长白山林区肾综合征出血热疫源地调查
作者:蔡增林 刘江秋 范永星 赵占林 解志刚 李忠义
单位:沈阳军区军事医学研究所
关键词:
中国人兽共患病杂志990440 为观察了解东北地区长白山林区肾综合征出血热疫源地动态变化情况,对疫源地长红林场17年间先后进行了三次(1982、1983、1998)流行病学调查,现将结果报告如下。
1 疫源地自然情况
疫区位于吉林省和龙市西部82km2处的长红林场,属长白山脉,平均海拔800m。植被是以阔叶树为主的针阔混交林,主要树种为白桦、黑桦、杨、椴、榆、落叶松、红松等。
2 调查方法
2.1 捕鼠及标本采集 在疫源地约10km2范围内用鼠笼、鼠夹捕鼠。无菌解剖取肺以备检测抗原及分离病毒,取鼠血分离血清以备检测抗体。
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2.2 抗原、抗体检测 采用免疫荧光法检测鼠、人血清中IgG抗体,1∶20判为阳性;同时检测鼠肺中病毒抗原,++判为阳性。
2.3 病毒分离 用A-549细胞、Vero-E6细胞和2日龄乳小鼠分离病毒,常规进行病毒鉴定。
2.4 疫情调查 查阅当地疫情报告,并深入现场询问调查,可疑病人用免疫荧光法检测血清IgM及IgG抗体。
3 结果
3.1 鼠种组成 1982年出血热暴发时共捕505个夹夜,捕鼠106只,捕获率为20.98%;1983年布笼22,432个笼夜,捕鼠644只,捕鼠率为2.96%;1998年布笼11,200个笼夜,捕鼠140只,捕鼠率为1.25%。鼠密度1998年较1983年明显降低(x2=93.50,P<0.01)。3年共捕鼠910只,分类为4科6属8种,以大林姬鼠为优势种,占捕鼠总数的47.1%。各年鼠种比重变化不大,唯黑线姬鼠由1983年的0.2%,升至1998年的12.1%(表1)。
, 百拇医药
表1 三个年头鼠种组成比较
1982
1983
1998
计
只
%
只
%
只
%
只
%
, http://www.100md.com 大林姬鼠
58
54.7
319
48.0
52
37.1
429
47.1
棕背鼠 平
23
21.7
226
, 百拇医药
34.0
51
36.4
300
33.0
红背鼠 平
5
4.7
33
5.0
7
5.0
45
, 百拇医药
4.9
花鼠
8
7.6
74
11.1
6
4.3
88
9.7
黑线姬鼠
3
2.8
, http://www.100md.com 1
0.2
17
12.1
21
2.3
东方田鼠
7
6.6
3
0.5
6
4.3
16
, http://www.100md.com
1.8
褐家鼠
1
0.9
6
0.9
1
0.7
8
0.9
高山鼠兔
1
0.9
2
, http://www.100md.com
0.3
0
0
3
0.3
合计
106
100.0
664
100.0
140
99.9
901
, http://www.100md.com
100.0
3.2 抗原、抗体检测
3.2.1鼠肺抗原 3年共检906只鼠肺标本,结果33份阳性,阳性率为3.6%。所调查的三个年头,除出血热暴发的当年(1982)阳性率较高(13.7%)外,1983、1998年阳性率分别为2.1%、3.6%,而阳性鼠种为大林姬鼠、棕背鼠 平及红背鼠 平(表2)。检出出性时间为4月下旬至6月上旬。表2 三个年头3种鼠肺抗原检查结果
1982
1983
1998
阳/检
%
阳/检
, http://www.100md.com
%
阳/检
%
大林姬鼠
12/57
21.1
4/319
1.3
2/52
3.8
棕背鼠 平
2/16
12.5
, 百拇医药
8/226
3.5
3/51
5.9
红背鼠 平
-
-
2/33
6.1
-
-
3.2.2 鼠血清抗体 对550份鼠血清进行了IgG抗体检查,阳性44份,阳性率为8.0%。阳性鼠种有大林姬鼠、棕背鼠和东方田鼠,阳性率分别为10.0%、6.0%和33.3%(表3)。表3 550份鼠血清抗体检查结果 鼠 种
, 百拇医药
检查数
阳性数
阳性率%
大林姬鼠
320
32
10.0
棕背鼠 平
200
12
6.0
红背鼠 平
25
, http://www.100md.com
0
0
东方田鼠
3
1
33.3
黑线姬鼠
1
0
0
鼠兔
1
0
0
, 百拇医药
合计
550
44
8.0
3.2.3 人血清抗体 共检人血清584份,其中有既往史者6份,5份阳性,阳性率83.3%;健康人血清578份,13份阳性,阳性率为2.2%,其中年龄最小者3岁,最大68岁。以青壮年龄组阳性率较高,为14.3%;阳性率男性2.7%,女性1.9%;山区林场阳性率为2.9%,市区为0.6%。
3.3 病毒分离 从大林姬鼠、耶氏厉螨、病人血清分离出5株汉坦病毒(HV)。并建立了林姬鼠病毒单克隆抗体杂交病细胞系,制备出F7、G9、D11三种单克隆抗体。用7株单抗检测了12株病毒,结果表明林姬鼠(A54、G83-7、H8205、H8235、H8278)与黑线姬鼠(76-118、A96、A1、A5、A9)病毒抗原决定簇有明显不同(表4)。用基因探针检测也有明显不同。
, 百拇医药
3.4 疫情 据调查,长红林场地区1982年5~6月在外来修路人员中发生106例病人;1983年又发生1例;1994年发生2例。当地林场工人及家属尚未见病例报告。表4 7株McAb对12株HV的免疫荧光反应 地 区
毒株
McAb
免疫血
清对照
4E7
5H3
F7
G9
D11
4B9
, 百拇医药
4E8
南朝鲜
76-118
+++
+++
+++
+++
-
+++
+++
+++
安 微
A96
, http://www.100md.com
+++
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-
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江 苏
A1
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+++
, 百拇医药 +++
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A5
+++
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-
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, 百拇医药
A9
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河 南
R22
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-………
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山 西
Rn15
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-………
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黑龙江
H8205
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, 百拇医药 +++
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吉 林
A54
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-
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H8235
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H8278
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G83-7……
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, 百拇医药 -
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+++:阳性反应 -:阴性反应 …:未做
4 讨论
4.1 疫源地相对稳定 17年间三次调查[1,2,3]生境变化不大,仅成材的松、杨树因采伐有所减少。动物鼠类组成变化不大。鼠类特异性病毒抗原、抗体检测三次调查均阳性。当地居民血清抗体检测阳性,且1982、1983、1994三个年头均有外来人员发病,证明疫源地一旦形成即相对稳定。
4.2 黑线姬鼠比重增大原因分析 随着年代的增加,入住疫区人员增多,当地居民陆续开垦了一些农田、菜地。致使当地黑线姬鼠有所增加,调查其占有比重由1983年的0.2%上升至1998年的12.1%,可能与农田开发有关。
4.3 鼠密度下降可能与林区大面积灭鼠有关 据调查,疫源地鼠密度由1983年的2.96%下降至1998年的1.25%,密度下降显著。当地居民也反映老鼠明显减少。经查可能与1994、1995、1996连续三年大面积用毒鼠迷、毒鼠磷灭鼠有关。
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4.4 大林姬鼠与黑线姬鼠为传染源所引起的出血热有明显不同 目前我国HV有Ⅰ型(黑线姬鼠)和Ⅱ型(褐家鼠),一些专家认为我国出血热型别可能不仅上述两型。经对东北大林姬鼠和黑线姬鼠疫区的初步比较研究[4,5]结果表明从流行病学、病原学及临床上两者均有明显不同(表5)。因此提示大林姬鼠、棕背鼠 平为传染源的肾综合征出血热能否列为一型值得商榷。当然今后对病原学方面的研究还需应用分子生物学技术进行基因分型,以及进行PCR、核苷酸序列分析等。
表5 两种传染源出血热比较 传染源
大林姬鼠
黑线姬鼠
发病月份
春峰,5~7月份,6月最多
秋冬峰,10~次年1月
, 百拇医药
临床表现
病性较轻,轻、中型占90.5%
病情较重,重型、危重型占75.1%
病死率
未见死亡
8.0%左右
疫区地理景观
白桦为主的针阔混交林或疏林干草原
水稻农田区和湿草地
病毒单抗染色
D11
+++
, 百拇医药
-
4B9
-
+++
4E8
-
+++
参考文献
1.魏仰华,王凤臣,何亦祥,等.大林姬鼠棕背鼠 平引起流行性出血热暴发流行调查报告.人民军医,1983,11:26.
2.何亦祥,李忠义,刘江秋,等.大林姬鼠体内流行性出血热病毒的分离与鉴定.微生物学杂志,1985,5(1):1.
3.任丽源,蔡增林,叶丹,等.长白山区鼠类自然携带流行性出血热病毒抗原的消长调查.人民军医,1985,5:14.
4.李忠义,刘江秋,温青莉,等.林姬鼠型EHF病毒McAb杂交瘤细胞系的建立与鉴定.微生物学杂志,1986,6(1):41.
5.蔡增林,李忠义,刘江秋,等.大林姬鼠为传染源的肾综合征出血热特征的研究.中国公共卫生,1997,13(6):333., 百拇医药
单位:沈阳军区军事医学研究所
关键词:
中国人兽共患病杂志990440 为观察了解东北地区长白山林区肾综合征出血热疫源地动态变化情况,对疫源地长红林场17年间先后进行了三次(1982、1983、1998)流行病学调查,现将结果报告如下。
1 疫源地自然情况
疫区位于吉林省和龙市西部82km2处的长红林场,属长白山脉,平均海拔800m。植被是以阔叶树为主的针阔混交林,主要树种为白桦、黑桦、杨、椴、榆、落叶松、红松等。
2 调查方法
2.1 捕鼠及标本采集 在疫源地约10km2范围内用鼠笼、鼠夹捕鼠。无菌解剖取肺以备检测抗原及分离病毒,取鼠血分离血清以备检测抗体。
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2.2 抗原、抗体检测 采用免疫荧光法检测鼠、人血清中IgG抗体,1∶20判为阳性;同时检测鼠肺中病毒抗原,++判为阳性。
2.3 病毒分离 用A-549细胞、Vero-E6细胞和2日龄乳小鼠分离病毒,常规进行病毒鉴定。
2.4 疫情调查 查阅当地疫情报告,并深入现场询问调查,可疑病人用免疫荧光法检测血清IgM及IgG抗体。
3 结果
3.1 鼠种组成 1982年出血热暴发时共捕505个夹夜,捕鼠106只,捕获率为20.98%;1983年布笼22,432个笼夜,捕鼠644只,捕鼠率为2.96%;1998年布笼11,200个笼夜,捕鼠140只,捕鼠率为1.25%。鼠密度1998年较1983年明显降低(x2=93.50,P<0.01)。3年共捕鼠910只,分类为4科6属8种,以大林姬鼠为优势种,占捕鼠总数的47.1%。各年鼠种比重变化不大,唯黑线姬鼠由1983年的0.2%,升至1998年的12.1%(表1)。
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表1 三个年头鼠种组成比较
1982
1983
1998
计
只
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只
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只
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, http://www.100md.com 大林姬鼠
58
54.7
319
48.0
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棕背鼠 平
23
21.7
226
, 百拇医药
34.0
51
36.4
300
33.0
红背鼠 平
5
4.7
33
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5.0
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4.9
花鼠
8
7.6
74
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黑线姬鼠
3
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21
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东方田鼠
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褐家鼠
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0.9
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高山鼠兔
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合计
106
100.0
664
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3.2 抗原、抗体检测
3.2.1鼠肺抗原 3年共检906只鼠肺标本,结果33份阳性,阳性率为3.6%。所调查的三个年头,除出血热暴发的当年(1982)阳性率较高(13.7%)外,1983、1998年阳性率分别为2.1%、3.6%,而阳性鼠种为大林姬鼠、棕背鼠 平及红背鼠 平(表2)。检出出性时间为4月下旬至6月上旬。表2 三个年头3种鼠肺抗原检查结果
1982
1983
1998
阳/检
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阳/检
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12/57
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棕背鼠 平
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红背鼠 平
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3.2.2 鼠血清抗体 对550份鼠血清进行了IgG抗体检查,阳性44份,阳性率为8.0%。阳性鼠种有大林姬鼠、棕背鼠和东方田鼠,阳性率分别为10.0%、6.0%和33.3%(表3)。表3 550份鼠血清抗体检查结果 鼠 种
, 百拇医药
检查数
阳性数
阳性率%
大林姬鼠
320
32
10.0
棕背鼠 平
200
12
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红背鼠 平
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黑线姬鼠
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合计
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3.2.3 人血清抗体 共检人血清584份,其中有既往史者6份,5份阳性,阳性率83.3%;健康人血清578份,13份阳性,阳性率为2.2%,其中年龄最小者3岁,最大68岁。以青壮年龄组阳性率较高,为14.3%;阳性率男性2.7%,女性1.9%;山区林场阳性率为2.9%,市区为0.6%。
3.3 病毒分离 从大林姬鼠、耶氏厉螨、病人血清分离出5株汉坦病毒(HV)。并建立了林姬鼠病毒单克隆抗体杂交病细胞系,制备出F7、G9、D11三种单克隆抗体。用7株单抗检测了12株病毒,结果表明林姬鼠(A54、G83-7、H8205、H8235、H8278)与黑线姬鼠(76-118、A96、A1、A5、A9)病毒抗原决定簇有明显不同(表4)。用基因探针检测也有明显不同。
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3.4 疫情 据调查,长红林场地区1982年5~6月在外来修路人员中发生106例病人;1983年又发生1例;1994年发生2例。当地林场工人及家属尚未见病例报告。表4 7株McAb对12株HV的免疫荧光反应 地 区
毒株
McAb
免疫血
清对照
4E7
5H3
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D11
4B9
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4E8
南朝鲜
76-118
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安 微
A96
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+++:阳性反应 -:阴性反应 …:未做
4 讨论
4.1 疫源地相对稳定 17年间三次调查[1,2,3]生境变化不大,仅成材的松、杨树因采伐有所减少。动物鼠类组成变化不大。鼠类特异性病毒抗原、抗体检测三次调查均阳性。当地居民血清抗体检测阳性,且1982、1983、1994三个年头均有外来人员发病,证明疫源地一旦形成即相对稳定。
4.2 黑线姬鼠比重增大原因分析 随着年代的增加,入住疫区人员增多,当地居民陆续开垦了一些农田、菜地。致使当地黑线姬鼠有所增加,调查其占有比重由1983年的0.2%上升至1998年的12.1%,可能与农田开发有关。
4.3 鼠密度下降可能与林区大面积灭鼠有关 据调查,疫源地鼠密度由1983年的2.96%下降至1998年的1.25%,密度下降显著。当地居民也反映老鼠明显减少。经查可能与1994、1995、1996连续三年大面积用毒鼠迷、毒鼠磷灭鼠有关。
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4.4 大林姬鼠与黑线姬鼠为传染源所引起的出血热有明显不同 目前我国HV有Ⅰ型(黑线姬鼠)和Ⅱ型(褐家鼠),一些专家认为我国出血热型别可能不仅上述两型。经对东北大林姬鼠和黑线姬鼠疫区的初步比较研究[4,5]结果表明从流行病学、病原学及临床上两者均有明显不同(表5)。因此提示大林姬鼠、棕背鼠 平为传染源的肾综合征出血热能否列为一型值得商榷。当然今后对病原学方面的研究还需应用分子生物学技术进行基因分型,以及进行PCR、核苷酸序列分析等。
表5 两种传染源出血热比较 传染源
大林姬鼠
黑线姬鼠
发病月份
春峰,5~7月份,6月最多
秋冬峰,10~次年1月
, 百拇医药
临床表现
病性较轻,轻、中型占90.5%
病情较重,重型、危重型占75.1%
病死率
未见死亡
8.0%左右
疫区地理景观
白桦为主的针阔混交林或疏林干草原
水稻农田区和湿草地
病毒单抗染色
D11
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参考文献
1.魏仰华,王凤臣,何亦祥,等.大林姬鼠棕背鼠 平引起流行性出血热暴发流行调查报告.人民军医,1983,11:26.
2.何亦祥,李忠义,刘江秋,等.大林姬鼠体内流行性出血热病毒的分离与鉴定.微生物学杂志,1985,5(1):1.
3.任丽源,蔡增林,叶丹,等.长白山区鼠类自然携带流行性出血热病毒抗原的消长调查.人民军医,1985,5:14.
4.李忠义,刘江秋,温青莉,等.林姬鼠型EHF病毒McAb杂交瘤细胞系的建立与鉴定.微生物学杂志,1986,6(1):41.
5.蔡增林,李忠义,刘江秋,等.大林姬鼠为传染源的肾综合征出血热特征的研究.中国公共卫生,1997,13(6):333., 百拇医药