急性脑梗死患者脑脊液及血浆中GMP-140、Vwf含量的研究
作者：范学文 孔凡元 潘月英 刘菊年
单位：宁夏医学院附属医院神经内科 750004
关键词：脑梗死；脑脊液；GMP-140；vWF
宁夏医学院学报990402 摘 要 目的：研究脑梗死急性期患者脑脊液(CSF)和血浆中血小板颗粒膜蛋白-140(GMP-140)和血管性假血友病因子(vWF)含量的变化及临床意义。方法：应用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定了34例脑梗死急性期病人CSF和血浆中GMP-140、vWF的含量。结果：病人组CSF和血浆中GMP-140、vWF含量较正常对照组显著升高(P<0.01)。结论：脑梗死患者急性期存在高凝状态和血小板活化功能亢进以及脑血管内皮的损伤；检测CSF中GMP-140和vWF含量的变化对进一步了解急性脑梗死的发病机理和治疗提供了理论依据，对于观察病情演变、判断预后均有重要的临床意义。
, 百拇医药
Study of the Contents and Clinical Significance of GMP-140
and vWF In Cerebrospinal Fluid and Plasma
in Patients with Cerebral Infarction
Fan Xuewen,Kong Fanyuan,Pan Yueying,et al
(The Department of Neurology in Affiliated Hospital of Ningxia Med.Coll.)
Abstract Objective:To study the contents and clinical significance of Alphagranule membrane protein-140(GMP-140),von Willebrand factor(vWF)in cerebrospinal fluid(CSF) and plasma of patients with cerebral infarction.Methods:With ELISA method， GMP-140,vWF in CSF and plasma of 34 cases suffering from cerebral infarction were measured and compared.Results:During the acute period of cerebral infarction,the contents of GMP-140,vWF in CSF and plasma were higher significantly than that of the control group(P<0.01).Conclusions:The GMP-140 and vWF in CSF are the specific parameters of the hypercoagulable state and of the damage at endotheliocyte of cerebral vessels in the patients with cerebral infarction.The measurement may be useful for study of pathological mechanism,differential diagnosis,therapy and prognosis of patients with ischemic cerebrovascular diseases.
, 百拇医药
Key words cerebral infarction;CSF;vWF;GMP-140
脑梗死是发病率较高，危害性较大的疾病之一，在其发病过程中存在着血小板活性的亢进和血管内皮细胞受损。现已表明，GMP-140含量的变化能反应出体内血小板活化的程度[1]，而vWF是血管内皮细胞受损的指标[2]。血浆中GMP-140和vWF含量与急性脑梗死关系的研究已有报道，但脑梗死时脑脊液中是否含有GMP-140和vWF甚少报道。本实验旨在探讨脑梗死急性期脑脊液中GMP-140和vWF含量的变化。
1 资料与方法
1.1 病例 脑梗死组34例，男23例，女11例。年龄50～68岁，平均年龄59岁。为我科1997年10月～1998年3月住院患者，根据第二次全国脑血管病学术会议拟定标准，均经脑CT或MRI确诊为脑梗死。临床上无心脏病表现并排除结缔组织病、血液系统疾病和肝、肾功能异常性疾病。对照组24例，男15例，女9例。年龄48～68岁，平均60岁。系骨科做椎管造影正常的非神经系统疾病患者，排除心、脑、肝、肾等全身器质性病变。
, 百拇医药
1.2 标本制备及保存 患者入院3d内做腰穿留取脑脊液，分装，-20℃保存，同时抽取静脉血置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液的试管中，3000r/min离心10min，取血浆，分装，-20℃保存。对照组在做椎管造影时留取脑脊液标本(椎管造影提示异常者弃去)，同时采血，同法保存。
1.3 检测方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。试剂盒由福建太阳生物技术公司提供。操作均严格按说明书进行。
1.4 统计方法 两样本均数比较采用t检验，两变量间的关系用直线相关与回归法，全组数据以
±s表示。
2 结果
对照组和病人组脑脊液、血浆中GMP-140及vWF含量测定结果如附表所示。
, 百拇医药
血浆GMP-140与vWF成正相关r=0.92、P<0.01)。
附表 两组CSF及血浆中GMP-140、vWF含量的比较 分组
例数
vWF
GMP-140
CSF(%)
血浆(%)
CSF(ng/ml)
血浆(ng/ml)
病人组
34
, 百拇医药
143.00+31.50
234.00+34.50
15.10+3.17
20.70+3.83
对照组
24
95.40+10.40
101.00+17.20
11.90+2.26
12.10+2.24
P
<0.01
, 百拇医药
<0.01
<0.01
<0.01
3 讨论
GMP-140是一个富含半胱氨酸，高度糖化的整合蛋白质，分子骨架由一条多肽链构成，分子量为14万。它存在于巨核细胞、静止血小板a-颗粒膜和内皮细胞Weibel-palade小体膜上，GMP-140是血小板或内皮细胞活化释放产物之一，反映体内血小板活化程度及血栓形成倾向，亦称血小板活化依赖的颗粒膜外显蛋白，在正常血小板表面仅有700个分子，而在凝血酶活化后可增至11000个分子。血小板活化时被释放于血浆中，介导活化血小板粘附功能，是血小板活化释放的特异标志之一，可作为体内血小板活化程度和血栓形成的标志物[3]。因此，对于心肌梗塞、脑血栓形成、糖尿病以及体外循环手术的病人，GMP-140可作为诊断、疗效观察和判断预后的一项指标[3，4]。本实验检测了脑梗塞急性期病人CSF和血浆中GMP-140含量。结果发现病人组CSF和血浆中GMP-140含量均明显高于对照组CSF和血浆的含量，t检验具有显著性差异(P<0.01)。说明GMP-140不仅存在于血液中，而且也存在于CSF中。脑梗死急性期均显著增高。血浆检测结果与国内张氏报道一致[1，3]。
, 百拇医药
vWF是血管内皮细胞合成的糖蛋白由17种氨基酸和4种糖基组成，分子量为850000。与血液中因子Ⅷ结合，是因子Ⅷ在循环中的载体。后者与血液高凝状态密切相关，且是反映内皮细胞受损的指标之一[5]。vWF分子结构上含有血小板膜糖蛋白Ⅰb、Ⅱb/Ⅲa及肝素和胶原的结合位点，是血小板粘附到受损血管壁上不可缺少的成分[6]。当血管内皮细胞受损时，vWF的合成增加并大量释放入血液中，因此，vWF是血管内皮细胞受损的标志[2]。现已明确，缺血性脑血管病存在血管内皮细胞受损[7]。本实验检测了脑梗塞急性期病人CSF和血浆中vWF含量。结果发现病人组CSF和血浆中vWF含量均明显高于对照组CSF和血浆的含量，t检验具有显著性差异(P<0.01)。也说明vWF不仅存在于血液中，而且也存在于CSF中。脑梗死急性期均显著增高。其结果与国内王氏报道一致[8]。
一般血液中GMP-140含量增加，多见于急性心肌梗塞、血栓性疾病、代谢性疾病、自身免疫性疾病等全身性疾病；而血液中vWF含量升高多见于糖尿病、肝硬化、肾脏疾病等全身性疾病。故测量血浆中GMP-140和vWF含量的变化无特异性。GMP-140和vWF均为大分子物质，正常情况下不易透过血-脑屏障。本实验在正常CSF中检测到了GMP-140和vWF，可能是由于在正常成人脑组织内，在第三脑室底的个别小区域和围绕第四脑室尾端的一小块极后区，缺乏血脑屏障[9]。这些部位直接与血循环相通，使得释放入血液中的GMP-140和vWF随血液循环，经脉络丛在产生脑脊液的同时，一同流入蛛网膜下腔。当脑部缺血缺氧时，血—脑屏障正常功能遭到破坏，血液中GMP-140和 vWF可自由通过已丧失功能的血—脑屏障，通过脉络丛随产生的脑脊液一同流入蛛网膜下腔。而此时血液中GMP-140和vWF含量也由于血管内皮的损伤和血小板的活化而增加。双重因素的影响，使脑梗死急性期脑脊液中GMP-140和vWF的含量显著增高。
, 百拇医药
由于脑血管是全身血管的组成部分之一，脑血管与外周血管的病变是相同的，所以缺血性脑血管病血中GMP-140和vWF含量的变化与全身血管病的改变是相同的，不具有特异性。但脑脊液中GMP-140和vWF含量的变化更能准确反映脑血管病变的本质，可作为缺血性脑血管病诊断、疗效观察和预后判断的指标。
本研究结果还表明，vWF和GMP-140成正相关，提示脑梗死急性期脑血管内皮损伤后，释放凝血刺激因子，激活血小板，GMP-140入血增多。血小板功能亢进，进一步加重高凝状态。因此，临床早期应用抗血小板药物，对防治缺血性脑血管病有一定意义。
总之，对CSF和血浆中GMP-140、vWF含量变化的研究，不仅能进一步了解急性脑梗死的发病机理，而且对于早期进行干预治疗、观察病情演变和判断预后均具有一定的使用价值。
参考文献
1 包仕尧，李 文，邵国富.抗人活化血小板单克隆抗体在脑血栓诊断中的应用研究.临床神经科学，1994，2(1)：63
, http://www.100md.com
2 王振义.因子Ⅷ相关抗原抗血清临床应用的意义.中华血液学杂志，1981，2(2)：105
3 吴国新，阮长耿.血小板颗粒膜蛋白研究进展.中华血液杂志，1994，15(3)：162
4 Wu Gx,Li Fg,Li Px,et al.Detection of activated platelets using activation-dependent monoclonal antibody(SZ-51)in clinical disorders.Nouv Rev Fr Hematol,1992,2:91
5 Bloom AL.The biosynthesis of factor VⅢ.Clinic Hemotol,1979,8:53
6 Eller Th,Brauer P,Albert J,et al.Significance and quantitive analysis of von willebrand factor in human plalelts.Thromb Res,1992,65:631
7 杨金升，郭 平.内皮细胞与脑血管疾病.国外医学脑血管病分册，1993，1(2)：69
8 王永华，曾庆杏，黄兴汉.脑梗死病人脑脊液及血浆vWF含量的研究.卒中与神经疾病，1996，3(2)：85
9 史玉泉，周孝达主编.实用神经病学.上海：上海科学技术出版社，1994.292
1999-03-12收稿，任义芳编辑, 百拇医药
单位：宁夏医学院附属医院神经内科 750004
关键词：脑梗死；脑脊液；GMP-140；vWF
宁夏医学院学报990402 摘 要 目的：研究脑梗死急性期患者脑脊液(CSF)和血浆中血小板颗粒膜蛋白-140(GMP-140)和血管性假血友病因子(vWF)含量的变化及临床意义。方法：应用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定了34例脑梗死急性期病人CSF和血浆中GMP-140、vWF的含量。结果：病人组CSF和血浆中GMP-140、vWF含量较正常对照组显著升高(P<0.01)。结论：脑梗死患者急性期存在高凝状态和血小板活化功能亢进以及脑血管内皮的损伤；检测CSF中GMP-140和vWF含量的变化对进一步了解急性脑梗死的发病机理和治疗提供了理论依据，对于观察病情演变、判断预后均有重要的临床意义。
, 百拇医药
Study of the Contents and Clinical Significance of GMP-140
and vWF In Cerebrospinal Fluid and Plasma
in Patients with Cerebral Infarction
Fan Xuewen,Kong Fanyuan,Pan Yueying,et al
(The Department of Neurology in Affiliated Hospital of Ningxia Med.Coll.)
Abstract Objective:To study the contents and clinical significance of Alphagranule membrane protein-140(GMP-140),von Willebrand factor(vWF)in cerebrospinal fluid(CSF) and plasma of patients with cerebral infarction.Methods:With ELISA method， GMP-140,vWF in CSF and plasma of 34 cases suffering from cerebral infarction were measured and compared.Results:During the acute period of cerebral infarction,the contents of GMP-140,vWF in CSF and plasma were higher significantly than that of the control group(P<0.01).Conclusions:The GMP-140 and vWF in CSF are the specific parameters of the hypercoagulable state and of the damage at endotheliocyte of cerebral vessels in the patients with cerebral infarction.The measurement may be useful for study of pathological mechanism,differential diagnosis,therapy and prognosis of patients with ischemic cerebrovascular diseases.
, 百拇医药
Key words cerebral infarction;CSF;vWF;GMP-140
脑梗死是发病率较高，危害性较大的疾病之一，在其发病过程中存在着血小板活性的亢进和血管内皮细胞受损。现已表明，GMP-140含量的变化能反应出体内血小板活化的程度[1]，而vWF是血管内皮细胞受损的指标[2]。血浆中GMP-140和vWF含量与急性脑梗死关系的研究已有报道，但脑梗死时脑脊液中是否含有GMP-140和vWF甚少报道。本实验旨在探讨脑梗死急性期脑脊液中GMP-140和vWF含量的变化。
1 资料与方法
1.1 病例 脑梗死组34例，男23例，女11例。年龄50～68岁，平均年龄59岁。为我科1997年10月～1998年3月住院患者，根据第二次全国脑血管病学术会议拟定标准，均经脑CT或MRI确诊为脑梗死。临床上无心脏病表现并排除结缔组织病、血液系统疾病和肝、肾功能异常性疾病。对照组24例，男15例，女9例。年龄48～68岁，平均60岁。系骨科做椎管造影正常的非神经系统疾病患者，排除心、脑、肝、肾等全身器质性病变。
, 百拇医药
1.2 标本制备及保存 患者入院3d内做腰穿留取脑脊液，分装，-20℃保存，同时抽取静脉血置于含有1/10体积0.109mol/L枸橼酸钠抗凝液的试管中，3000r/min离心10min，取血浆，分装，-20℃保存。对照组在做椎管造影时留取脑脊液标本(椎管造影提示异常者弃去)，同时采血，同法保存。
1.3 检测方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。试剂盒由福建太阳生物技术公司提供。操作均严格按说明书进行。
1.4 统计方法 两样本均数比较采用t检验，两变量间的关系用直线相关与回归法，全组数据以
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对照组和病人组脑脊液、血浆中GMP-140及vWF含量测定结果如附表所示。
, 百拇医药
血浆GMP-140与vWF成正相关r=0.92、P<0.01)。
附表 两组CSF及血浆中GMP-140、vWF含量的比较 分组
例数
vWF
GMP-140
CSF(%)
血浆(%)
CSF(ng/ml)
血浆(ng/ml)
病人组
34
, 百拇医药
143.00+31.50
234.00+34.50
15.10+3.17
20.70+3.83
对照组
24
95.40+10.40
101.00+17.20
11.90+2.26
12.10+2.24
P
<0.01
, 百拇医药
<0.01
<0.01
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3 讨论
GMP-140是一个富含半胱氨酸，高度糖化的整合蛋白质，分子骨架由一条多肽链构成，分子量为14万。它存在于巨核细胞、静止血小板a-颗粒膜和内皮细胞Weibel-palade小体膜上，GMP-140是血小板或内皮细胞活化释放产物之一，反映体内血小板活化程度及血栓形成倾向，亦称血小板活化依赖的颗粒膜外显蛋白，在正常血小板表面仅有700个分子，而在凝血酶活化后可增至11000个分子。血小板活化时被释放于血浆中，介导活化血小板粘附功能，是血小板活化释放的特异标志之一，可作为体内血小板活化程度和血栓形成的标志物[3]。因此，对于心肌梗塞、脑血栓形成、糖尿病以及体外循环手术的病人，GMP-140可作为诊断、疗效观察和判断预后的一项指标[3，4]。本实验检测了脑梗塞急性期病人CSF和血浆中GMP-140含量。结果发现病人组CSF和血浆中GMP-140含量均明显高于对照组CSF和血浆的含量，t检验具有显著性差异(P<0.01)。说明GMP-140不仅存在于血液中，而且也存在于CSF中。脑梗死急性期均显著增高。血浆检测结果与国内张氏报道一致[1，3]。
, 百拇医药
vWF是血管内皮细胞合成的糖蛋白由17种氨基酸和4种糖基组成，分子量为850000。与血液中因子Ⅷ结合，是因子Ⅷ在循环中的载体。后者与血液高凝状态密切相关，且是反映内皮细胞受损的指标之一[5]。vWF分子结构上含有血小板膜糖蛋白Ⅰb、Ⅱb/Ⅲa及肝素和胶原的结合位点，是血小板粘附到受损血管壁上不可缺少的成分[6]。当血管内皮细胞受损时，vWF的合成增加并大量释放入血液中，因此，vWF是血管内皮细胞受损的标志[2]。现已明确，缺血性脑血管病存在血管内皮细胞受损[7]。本实验检测了脑梗塞急性期病人CSF和血浆中vWF含量。结果发现病人组CSF和血浆中vWF含量均明显高于对照组CSF和血浆的含量，t检验具有显著性差异(P<0.01)。也说明vWF不仅存在于血液中，而且也存在于CSF中。脑梗死急性期均显著增高。其结果与国内王氏报道一致[8]。
一般血液中GMP-140含量增加，多见于急性心肌梗塞、血栓性疾病、代谢性疾病、自身免疫性疾病等全身性疾病；而血液中vWF含量升高多见于糖尿病、肝硬化、肾脏疾病等全身性疾病。故测量血浆中GMP-140和vWF含量的变化无特异性。GMP-140和vWF均为大分子物质，正常情况下不易透过血-脑屏障。本实验在正常CSF中检测到了GMP-140和vWF，可能是由于在正常成人脑组织内，在第三脑室底的个别小区域和围绕第四脑室尾端的一小块极后区，缺乏血脑屏障[9]。这些部位直接与血循环相通，使得释放入血液中的GMP-140和vWF随血液循环，经脉络丛在产生脑脊液的同时，一同流入蛛网膜下腔。当脑部缺血缺氧时，血—脑屏障正常功能遭到破坏，血液中GMP-140和 vWF可自由通过已丧失功能的血—脑屏障，通过脉络丛随产生的脑脊液一同流入蛛网膜下腔。而此时血液中GMP-140和vWF含量也由于血管内皮的损伤和血小板的活化而增加。双重因素的影响，使脑梗死急性期脑脊液中GMP-140和vWF的含量显著增高。
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由于脑血管是全身血管的组成部分之一，脑血管与外周血管的病变是相同的，所以缺血性脑血管病血中GMP-140和vWF含量的变化与全身血管病的改变是相同的，不具有特异性。但脑脊液中GMP-140和vWF含量的变化更能准确反映脑血管病变的本质，可作为缺血性脑血管病诊断、疗效观察和预后判断的指标。
本研究结果还表明，vWF和GMP-140成正相关，提示脑梗死急性期脑血管内皮损伤后，释放凝血刺激因子，激活血小板，GMP-140入血增多。血小板功能亢进，进一步加重高凝状态。因此，临床早期应用抗血小板药物，对防治缺血性脑血管病有一定意义。
总之，对CSF和血浆中GMP-140、vWF含量变化的研究，不仅能进一步了解急性脑梗死的发病机理，而且对于早期进行干预治疗、观察病情演变和判断预后均具有一定的使用价值。
参考文献
1 包仕尧，李 文，邵国富.抗人活化血小板单克隆抗体在脑血栓诊断中的应用研究.临床神经科学，1994，2(1)：63
, http://www.100md.com
2 王振义.因子Ⅷ相关抗原抗血清临床应用的意义.中华血液学杂志，1981，2(2)：105
3 吴国新，阮长耿.血小板颗粒膜蛋白研究进展.中华血液杂志，1994，15(3)：162
4 Wu Gx,Li Fg,Li Px,et al.Detection of activated platelets using activation-dependent monoclonal antibody(SZ-51)in clinical disorders.Nouv Rev Fr Hematol,1992,2:91
5 Bloom AL.The biosynthesis of factor VⅢ.Clinic Hemotol,1979,8:53
6 Eller Th,Brauer P,Albert J,et al.Significance and quantitive analysis of von willebrand factor in human plalelts.Thromb Res,1992,65:631
7 杨金升，郭 平.内皮细胞与脑血管疾病.国外医学脑血管病分册，1993，1(2)：69
8 王永华，曾庆杏，黄兴汉.脑梗死病人脑脊液及血浆vWF含量的研究.卒中与神经疾病，1996，3(2)：85
9 史玉泉，周孝达主编.实用神经病学.上海：上海科学技术出版社，1994.292
1999-03-12收稿，任义芳编辑, 百拇医药