179株β-内酰胺酶阳性细菌的体外药敏试验
作者：张险峰 杨仁洪 张联璧
单位：苏州医学院附属一院检验科，苏州，215006
关键词：β-内酰胺酶阳性菌；酶抑制剂；药敏试验
苏州医学院学报990922 摘要 目的：探讨β-内酰胺酶阳性菌的抗药性。方法：从217株临床革兰阴性杆菌和革兰阳性葡萄球菌中测得β-内酰胺酶阳性者179株。采用K-B法测定舒普深、优力新和安美汀对这179株细菌的体外药敏试验，并与头孢哌酮、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素及其他一些抗生素进行比较。结果说明：3种复方制剂对产酶细菌的抗菌作用较相应单药均有不同程度的增效。此外，对产酶革兰阴性杆菌舒普深效果较好，对产酶葡萄球菌优力新效果较好。
中图法分类 R446.5
Antimicrobial Susceptibility Test in Vitro in 179 Strains of Bacteria Producing Beta-Lactamases
, 百拇医药
Zhang Xianfeng,Yang Renhong,Zhang Lianbi
(Department of Clinical Laboratory,The First Hospital Affiliated to Suzhou Medical College，Suzhou,215006)
Abstract One hundred and seventy-nine strains were found to be beta-lactamase positive in 217 strains of gram-negative bacilli and gram-positive staphylococci.Anti-bacterial activity of cefoperazone/sulbactam,ampicillin/sulbactam and amoxicillin/clavulanic acid against these bacteria was compared with that of cefoperazone,ampicillin,amoxicillin and other antibiotics by K-B method.Three components had significantly better activity than beta-lactams solely.On the other hand,antibacterial activity of cefoperazone/sulbactam against gram-negative bacilli producing beta-lactamases was comparatively good in these antibiotics and antibacterial activity of ampicillin/sulbactam against staphlococci producing beta-lactamases was also comparatively good in these antibiotics.
, 百拇医药
Key words beta-lactamase;positive bacteria inhibitor;antimicrobial susceptibility test
β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机理之一[1]。酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素组成的复方制剂是解决该类耐药性的有效措施之一[2～4]。舒普深和优力新分别是头孢哌酮、氨苄青霉素与酶抑制剂舒巴坦的复方制剂，安美汀是羟氨苄青霉素与酶抑制剂克拉维酸的复方制剂。本文分析上述3种复方制剂对179株产酶细菌的体外药敏试验，并与其单药成份及其他抗生素进行比较。
1 材料与方法
1.1 细菌：217株细菌均系本院各种临床标本分离，其中革兰阴性杆菌164株，革兰阳性葡萄球菌53株。
1.2 细菌的β-内酰胺酶测定：采用nitrocefin纸片测定，纸片由大连辉瑞公司提供。
, 百拇医药
1.3 药敏纸片(含量：μg/片)：舒普深(SPZ，75/30)由大连辉瑞公司提供，头孢哌酮(CFP，75)、优力新(UNA，10/10)、氨苄青霉素(AM，10)、安美汀(AUG，20/10)、青霉素(P-G，10)，苯唑青霉素(OX，1)、哌拉西林(PIP，100)、诺氟沙星(NOR，10)、庆大霉素(GM，10)、头孢唑啉(CZ，30)、红霉素(E，15)、去甲万古霉素(NVA，30)均由北京天坛药物生物技术开发公司提供，羟氨苄青霉素(AMPC，20)由本室自制。
1.4 药敏试验：采用K-B法。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿色假单胞菌ATCC27853。药敏结果解释标准参照全国临床检验操作规程(第二版)。
2 结果
2.1 细菌β-内酰胺酶测定结果：164株革兰阴性杆菌中137株产酶(占83.5%)。53株革兰阳性葡萄球菌中42株产酶(占79.2%)。
, 百拇医药
2.2 10种抗生素对137株产酶革兰阴性杆菌的体外药敏试验结果，见表1。
表1 10种抗生素对产酶革兰阴性杆菌的体外药每试验结果 细菌
株数
敏感菌株数
SPZ
CFP
UNA
AM
AUG
AMPC
CZ
GM
, 百拇医药
NOR
PIP
大肠埃希菌
39
36
25
26
0
26
1
20
19
10
9
, 百拇医药
阴沟肠杆菌
17
12
1
1
0
1
0
0
2
6
2
产气肠杆菌
9
, 百拇医药
8
7
8
0
4
0
1
7
6
7
肺炎克雷伯菌
18
16
12
, 百拇医药
14
0
12
0
9
12
12
12
奇异变形杆菌
10
10
9
10
0
, 百拇医药
10
0
4
8
8
8
普通变形杆菌
4
4
3
4
0
4
0
, http://www.100md.com
3
3
3
3
弗劳地枸橼酸杆菌
3
2
1
1
0
0
0
0
1
, 百拇医药
1
1
雷极氏普罗菲登斯菌
2
2
2
2
0
2
0
0
2
1
2
, http://www.100md.com
福氏志贺氏菌
1
1
1
0
0
1
0
1
1
1
1
铜绿色假单胞菌
24
, 百拇医药
22
14
1
0
0
0
0
11
17
11
不动杆菌属
8
6
1
, 百拇医药
5
1
5
1
0
1
1
1
嗜麦芽黄单胞菌
1
1
0
1
0
, http://www.100md.com
1
0
0
1
1
1
洋葱伯克霍尔德菌
1
1
0
1
0
1
0
, 百拇医药
0
1
1
1
合计
137
121
76
74
1
67
2
38
69
, http://www.100md.com
68
59
2.3 14种抗生素对42株产酶葡萄球菌的体外药敏试验结果，见表2。
表2 14种抗生素对产酶葡萄球菌的体外药敏试验结果 细菌
株数
敏感菌株数
SPZ
CFP
UNA
AM
AUG
AMPC
, 百拇医药
P-G
OX
PIP
NOR
GM
CZ
E
NVA
金黄色葡萄球菌
24
2
1
8
0
, 百拇医药
1
0
0
0
0
1
1
1
0
24
溶血葡萄球菌
8
3
1
, 百拇医药
5
0
3
0
0
2
2
0
0
3
0
8
表皮葡萄球菌
10
, http://www.100md.com
4
2
5
0
3
0
0
3
0
1
0
2
1
10
, 百拇医药
合计
42
9
4
18
0
7
0
0
5
2
2
1
6
, http://www.100md.com
1
42
3 讨论
β-内酰胺酶耐药基因在细菌中有传播现象[5]，因此临床β-内酰胺酶阳性的病原菌所占比重会越来越高，由此引起的细菌耐药性在临床治疗中越来越成为严重问题。本实验结果显示与有文献[6]报告的革兰阴性杆菌产酶率基本一致，而葡萄球菌产酶率有明显提高。可见，β-内酰胺酶的测定对了解细菌耐药性及流行病学调查都有重要意义。
克拉维酸和舒巴坦与多种β-内酰胺类抗生素联用对产酶菌株有协同作用[7]。本实验结果表明：①3种复方制剂对产酶革兰阴性杆菌较相应单药有显著增效，但优力新和安美汀对阴沟肠杆菌和铜绿色假单胞菌效果较差，可能与这两种细菌产生染色体介导的Ⅰ型酶有关，因为克拉维酸和舒巴坦对此类酶抑制作用很弱[6]。此外3种复方制剂与头孢唑啉、庆大霉素、诺氟沙星和派拉西林相比，舒普深效果较好。②3种复方制剂对产酶葡萄球菌较相应单药也有不同程度的增效，而且与青霉素、苯唑青霉素、哌拉西林、诺氟沙星、庆大霉素、头孢唑啉和红霉素相比，优力新效果较好，但不及万古霉素，我们K-B法药敏试验中未发现万古霉素中介或耐药的葡萄球菌。
, 百拇医药
细菌的耐药性与所产β-内酰胺酶类型及产酶量亦有关[8]。本实验中大部分变形杆菌对头孢哌酮和舒普深均敏感，而对氨苄青霉素、羟氨苄青霉素耐药，优力新、安美汀则敏感，可能因细菌仅产青霉素酶而无头孢菌素酶之故。此外有些细菌因产酶量较少，对未加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素仍敏感。
本文结果表明，复方制剂用于临床治疗细菌性感染可能有良好效果。随着细菌产酶率的提高，β-内酰胺类抗生素与酶抑制剂复方制剂的开发和使用在临床上将发挥重要作用。
参考文献
1 普维华，等.临床常见病原菌对β-内酰胺类抗生素耐药性的实验研究.中国抗生素杂志，1994，19(6)∶347
2 Fass RJ.Inconsistency of Synergy between the beta-lactamases inhibitor CP-45898 and β-lactam antibiotics against multiply drug resistantent Enterobacteraceae and Pseudomonas species.Antimicrob Agents Chemother,1981，19∶361
, 百拇医药
3 Wise R.Beta-lactamase inhibitors.J Antimicrob Chem-
other,1982，9(Suppl B)∶31
4 Wiedemann B,et al.The epidemiology of β-lactamases.J Antimicrob Chemother,1989，24(Suppl B)∶1
5 邢汪兴综述.β-内酰胺酶的基本特性及检验方法.国外医药抗生素分册，1995，16(6)∶409
6 朱德妹，等.β-内酰胺类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的体外抗菌作用.中国抗生素杂志，1996，21(3)∶198
7 林文良.β-内酰胺酶抑制剂研究现状.中国抗生素杂志，1990，15(5)∶386
8 徐晨，等.β-内酰胺酶和酶抑制剂.中国抗生素杂志，1990，15(2)∶113
(1999年5月9日收稿), 百拇医药
单位：苏州医学院附属一院检验科，苏州，215006
关键词：β-内酰胺酶阳性菌；酶抑制剂；药敏试验
苏州医学院学报990922 摘要 目的：探讨β-内酰胺酶阳性菌的抗药性。方法：从217株临床革兰阴性杆菌和革兰阳性葡萄球菌中测得β-内酰胺酶阳性者179株。采用K-B法测定舒普深、优力新和安美汀对这179株细菌的体外药敏试验，并与头孢哌酮、氨苄青霉素、羟氨苄青霉素及其他一些抗生素进行比较。结果说明：3种复方制剂对产酶细菌的抗菌作用较相应单药均有不同程度的增效。此外，对产酶革兰阴性杆菌舒普深效果较好，对产酶葡萄球菌优力新效果较好。
中图法分类 R446.5
Antimicrobial Susceptibility Test in Vitro in 179 Strains of Bacteria Producing Beta-Lactamases
, 百拇医药
Zhang Xianfeng,Yang Renhong,Zhang Lianbi
(Department of Clinical Laboratory,The First Hospital Affiliated to Suzhou Medical College，Suzhou,215006)
Abstract One hundred and seventy-nine strains were found to be beta-lactamase positive in 217 strains of gram-negative bacilli and gram-positive staphylococci.Anti-bacterial activity of cefoperazone/sulbactam,ampicillin/sulbactam and amoxicillin/clavulanic acid against these bacteria was compared with that of cefoperazone,ampicillin,amoxicillin and other antibiotics by K-B method.Three components had significantly better activity than beta-lactams solely.On the other hand,antibacterial activity of cefoperazone/sulbactam against gram-negative bacilli producing beta-lactamases was comparatively good in these antibiotics and antibacterial activity of ampicillin/sulbactam against staphlococci producing beta-lactamases was also comparatively good in these antibiotics.
, 百拇医药
Key words beta-lactamase;positive bacteria inhibitor;antimicrobial susceptibility test
β-内酰胺酶是细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机理之一[1]。酶抑制剂与β-内酰胺类抗生素组成的复方制剂是解决该类耐药性的有效措施之一[2～4]。舒普深和优力新分别是头孢哌酮、氨苄青霉素与酶抑制剂舒巴坦的复方制剂，安美汀是羟氨苄青霉素与酶抑制剂克拉维酸的复方制剂。本文分析上述3种复方制剂对179株产酶细菌的体外药敏试验，并与其单药成份及其他抗生素进行比较。
1 材料与方法
1.1 细菌：217株细菌均系本院各种临床标本分离，其中革兰阴性杆菌164株，革兰阳性葡萄球菌53株。
1.2 细菌的β-内酰胺酶测定：采用nitrocefin纸片测定，纸片由大连辉瑞公司提供。
, 百拇医药
1.3 药敏纸片(含量：μg/片)：舒普深(SPZ，75/30)由大连辉瑞公司提供，头孢哌酮(CFP，75)、优力新(UNA，10/10)、氨苄青霉素(AM，10)、安美汀(AUG，20/10)、青霉素(P-G，10)，苯唑青霉素(OX，1)、哌拉西林(PIP，100)、诺氟沙星(NOR，10)、庆大霉素(GM，10)、头孢唑啉(CZ，30)、红霉素(E，15)、去甲万古霉素(NVA，30)均由北京天坛药物生物技术开发公司提供，羟氨苄青霉素(AMPC，20)由本室自制。
1.4 药敏试验：采用K-B法。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922，金黄色葡萄球菌ATCC25923，铜绿色假单胞菌ATCC27853。药敏结果解释标准参照全国临床检验操作规程(第二版)。
2 结果
2.1 细菌β-内酰胺酶测定结果：164株革兰阴性杆菌中137株产酶(占83.5%)。53株革兰阳性葡萄球菌中42株产酶(占79.2%)。
, 百拇医药
2.2 10种抗生素对137株产酶革兰阴性杆菌的体外药敏试验结果，见表1。
表1 10种抗生素对产酶革兰阴性杆菌的体外药每试验结果 细菌
株数
敏感菌株数
SPZ
CFP
UNA
AM
AUG
AMPC
CZ
GM
, 百拇医药
NOR
PIP
大肠埃希菌
39
36
25
26
0
26
1
20
19
10
9
, 百拇医药
阴沟肠杆菌
17
12
1
1
0
1
0
0
2
6
2
产气肠杆菌
9
, 百拇医药
8
7
8
0
4
0
1
7
6
7
肺炎克雷伯菌
18
16
12
, 百拇医药
14
0
12
0
9
12
12
12
奇异变形杆菌
10
10
9
10
0
, 百拇医药
10
0
4
8
8
8
普通变形杆菌
4
4
3
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0
4
0
, http://www.100md.com
3
3
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3
弗劳地枸橼酸杆菌
3
2
1
1
0
0
0
0
1
, 百拇医药
1
1
雷极氏普罗菲登斯菌
2
2
2
2
0
2
0
0
2
1
2
, http://www.100md.com
福氏志贺氏菌
1
1
1
0
0
1
0
1
1
1
1
铜绿色假单胞菌
24
, 百拇医药
22
14
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0
0
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0
11
17
11
不动杆菌属
8
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, 百拇医药
5
1
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嗜麦芽黄单胞菌
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洋葱伯克霍尔德菌
1
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, 百拇医药
0
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1
1
合计
137
121
76
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1
67
2
38
69
, http://www.100md.com
68
59
2.3 14种抗生素对42株产酶葡萄球菌的体外药敏试验结果，见表2。
表2 14种抗生素对产酶葡萄球菌的体外药敏试验结果 细菌
株数
敏感菌株数
SPZ
CFP
UNA
AM
AUG
AMPC
, 百拇医药
P-G
OX
PIP
NOR
GM
CZ
E
NVA
金黄色葡萄球菌
24
2
1
8
0
, 百拇医药
1
0
0
0
0
1
1
1
0
24
溶血葡萄球菌
8
3
1
, 百拇医药
5
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表皮葡萄球菌
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4
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, 百拇医药
合计
42
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, http://www.100md.com
1
42
3 讨论
β-内酰胺酶耐药基因在细菌中有传播现象[5]，因此临床β-内酰胺酶阳性的病原菌所占比重会越来越高，由此引起的细菌耐药性在临床治疗中越来越成为严重问题。本实验结果显示与有文献[6]报告的革兰阴性杆菌产酶率基本一致，而葡萄球菌产酶率有明显提高。可见，β-内酰胺酶的测定对了解细菌耐药性及流行病学调查都有重要意义。
克拉维酸和舒巴坦与多种β-内酰胺类抗生素联用对产酶菌株有协同作用[7]。本实验结果表明：①3种复方制剂对产酶革兰阴性杆菌较相应单药有显著增效，但优力新和安美汀对阴沟肠杆菌和铜绿色假单胞菌效果较差，可能与这两种细菌产生染色体介导的Ⅰ型酶有关，因为克拉维酸和舒巴坦对此类酶抑制作用很弱[6]。此外3种复方制剂与头孢唑啉、庆大霉素、诺氟沙星和派拉西林相比，舒普深效果较好。②3种复方制剂对产酶葡萄球菌较相应单药也有不同程度的增效，而且与青霉素、苯唑青霉素、哌拉西林、诺氟沙星、庆大霉素、头孢唑啉和红霉素相比，优力新效果较好，但不及万古霉素，我们K-B法药敏试验中未发现万古霉素中介或耐药的葡萄球菌。
, 百拇医药
细菌的耐药性与所产β-内酰胺酶类型及产酶量亦有关[8]。本实验中大部分变形杆菌对头孢哌酮和舒普深均敏感，而对氨苄青霉素、羟氨苄青霉素耐药，优力新、安美汀则敏感，可能因细菌仅产青霉素酶而无头孢菌素酶之故。此外有些细菌因产酶量较少，对未加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素仍敏感。
本文结果表明，复方制剂用于临床治疗细菌性感染可能有良好效果。随着细菌产酶率的提高，β-内酰胺类抗生素与酶抑制剂复方制剂的开发和使用在临床上将发挥重要作用。
参考文献
1 普维华，等.临床常见病原菌对β-内酰胺类抗生素耐药性的实验研究.中国抗生素杂志，1994，19(6)∶347
2 Fass RJ.Inconsistency of Synergy between the beta-lactamases inhibitor CP-45898 and β-lactam antibiotics against multiply drug resistantent Enterobacteraceae and Pseudomonas species.Antimicrob Agents Chemother,1981，19∶361
, 百拇医药
3 Wise R.Beta-lactamase inhibitors.J Antimicrob Chem-
other,1982，9(Suppl B)∶31
4 Wiedemann B,et al.The epidemiology of β-lactamases.J Antimicrob Chemother,1989，24(Suppl B)∶1
5 邢汪兴综述.β-内酰胺酶的基本特性及检验方法.国外医药抗生素分册，1995，16(6)∶409
6 朱德妹，等.β-内酰胺类抗生素与β-内酰胺酶抑制剂复方制剂的体外抗菌作用.中国抗生素杂志，1996，21(3)∶198
7 林文良.β-内酰胺酶抑制剂研究现状.中国抗生素杂志，1990，15(5)∶386
8 徐晨，等.β-内酰胺酶和酶抑制剂.中国抗生素杂志，1990，15(2)∶113
(1999年5月9日收稿), 百拇医药