甲巯咪唑乳膏透皮吸收的体内动力学
作者：赵维娟 杨永革 张梅 许景峰
单位：北京军区总医院 北京 100700
关键词：甲巯咪唑乳膏，透皮吸收，月桂氮酮，高效液相色谱法
中国医院药学杂志991205
摘要 目的:研究甲巯咪唑乳膏经皮给药体内动力学及血清药物含量测定。方法:兔颈前甲状腺局部经皮给药，以高效液相色谱法测定血清中甲巯咪唑浓度，以3P87药动学软件计算药物体内动力学参数。结果:药-时曲线符合一室模型，药物吸收速率常数(Ka)为2.590h-1；消除半衰期(T1/2β)为2.258h；峰浓度(Cmax)为1.480μg.ml-1；达峰时间(Tmax)为0.934h；曲线下积分面积(AUC)为6.230μg.ml-1.h。结论:甲巯咪唑乳膏局部给药有良好的透皮吸收性。
, 百拇医药
关键词 月桂氮酮
Study of pharmacokinetics for percutanous absorption
of thiamazole ointment in rabbits
Zhao Weijuan Yang Yongge Zhang Mei et al
General Hospital of Beijing Military Command,Beijing 100700
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics for percutanous absorption of thiamazole ointment and determine the concentrations in plasma.METHODS：To apply some thiamazole ointment on the part of thyroid gland in rabbit neck and determine the concentration in plasma by HPLC.The parameter on pharmacokinetics was calculated by software 3P87.RESULTS：The pattern of drug releasing was accorded with singal compartment model, and the main parameters of pharmacokinetics were as follows:The Ka was 6.234 h-1;The T1/2 was 2.426 h;The Cmax was 1.615 μg.ml-1;The Tmax was 0.799 h; The AUC was 6.230 μg.h.ml-1.CONCLUSION：The thiamazole ointment will play an important part in prevention as the result of its good percutanous absorption.
, 百拇医药
KEY WORDS thiamazole ointment, percutanous absorption,azone,HPLC
甲巯咪唑(thiamazole)是临床常用的抗甲状腺药，口服给药后，部分病人可出现血粒细胞下降及肝功能异常等严重不良反应。为此，我们将甲巯咪唑加入适量促渗剂月桂氮酮，制成水包油型(O/W)乳膏[1]，颈部经皮给药，采用高效液相色谱法测定兔血清中甲巯咪唑浓度，并计算透皮吸收的体内动力学参数。
1 材料与仪器
1.1 实验材料 5%甲巯咪唑乳膏(本室研制)；甲巯咪唑对照品(中国生物制品检定所)；内标物苯甲酰胺为化学纯；甲醇为色谱纯。
1.2 实验动物 新西兰种白兔，♀♂兼用，体重2.0～2.5kg，购自中国医学科学院动物繁殖场。
, http://www.100md.com
1.3 仪器 204型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；440型紫外检测器；730-型数据处理仪；色谱柱μ-βcndapakCN3.9mm×30cm；液体快速混合器(江西医疗器械厂)；分析天平(北京光学仪器厂)；80-2型离心沉淀器(上海分析仪器厂)。
2 实验方法与结果
2.1 给药方法与样品预处理[1.2]
2.1.1 给药方法及血样采集 取健康兔7只，分别于实验前24h内，用8%硫化钠水溶液颈前部脱毛，脱毛面积为4cm×5cm，准确称取5%甲巯咪唑乳膏0.5g，相当于甲巯咪唑25mg，均匀涂布于脱毛区内，于给药前和给药后0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0h兔耳缘静脉采血3.0ml，离心(3500r.min-1)，分离血清待测。
, 百拇医药
2.1.2 样品的处理[3] 取待测血清1.0ml，加内标液15.0μl，加0.25%正辛醇氯仿溶液5.0ml，用液体快速混合器振荡30s，以3000r.min-1离心2min，分取有机层，于(37±1)℃水浴恒温下氮气吹干，残渣用重蒸馏水60.0μl溶解，快速振荡1min，以离心2min，吸取上清液15.0μl。同上平行操作3次，进行高效液相色谱分析。
2.2 药品溶液的制备 精称干燥至恒重的甲巯咪唑对照品100mg，置500ml容量瓶中，以蒸馏水定容，并制成含不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液。
内标物苯甲酰胺溶液配制 精称干燥至恒重的苯甲酰胺100mg，置250ml容量瓶中，用甲醇定容。
2.3 色谱条件 流动相为甲醇-水(10∶90)，流速1.0ml.min-1，纸速0.5cm.min-1，检测波长为254nm，用峰面积内标法定量。
, 百拇医药
2.4 血浆标准曲线 取具塞试管8支，分别吸取空白兔血清一定量，加入不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液，制成血清浓度为0.1，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.5，3.0μg.ml-1的系列溶液，按上述样品处理方法操作，进样15μl，甲巯咪唑与内标物苯甲酰胺的保留时间分别5.22min和7.53min，见图1。将甲巯咪唑与苯甲酰胺的峰面积比值对甲巯咪唑血清浓度作图，计算回归方程，得：Y=0.00362C-0.528,r=0.9967,(n=8)，甲巯咪唑浓度在0.2～3.0μg.ml-1范围内线性关系良好。最低检测限为0.1μg.ml-1，信噪比为3。
图1 甲巯咪唑血清图谱
a：甲巯咪唑；b：内标苯甲酰胺空白血清图谱；c：兔血清样品图谱
, http://www.100md.com 2.5 方法回收率及精密度 取空白兔血清1.0ml，分别加入已知浓度的甲巯咪唑标准品溶液，制成0.4，1.6，2.0，3.0μg.ml-1的血清样品，按样品预处理项下操作，测定峰面积，分别进行日内差和日间差考察，结果见表1，表2。
表1 兔血清中甲巯咪唑回收率(n=5) 加入量/μg.ml-1
测得量/μg.ml-1
回收率/%
RSD/%
0.4
0.41±0.01
102.8
, http://www.100md.com
3.3
1.6
1.52±0.08
94.6
5.6
2.0
1.97±0.13
98.4
6.6
3.0
3.07±0.15
102.4
4.9
, http://www.100md.com
表2 兔血清中甲巯咪唑的精密度测定(n=5) 浓度/μg.ml-1
日内RSD/%
日间RSD/%
0.4
5.0
7.0
1.6
6.0
7.6
2.0
4.8
6.9
, http://www.100md.com
3.0
5.0
8.8
2.6 数据处理与结果 将时间和测定的平均血清药物浓度(表3)输入微机，以3P87药动学软件采用加权非线性最小二乘法计算，甲巯咪唑乳膏透皮吸收药-时曲线(图2)符合一室动力学模型，其体内动力学参数见表4。表3 不同时间甲巯咪唑兔血清浓度测定值(μg.ml-1) 编号
不同时间/h
0.5
1.0
1.5
2.0
, 百拇医药
3.0
4.0
6.0
8.0
1
0.766
0.909
0.402
0.299
0.273
0.238
0.221
0.188
, http://www.100md.com
2
1.271
0.995
0.751
0.483
0.427
0.407
0.376
0.342
3
0.327
1.211
1.267
, 百拇医药
1.178
0.427
0.368
0.260
0.187
4
2.458
3.131
2.017
1.534
1.053
0.694
0.456
, 百拇医药
0.322
5
2.572
2.632
3.929
1.854
1.006
0.892
0.669
0.419
6
0.436
1.478
, 百拇医药
2.779
2.208
0.864
0.788
0.562
0.230
7
0.577
0.915
1.043
0.715
0.704
0.504
, http://www.100md.com
0.374
0.342
表4 甲巯咪唑乳膏透皮吸收药动学参数(n=7)
Ke
h-1
Ka
h-1
T1/2α
h
T1/2β
h
, 百拇医药
Tmax
h
Cmax
μg.ml-1
AUC
μg.h.ml-1
Cl/F
L.h-1
V/F
L
, 百拇医药 ±s
0.31±0.09
2.6±4.2
0.27±0.08
2.3±0.8
0.9±0.4
1.5±0.9
6.4±2.7
3.9±2.2
12.7±11.0
图2 甲巯咪唑透皮吸收药—时曲线
表4显示，甲巯咪唑乳膏甲状腺局部经皮给药，具有良好的透皮性，其Tmax为0.934h,Cmax为1.480μg.ml-1。
, 百拇医药
3 讨论
甲亢是临床常见的内分泌疾病，临床常用口服甲巯咪唑治疗甲亢。由于该类药物不良反应较大，且疗程较长，服药期间部分患者可出现肝功异常及粒细胞减少等症。将其制成水包油型透皮吸收乳膏，涂于甲状腺局部经皮吸收，可避免肝脏“首过效应”，提高药物疗效，降低药物对肝脏的损伤和对血粒细胞的影响。实验表明，甲巯咪唑经皮给药可达到良好的透皮效果，血中可达到一定的药物浓度。采用局部给药的方法，从理论上讲可使药物更直接到达甲状腺组织，以求减少药物用量，提高药物疗效。实验证实，甲巯咪唑乳膏从甲状腺局部吸收入血液循环的速度很快，达峰时间(Tmax)为45min左右，峰浓度(Cmax)为1.5μg.ml-1，但经皮给药与口服给药在同等剂量下到达甲状腺组织的量是否有显著性差异，有待进一步研究。
甲巯咪唑药物的极性较大，我们在测定过程中采用μ-βchdapakCN柱，不断增加流动相极性使之达到甲醇∶水为10∶90后，甲巯咪唑与杂质峰和内标物苯甲酰胺的保留时间距离相对拉长，达到良好分离和理想的分析时间。
, 百拇医药
参考文献
1 赵维娟，许景峰，刘梅.月桂氮酮促甲巯咪唑透皮吸收作用.中国医院药学杂志，1997，17(11)：502
2 嵇杨，李国秀，祝汇江.应用高效液相色谱法分析血清中甲巯咪唑浓度.药物分析杂志，1990，10(1)：48
3 A.Melander comparative in vitro effects and in vivo kinetics of antithyroid drugs.Eur J Clin Pharmacol,17:295,1980
收稿日期：1999年2月26日, 百拇医药
单位：北京军区总医院 北京 100700
关键词：甲巯咪唑乳膏，透皮吸收，月桂氮酮，高效液相色谱法
中国医院药学杂志991205
摘要 目的:研究甲巯咪唑乳膏经皮给药体内动力学及血清药物含量测定。方法:兔颈前甲状腺局部经皮给药，以高效液相色谱法测定血清中甲巯咪唑浓度，以3P87药动学软件计算药物体内动力学参数。结果:药-时曲线符合一室模型，药物吸收速率常数(Ka)为2.590h-1；消除半衰期(T1/2β)为2.258h；峰浓度(Cmax)为1.480μg.ml-1；达峰时间(Tmax)为0.934h；曲线下积分面积(AUC)为6.230μg.ml-1.h。结论:甲巯咪唑乳膏局部给药有良好的透皮吸收性。
, 百拇医药
关键词 月桂氮酮
Study of pharmacokinetics for percutanous absorption
of thiamazole ointment in rabbits
Zhao Weijuan Yang Yongge Zhang Mei et al
General Hospital of Beijing Military Command,Beijing 100700
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics for percutanous absorption of thiamazole ointment and determine the concentrations in plasma.METHODS：To apply some thiamazole ointment on the part of thyroid gland in rabbit neck and determine the concentration in plasma by HPLC.The parameter on pharmacokinetics was calculated by software 3P87.RESULTS：The pattern of drug releasing was accorded with singal compartment model, and the main parameters of pharmacokinetics were as follows:The Ka was 6.234 h-1;The T1/2 was 2.426 h;The Cmax was 1.615 μg.ml-1;The Tmax was 0.799 h; The AUC was 6.230 μg.h.ml-1.CONCLUSION：The thiamazole ointment will play an important part in prevention as the result of its good percutanous absorption.
, 百拇医药
KEY WORDS thiamazole ointment, percutanous absorption,azone,HPLC
甲巯咪唑(thiamazole)是临床常用的抗甲状腺药，口服给药后，部分病人可出现血粒细胞下降及肝功能异常等严重不良反应。为此，我们将甲巯咪唑加入适量促渗剂月桂氮酮，制成水包油型(O/W)乳膏[1]，颈部经皮给药，采用高效液相色谱法测定兔血清中甲巯咪唑浓度，并计算透皮吸收的体内动力学参数。
1 材料与仪器
1.1 实验材料 5%甲巯咪唑乳膏(本室研制)；甲巯咪唑对照品(中国生物制品检定所)；内标物苯甲酰胺为化学纯；甲醇为色谱纯。
1.2 实验动物 新西兰种白兔，♀♂兼用，体重2.0～2.5kg，购自中国医学科学院动物繁殖场。
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1.3 仪器 204型高效液相色谱仪(美国Waters公司)；440型紫外检测器；730-型数据处理仪；色谱柱μ-βcndapakCN3.9mm×30cm；液体快速混合器(江西医疗器械厂)；分析天平(北京光学仪器厂)；80-2型离心沉淀器(上海分析仪器厂)。
2 实验方法与结果
2.1 给药方法与样品预处理[1.2]
2.1.1 给药方法及血样采集 取健康兔7只，分别于实验前24h内，用8%硫化钠水溶液颈前部脱毛，脱毛面积为4cm×5cm，准确称取5%甲巯咪唑乳膏0.5g，相当于甲巯咪唑25mg，均匀涂布于脱毛区内，于给药前和给药后0.5，1.0，1.5，2.0，3.0，4.0，6.0，8.0h兔耳缘静脉采血3.0ml，离心(3500r.min-1)，分离血清待测。
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2.1.2 样品的处理[3] 取待测血清1.0ml，加内标液15.0μl，加0.25%正辛醇氯仿溶液5.0ml，用液体快速混合器振荡30s，以3000r.min-1离心2min，分取有机层，于(37±1)℃水浴恒温下氮气吹干，残渣用重蒸馏水60.0μl溶解，快速振荡1min，以离心2min，吸取上清液15.0μl。同上平行操作3次，进行高效液相色谱分析。
2.2 药品溶液的制备 精称干燥至恒重的甲巯咪唑对照品100mg，置500ml容量瓶中，以蒸馏水定容，并制成含不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液。
内标物苯甲酰胺溶液配制 精称干燥至恒重的苯甲酰胺100mg，置250ml容量瓶中，用甲醇定容。
2.3 色谱条件 流动相为甲醇-水(10∶90)，流速1.0ml.min-1，纸速0.5cm.min-1，检测波长为254nm，用峰面积内标法定量。
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2.4 血浆标准曲线 取具塞试管8支，分别吸取空白兔血清一定量，加入不同浓度的甲巯咪唑对照品溶液，制成血清浓度为0.1，0.2，0.4，0.8，1.2，1.6，2.0，2.5，3.0μg.ml-1的系列溶液，按上述样品处理方法操作，进样15μl，甲巯咪唑与内标物苯甲酰胺的保留时间分别5.22min和7.53min，见图1。将甲巯咪唑与苯甲酰胺的峰面积比值对甲巯咪唑血清浓度作图，计算回归方程，得：Y=0.00362C-0.528,r=0.9967,(n=8)，甲巯咪唑浓度在0.2～3.0μg.ml-1范围内线性关系良好。最低检测限为0.1μg.ml-1，信噪比为3。
图1 甲巯咪唑血清图谱
a：甲巯咪唑；b：内标苯甲酰胺空白血清图谱；c：兔血清样品图谱
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表1 兔血清中甲巯咪唑回收率(n=5) 加入量/μg.ml-1
测得量/μg.ml-1
回收率/%
RSD/%
0.4
0.41±0.01
102.8
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3.3
1.6
1.52±0.08
94.6
5.6
2.0
1.97±0.13
98.4
6.6
3.0
3.07±0.15
102.4
4.9
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表2 兔血清中甲巯咪唑的精密度测定(n=5) 浓度/μg.ml-1
日内RSD/%
日间RSD/%
0.4
5.0
7.0
1.6
6.0
7.6
2.0
4.8
6.9
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3.0
5.0
8.8
2.6 数据处理与结果 将时间和测定的平均血清药物浓度(表3)输入微机，以3P87药动学软件采用加权非线性最小二乘法计算，甲巯咪唑乳膏透皮吸收药-时曲线(图2)符合一室动力学模型，其体内动力学参数见表4。表3 不同时间甲巯咪唑兔血清浓度测定值(μg.ml-1) 编号
不同时间/h
0.5
1.0
1.5
2.0
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3.0
4.0
6.0
8.0
1
0.766
0.909
0.402
0.299
0.273
0.238
0.221
0.188
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2
1.271
0.995
0.751
0.483
0.427
0.407
0.376
0.342
3
0.327
1.211
1.267
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1.178
0.427
0.368
0.260
0.187
4
2.458
3.131
2.017
1.534
1.053
0.694
0.456
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0.322
5
2.572
2.632
3.929
1.854
1.006
0.892
0.669
0.419
6
0.436
1.478
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2.779
2.208
0.864
0.788
0.562
0.230
7
0.577
0.915
1.043
0.715
0.704
0.504
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0.374
0.342
表4 甲巯咪唑乳膏透皮吸收药动学参数(n=7)
Ke
h-1
Ka
h-1
T1/2α
h
T1/2β
h
, 百拇医药
Tmax
h
Cmax
μg.ml-1
AUC
μg.h.ml-1
Cl/F
L.h-1
V/F
L
, 百拇医药 ±s
0.31±0.09
2.6±4.2
0.27±0.08
2.3±0.8
0.9±0.4
1.5±0.9
6.4±2.7
3.9±2.2
12.7±11.0
图2 甲巯咪唑透皮吸收药—时曲线
表4显示，甲巯咪唑乳膏甲状腺局部经皮给药，具有良好的透皮性，其Tmax为0.934h,Cmax为1.480μg.ml-1。
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3 讨论
甲亢是临床常见的内分泌疾病，临床常用口服甲巯咪唑治疗甲亢。由于该类药物不良反应较大，且疗程较长，服药期间部分患者可出现肝功异常及粒细胞减少等症。将其制成水包油型透皮吸收乳膏，涂于甲状腺局部经皮吸收，可避免肝脏“首过效应”，提高药物疗效，降低药物对肝脏的损伤和对血粒细胞的影响。实验表明，甲巯咪唑经皮给药可达到良好的透皮效果，血中可达到一定的药物浓度。采用局部给药的方法，从理论上讲可使药物更直接到达甲状腺组织，以求减少药物用量，提高药物疗效。实验证实，甲巯咪唑乳膏从甲状腺局部吸收入血液循环的速度很快，达峰时间(Tmax)为45min左右，峰浓度(Cmax)为1.5μg.ml-1，但经皮给药与口服给药在同等剂量下到达甲状腺组织的量是否有显著性差异，有待进一步研究。
甲巯咪唑药物的极性较大，我们在测定过程中采用μ-βchdapakCN柱，不断增加流动相极性使之达到甲醇∶水为10∶90后，甲巯咪唑与杂质峰和内标物苯甲酰胺的保留时间距离相对拉长，达到良好分离和理想的分析时间。
, 百拇医药
参考文献
1 赵维娟，许景峰，刘梅.月桂氮酮促甲巯咪唑透皮吸收作用.中国医院药学杂志，1997，17(11)：502
2 嵇杨，李国秀，祝汇江.应用高效液相色谱法分析血清中甲巯咪唑浓度.药物分析杂志，1990，10(1)：48
3 A.Melander comparative in vitro effects and in vivo kinetics of antithyroid drugs.Eur J Clin Pharmacol,17:295,1980
收稿日期：1999年2月26日, 百拇医药