HPLC法测定头孢氨苄胶囊含量
作者：周静安
单位：衢州 324002 浙江衢州市药品检验所
关键词：高效液相色谱法；头孢氨苄
中国现代应用药学990521摘要 目的：介绍一种用反相高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的方法。方法：以Shim-Pack CLC-ODS(150mm×6m,10μm)为色谱柱，甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长262nm,外标法定量。结果：头孢氨苄浓度线性范围为100～900μg/ml,相关系数r=0.9999,方法回收率为99.9%,RSD为0.72%。结论：方法简便快速，结果准确可靠，可作为头孢氨苄制剂的质量控制方法。
Determination of capsulas cefalexini by HPLC
Zhou Jing′an(Zhou JA)
, 百拇医药
Quzhou Medicine Checking Bureau,Zhejiang 324002
ABSTRACT OBJECTIVE：Introduce a method of determining cefalexini capsulaein by a reversed-phase HPLC method.METHOD:The seperation was performed with an analytical shim-pack CLC-ODS column(150mm×6mm id,10μm).The mobile phase was methanol water(70∶30).The UV detector was set at 262mm.RESULTS:The linear range was from 100～900μg/ml(r=0.9999).The recovery was 99.7%.The relative standard deviation was 0.47%.CONCLUSION:The method was simple,accurate,reliable,and can be used for the quality control of capsulae cefalexini.
, 百拇医药
KEY WORDS cefalexini,HPLC
头孢氨苄(Cephalexin)又称先锋Ⅳ，主要用于耐青霉素的葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等的感染，是临床上常用抗生素之一。目前，其含量测定方法有容量分析法，紫外分光光度法以及荧光光度法。本文采用反相高效液相色谱法，测定头孢氨苄胶囊含量，具有方法简便，结果准确可靠。
1 仪器与试药
日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪;SPD-10A紫外检测器;C-R6A色谱数据处理机;SQC-50超声波清洗器(上海超声波仪器厂)。
甲醇(分析纯)市售，头孢氨苄对照品(中国药品生物制品检定所，化学对照品，批号:0408-9506,含量:91.7%),头孢氨苄胶囊及原料药(浙江巨化集团药厂)。
2 色谱条件
, http://www.100md.com
日本岛津Shim-pack CLC-ODS柱(150mm×6mm,10μm),G-ODS保护柱，流动相：甲醇-水(70∶30),流动速:1.0ml/min,检测波长:262nm,灵敏度:0.1AUFS,纸速:2mm/min,衰减(ATT):2mV,柱温为室温，进样:10μl。
3 实验方法
3.1 线性关系(标准曲线的制备)
精密称取头孢氨苄对照品约50mg,置50ml量瓶中，加流动相适量使溶解，并稀释至刻度，分别吸取1,3,5,7和9ml置10ml量瓶中用流动相稀释至刻度。得头孢氨苄系列标准浓度溶液100～900μg/ml。按上述色谱条件分别取10μl进样作色谱图(图1)，以头孢氨苄浓度(μg/ml)为横坐标，峰面积为纵坐标，进行直线方程回归分析。得方程:A=136.3c-332.9,相关系数r=0.9999。
, 百拇医药 图1 头孢氨苄对照品(a)与头孢氨苄胶囊(b)的色谱图
实验结果表明：头孢氨苄浓度在100～900μg/ml范围内，线性关系良好。
3.2 精密度试验
精密称取头孢氨苄对照品5份，分别用流动相配制成每毫升含头孢氨苄约0.5mg溶液，按含量测定方法，计算相对标准偏差，其日内RSD=0.4%,日间RSD=0.47%,结果表明系统稳定。
3.3 回收率试验
精密称取头孢氨苄对照品适量，浓度按线性范围由高到低每种各5份，按处方比例加入辅料，制成供试液，经0.45μm膜滤过，取续滤液10μl按样品含量测定法。头孢氨苄平均回收率为99.9%,RSD为0.72%。
结果表明头孢氨苄胶囊制剂中所含辅料对含量测定结果无干扰(见表1)。
, 百拇医药
4 样品含量测定
表1 回收率试验 加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
11.26
11.35
, 百拇医药
100.8
20.31
20.09
98.92
26.30
26.41
100.4
99.9
0.72
30.83
30.77
99.8
42.40
, 百拇医药
42.21
99.6
取装量差异检查项后内容物混匀，精密称取细粉适量(约相当于头孢氨苄25mg)置50ml量瓶中，加流动相溶解，并稀释到刻度。另取头孢氨苄对照品适量制成含头孢氨苄0.5mg/ml对照液，按上述色谱条件，测定峰面积，以外标法计算头孢氨苄含量。
本法测定头孢氨苄胶囊含量与中国药典方法结果比较见表2。表2 头孢氨苄胶囊含量测定结果 样品批号
HPLC法/%
中国药典法/%
970402
99.3
100.8
, 百拇医药
970102
99.6
100.1
970601
94.5
93.4
970103
98.6
99.1
970224
99.9
99.6
5 讨 论
本方法测定头孢氨苄胶囊含量、流动相配比简单，不含缓冲盐类物质，对实验后柱的冲洗液较为方便。头孢氨苄制剂中的辅料对测定结果无干扰。本方法灵敏度高，快速而准确，可作为头孢氨苄制剂的含量测定方法。 收稿日期：1998-04-10, http://www.100md.com
单位：衢州 324002 浙江衢州市药品检验所
关键词：高效液相色谱法；头孢氨苄
中国现代应用药学990521摘要 目的：介绍一种用反相高效液相色谱法测定头孢氨苄胶囊的方法。方法：以Shim-Pack CLC-ODS(150mm×6m,10μm)为色谱柱，甲醇-水(70∶30)为流动相，检测波长262nm,外标法定量。结果：头孢氨苄浓度线性范围为100～900μg/ml,相关系数r=0.9999,方法回收率为99.9%,RSD为0.72%。结论：方法简便快速，结果准确可靠，可作为头孢氨苄制剂的质量控制方法。
Determination of capsulas cefalexini by HPLC
Zhou Jing′an(Zhou JA)
, 百拇医药
Quzhou Medicine Checking Bureau,Zhejiang 324002
ABSTRACT OBJECTIVE：Introduce a method of determining cefalexini capsulaein by a reversed-phase HPLC method.METHOD:The seperation was performed with an analytical shim-pack CLC-ODS column(150mm×6mm id,10μm).The mobile phase was methanol water(70∶30).The UV detector was set at 262mm.RESULTS:The linear range was from 100～900μg/ml(r=0.9999).The recovery was 99.7%.The relative standard deviation was 0.47%.CONCLUSION:The method was simple,accurate,reliable,and can be used for the quality control of capsulae cefalexini.
, 百拇医药
KEY WORDS cefalexini,HPLC
头孢氨苄(Cephalexin)又称先锋Ⅳ，主要用于耐青霉素的葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌、大肠杆菌等的感染，是临床上常用抗生素之一。目前，其含量测定方法有容量分析法，紫外分光光度法以及荧光光度法。本文采用反相高效液相色谱法，测定头孢氨苄胶囊含量，具有方法简便，结果准确可靠。
1 仪器与试药
日本岛津LC-10AD高效液相色谱仪;SPD-10A紫外检测器;C-R6A色谱数据处理机;SQC-50超声波清洗器(上海超声波仪器厂)。
甲醇(分析纯)市售，头孢氨苄对照品(中国药品生物制品检定所，化学对照品，批号:0408-9506,含量:91.7%),头孢氨苄胶囊及原料药(浙江巨化集团药厂)。
2 色谱条件
, http://www.100md.com
日本岛津Shim-pack CLC-ODS柱(150mm×6mm,10μm),G-ODS保护柱，流动相：甲醇-水(70∶30),流动速:1.0ml/min,检测波长:262nm,灵敏度:0.1AUFS,纸速:2mm/min,衰减(ATT):2mV,柱温为室温，进样:10μl。
3 实验方法
3.1 线性关系(标准曲线的制备)
精密称取头孢氨苄对照品约50mg,置50ml量瓶中，加流动相适量使溶解，并稀释至刻度，分别吸取1,3,5,7和9ml置10ml量瓶中用流动相稀释至刻度。得头孢氨苄系列标准浓度溶液100～900μg/ml。按上述色谱条件分别取10μl进样作色谱图(图1)，以头孢氨苄浓度(μg/ml)为横坐标，峰面积为纵坐标，进行直线方程回归分析。得方程:A=136.3c-332.9,相关系数r=0.9999。
, 百拇医药 图1 头孢氨苄对照品(a)与头孢氨苄胶囊(b)的色谱图
实验结果表明：头孢氨苄浓度在100～900μg/ml范围内，线性关系良好。
3.2 精密度试验
精密称取头孢氨苄对照品5份，分别用流动相配制成每毫升含头孢氨苄约0.5mg溶液，按含量测定方法，计算相对标准偏差，其日内RSD=0.4%,日间RSD=0.47%,结果表明系统稳定。
3.3 回收率试验
精密称取头孢氨苄对照品适量，浓度按线性范围由高到低每种各5份，按处方比例加入辅料，制成供试液，经0.45μm膜滤过，取续滤液10μl按样品含量测定法。头孢氨苄平均回收率为99.9%,RSD为0.72%。
结果表明头孢氨苄胶囊制剂中所含辅料对含量测定结果无干扰(见表1)。
, 百拇医药
4 样品含量测定
表1 回收率试验 加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
11.26
11.35
, 百拇医药
100.8
20.31
20.09
98.92
26.30
26.41
100.4
99.9
0.72
30.83
30.77
99.8
42.40
, 百拇医药
42.21
99.6
取装量差异检查项后内容物混匀，精密称取细粉适量(约相当于头孢氨苄25mg)置50ml量瓶中，加流动相溶解，并稀释到刻度。另取头孢氨苄对照品适量制成含头孢氨苄0.5mg/ml对照液，按上述色谱条件，测定峰面积，以外标法计算头孢氨苄含量。
本法测定头孢氨苄胶囊含量与中国药典方法结果比较见表2。表2 头孢氨苄胶囊含量测定结果 样品批号
HPLC法/%
中国药典法/%
970402
99.3
100.8
, 百拇医药
970102
99.6
100.1
970601
94.5
93.4
970103
98.6
99.1
970224
99.9
99.6
5 讨 论
本方法测定头孢氨苄胶囊含量、流动相配比简单，不含缓冲盐类物质，对实验后柱的冲洗液较为方便。头孢氨苄制剂中的辅料对测定结果无干扰。本方法灵敏度高，快速而准确，可作为头孢氨苄制剂的含量测定方法。 收稿日期：1998-04-10, http://www.100md.com