed by perfusion with a mixture of prepared Chinese ink and gelatin, staining the blood vessels with 3-3′diamino benzidine (DAB) and benzidine dihydrochloride (BDHC) respectively. The microangioarchitecture of the thalamus, basal nuclei and internal capsule in rat was studied and its OD (optical density) was measured by the Leica microspectroscopy. Results showed that the capillary network from different neural structures anastomosed in to meshes of different forms and their densities varied differently. The capillary network of the thalamus was rich and complex. The capillary network of the caudate putamen and globus pallidus of the basal nuclei was similar and the meshes smaller. The capillary network of the internal capsule was arranged in the same direction of the internal capsule′s peduncle, their diameters were a little bit larger than others. The capillary network density of each nucleus was denser than that of the neurofibrillar areas.
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Key words:thalamus; basal nuclei; internal capsule; microangioarchitecture; quantitative study Department of Anatomy, Capital University of Medical Sciences
脑内微血管的构筑及其定量研究是研究脑微循环动力学变化规律和调节机制的基础,对阐明脑血管疾患的病理学机制也具有意义[1]。而近年来兴起的脑疾病基因治疗的研究工作发现,中枢神经组织内移植转基因组织的存活和生长与其周围血管构筑有密切关系[2]。本研究用墨汁血管灌注后的脑标本,以及组织化学二氨基联苯胺(DAB)、二盐酸联苯胺(BDHC)血管染色后的脑标本,运用显微分光光度计,采用光密度值(OD值)测量丘脑、基底节及内囊的血管密度,并对其血管构筑进行了观察。
1 材料和方法
, 百拇医药
健康成年SD大鼠(首都医科大学实验动物部提供)15只,雌雄不拘,体质量200~250 g。实验分成墨汁连续灌注固定组、DAB血管染色和BDHC血管染色组3组。
墨汁连续灌注固定组:取5只大鼠用6%水合氯醛(6 mL/kg)腹腔麻醉下经升主动脉快速灌注250 mL温生理盐水,再用250 mL10%温墨汁明胶甲醛液(10%北京牌墨汁、10%甲醛、2.5%明胶)常温下灌注2 h。拔管后夹住血管于4 ℃置放1 d后,再开颅取全脑于含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm。贴片,常规脱水,透明,封固。
DAB血管染色组:取5只大鼠直接断头,立即开颅取全脑于10%甲醛固定液中固定1 d,换入含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm,贴片。切片如下处理:①下行到水,入蒸馏水中洗10~20 min。②入0.1 mol/L磷酸盐缓冲液(pH 7.4,4 ℃)冲洗。③入0.1%CaCl2 10 min,蒸馏水冲洗。④入0.1 mol/L磷酸缓冲液浸3次。⑤入0.1 mol/L磷酸缓冲液30 mL,其中加入鼠血清100 μL,浸10 min。⑥再加入DAB液(DAB 10 mg,蒸馏水10 mL,0.1 mol/L PB 1 mL,30% H2O2 50 μL。),摇匀,浸20~30 min(室温)。⑦入0.1 mol/L磷酸缓冲液洗5~10 min。⑧常规脱水,透明,封固。
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BDHC血管染色组:取5只大鼠直接断头,立即开颅取全脑于10%甲醛固定液中固定1 d, 换入含30%蔗糖的10%甲醛中固定(4 ℃)。1周后恒冷箱连续冠状厚薄交替切片,厚片100 μm,薄片50 μm,贴片。切片如下处理:①下行到水,入蒸馏水中洗10~20 min。②入0.2 mol/L醋酸缓冲液(pH 5.0,4 ℃)40 mL,其中加入鼠血清100 μL,浸10 min。③入BDHC染液(BDHC 20 mg,蒸馏水32 mL,无水乙醇6 mL,0.2 mol/L醋酸缓冲液2 mL,亚硝基铁氰化钠40 mg),20~30 min。④染液中再加入30% H2O2 50 μL,摇匀,浸20~30 min(室温)。⑤入蒸馏水中洗3次。⑥常规脱水,透明,封固。
另取部分切片不经血管染色,直接 Nissl 染色,辨认组织结构,与墨汁灌注法和血管染色法相对照,并观察毛细血管与神经组织的关系。
丘脑、基底节及内囊处血管密度测定方法:将染色好的切片置于显微镜下观察毛细血管构筑。采用Leica多功能显微分光光度计和MPV-BIO软件。先选取某一无任何组织结构的视野(40 μm×40 μm)作为空白对照,然后选择经墨汁灌注、DAB血管染色和BDHC血管染色后有丘脑、基底节及内囊区结构的组织切片,鼠脑两侧测量部位各随机选取前、中、后3个40 μm×40 μm 大小的取样区(注意避开微动脉和微静脉),以固定的单色光(波长500 nm)测量其光透射率(取样区光强与空白对照区光强之比值),然后转换成OD值。测量毛细血管密度时,用OD值大小显示各部位血管密度的相对高低。在某一取样区内染色部位面积越大,OD值越高,反之亦然。使用SYSTAT医学统计软件用计算机对OD值进行方差分析。
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2 结果
2.1 一般观察
光镜下可见大鼠脑内毛细血管构筑。各神经结构的毛细血管网疏密不等,丘脑、基底节及内囊处的核团及传导纤维束之间的差异显著。在切片上,依据位置及毛细血管网的不同,即可大致分出核团及纤维束。与Nissl染色后的切片相对照,结果吻合。3种方法切片背景皆为无色透明,但血管颜色各不相同。墨汁灌注法呈黑色,DAB法呈棕黑色,BDHC法呈蓝黑色。墨汁灌注显示完整的血管形态(图1a)。血管染色法显示染色的血细胞序列排出毛细血管轮廓,毛细血管柱状间歇排列,中间常有空白区(图1b、c)。血管染色法只染血细胞,毛细血管壁显示不明显。
图1 鼠脑光镜片
a:墨汁灌注法,b:DAB血管染色法,c:BDHC血管染色法
, 百拇医药 2.2 丘脑、基底节和内囊内部血管构筑
从透明切片可见丘脑毛细血管密度极高,以至形成了与周围结构明显不同的丘脑整体轮廓。毛细血管网形态不规则,不同部位的毛细血管密度并非完全一致,但相差不多。毛细血管十分密集弯曲,彼此间重叠吻合成网,其形态也十分复杂。丘脑内有许多细胞构筑及纤维联系不同的核团,大多数核团之间并无天然的边界。分布于基底节区的动脉经2~4级分支形成毛细血管网,血管处形成的神经结构清晰可见。尾壳核血管丰富,它的分支多呈锐角状反复分支,分支走向不定,彼此吻合成不规则形网。苍白球内血管较密,网孔较小。内囊的分支多与内囊脚一致方向排列,各分支再以不同角度分出续支,互相吻合,构成长方形、多边形等。
2.3 丘脑、基底节及内囊处血管密度测定结果
SD大鼠丘脑、基底节区内各核团和内囊毛细血管密度高低不等,核团与神经纤维组织区的毛细血管密度也不同。在丘脑、基底节区内各核团和内囊部位毛细血管密度由高到低依次为:丘脑、尾壳核、苍白球、内囊。丘脑内各亚核团血管密度无差异。但丘脑与基底节核团的密度显著高于内囊,详见表1。
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表1 墨汁灌注法、DAB血管染色和BDHC血管染色法SD大鼠不同脑区的OD值 脑区
墨汁灌注
DAB
BDHC
薄片
厚片
薄片
厚片
薄片
厚片
丘脑
0.093±0.011
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0.283±0.015
0.104±0.005
0.221±0.015
0.121±0.009
0.169±0.009
基底节
尾状核
0.055±0.005
0.137±0.007
0.068±0.005
0.109±0.005
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0.122±0.004
苍白球
0.033±0.004
0.087±0.005
0.046±0.003
0.075±0.005
0.047±0.007
0.071±0.003
内囊
0.022±0.004
0.047±0.003
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0.026±0.002
0.044±0.000
0.024±0.002
0.040±0.003
表1数据经过方差分析,各核团之间的数据比较P均<0.01,表明各核团结构之间的血管密度有显著性差异。
3 讨论
3.1 实验方法的选择
使用墨汁灌注法由于受注射液颗粒大小的限制,较微细的毛细血管显示不充分,加上灌注压的影响,保持管壁自然形态,准确反映血管正常直径较为困难[3]。血管染色法是根据血细胞中的内源性过氧化物酶(endogenous peroxidase)作用于底物过氧化氢,释放出原子氧,使联苯胺及其衍生物产生有色沉淀,显示血细胞, 间接显示毛细血管构象[4]。而血细胞又可以变形通过小于血细胞直径的血管,因此血管染色法可以较好地显示脑内毛细血管的构筑情况,并且构象清晰完全。血管染色法只染血细胞,因此血管的连续性没有墨汁灌注法那样完整清晰。
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3.2 丘脑、基底节区及内囊微血管的吻合
有关丘脑、基底节区及内囊血管构筑学研究较多,但其内部毛细血管是否存在吻合一直是人们争论的问题。1872年Cohnheim首先提出人脑内动脉为终动脉。Anderson等认为大脑内部、纹状体和内囊的毛细血管在不同神经组织内吻合成不同的血管网[5]。从切片可见丘脑、基底节区及内囊内部存在毛细血管网,且其形态在不同神经组织内各不相同。在神经元胞体聚集区,血管网形态多样,网孔较小,密度较大。而神经纤维区内血管网主要为长方形,且与纤维走向同向排列,网眼大,密度小。因此,至少在大鼠丘脑、基底节区和内囊内毛细血管是吻合成网的,且网的形态与其所营养的神经组织结构和功能活动有一定的关系。
3.3 血管密度的研究
血管密度测量的方法和指标很多。王有伟用单位体积内毛细血管总长度、分支数及分支比例等方法[6],Trommer等用单位面积内毛细血管计数方法[7]。我们根据墨汁灌注和血管染色后的切片,使用显微分光光度计测量在某一单色光时取样区的透射率(着色部位/总面积之比值),转换成OD值,来比较各取样区着色面积的大小。Leica显微分光光度计对一个取样区进行多次测量后,给出数据平均值,这样可以较好地避免由于外界因素引起光波动对数据的影响。并且由于它选取的是取样部位与选定空白区之间的比较,较好地避免了由于背景噪声对密度值带来的影响,而且不论微血管粗细,镜下是否容易观察,都能够计算测量,尽可能减少了人为因素的影响,使结果更为可靠。
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3.4 丘脑、基底节及内囊区毛细血管密度差异的探讨
神经组织不同结构内毛细血管密度差异的原因目前尚未明了。Dunning 和Wolff提出,含有较多突触结构的神经组织比仅在神经细胞内传导冲动的神经组织的(即含较少或不含突触结构的神经组织)血液供应丰富得多[8]。
本研究通过实验推想,神经组织内毛细血管密度是由神经成分、机能和代谢活跃程度等综合因素决定的。神经元是神经组织形态和机能的基本单位,它以胞体为核心,代谢活跃,需氧量大,需要较多的能量,其周围血管密度亦高。神经纤维主要具有电生理和代谢物质的传递功能,因而代谢不十分活跃,需氧量小,血管密度低。
参考文献
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收稿日期:1998-06-17, http://www.100md.com