氟比洛芬口服混悬剂的兔药物动力学及其生物利用度
作者：钟延强 任常顺 孙其荣 高申
单位：(钟延强 孙其荣 高申)中国人民解放军第二军医大学药学院 上海 200433；(任常顺)中国人民解放军第202医院
关键词：氟比洛芬，药物动力学，生物利用度，高效液相色谱法
中国医院药学杂志991201 摘要 目的:研究氟比洛芬口服给药的药物动力学及生物利用度。方法:利用HPLC法测定氟比洛芬的血药浓度，以交叉给药方式分别给予家兔注射剂和口服混悬剂并且对其药物动力学和生物利用度进行研究。结果:氟比洛芬在家兔体内药动学静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，氟比洛芬口服混悬剂的绝对生物利用度为61.9%。结论:在进行氟比洛芬剂型研究时应注重提高其口服制剂的生物利用度。
Study on pharmacokinetics and bioavailability of flurbiprofen suspension in rabbits
, http://www.100md.com
Zhong Yanqing Ren Changshun Sun Qirong et al
Department of Pharmaceutics,School of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai 200433
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics and bioavailabilities of flurbiprofen suspension.METHODS：A reversed phase HPLC was established to determine serum flurbiprofen concentration,the pharmacokinetics and bioavailability of FP were investigated in 6 rabbits.RESULTS：The results showed that the pharmacokinetics of FP conformed to two-compartment open models after injective administration of FP, and the pharmacokinetics of FP conformed to one-compartment open models after oral administration, the bioavailability of the suspension against the injection was 61.9%.CONCLUSION：Improving the bioavailability of FP preparation should be considered.
, 百拇医药
KEY WORDS flurbiprofen, pharmacokinetics, bioavailability, HPLC
氟比洛芬(flurbiprofen,FP)是布洛芬类非甾体抗炎药物(NSAIDs)，于1977年首次在欧洲投放市场，其片剂被获准用于急性或长期类风湿性关节炎与骨关节炎的治疗。口服给药吸收快，达峰时间短，体内生物半衰期约为3～5h，血浆蛋白结合率高，其体内主要代谢途径为水解和甲基化，(20～25)%的原形药物经肾排泄，其体内吸收与代谢过程不受给药剂量的影响[1.2]。为了探求FP口服给药的生物利用度，本实验选取家兔为实验对象，并对其体内药物动力学和FP口服混悬剂的绝对生物利用度进行了研究，以期为氟比洛芬的剂型改革和制剂开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品 Waters高效液相色谱系统(日本Waters公司)；XW-80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂)；氟比洛芬(德国Knoll制药公司，批号971108)；酮基布洛芬(重庆合成制药厂，批号980102)；氟比洛芬注射剂(自制，批号980520)；氟比洛芬混悬剂(自制，5mg.ml-1，10ml/瓶，批号980520)；乙腈、甲醇为色谱纯(上海吴泾化工总厂)；其它试剂均为分析纯。
, 百拇医药
1.2 色谱条件 色谱柱：25cm×0.5cm，内装YWG-C1810μm，保护柱：5cm×0.5cm，内装RP-C1810μm，流动相：乙腈∶pH7.0的磷酸盐缓冲液(30∶70)，流速：1.0ml.min-1，检测波长：254nm，灵敏度：0.02AUFS，内标：酮基布洛芬。在该色谱条件下，酮基布洛芬(内标)和FP(样品)的保留时间分别为6.4min和10.8min(图1)。
图1 氟比洛芬的HPLC色谱图
a.空白兔血浆样品 b.含药兔血浆样品(1.内标，2.FP)
1.3 样品处理 0.2ml兔血浆中加入内标20μl(20μg)，0.1mol.L-1盐酸0.2ml，旋涡混合1min。加环己烷5ml提取，旋涡混合5min，3000r.min-1离心10min。分离有机层，30℃水浴中N2吹干，用流动相200μl溶解，离心，进样10μl测定。
, 百拇医药
1.4 标准曲线的制备 取0.2ml空白兔血浆7份，分别加入FP标准液，使成浓度为0.1，0.3，1，3，10，30，50μg.ml-1。按样品处理方法项下操作，以氟比洛芬浓度对峰面积比值进行线性回归，得回归方程：C=6.4612×A/Ai-0.3874，r=0.9999，线性范围0.1～50μg.ml-1。最低检测浓度为5ng.ml-1。本法高、中、低3种浓度的回收率分别为(99.5±0.8)%，(97.7±1.5)%及(101.4±4.3)%(n=3)，日内和日间RSD分别为2.30%和3.32%。
1.5 家兔实验 健康家兔6只，♀♂不拘，体重(2.04±0.25)kg，随机分为两组，分别给予氟比洛芬口服混悬剂和氟比洛芬静脉注射剂(给药剂量均为5.0mg.kg-1)。服药前两组均禁食12h，正常饮水。于给药后0.08，0.25，0.50，0.75，1，2，4，6，8，12，24h耳缘静脉取血1ml，肝素钠抗凝，离心10min，取血浆0.2ml，冰箱-4℃保存至分析。1周后两组交叉。
, 百拇医药
2 结果
6只家兔分别给予口服混悬剂和氟比洛芬注射剂的血药浓度数据见表1，表2。将血药浓度数据用药动学3P87软件按静脉注射和血管外给药进行模型拟合，并计算药动学参数。FP在家兔体内药动学静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，主要药物动力学参数见表3，表4。氟比洛芬口服混悬剂的绝对生物利用度为61.90%。
表1 单剂量口服氟比洛芬混悬剂后兔体内氟比洛芬的血浆浓度(μg.ml-1) 编号
Time/h
0.08
0.25
0.5
0.75
, http://www.100md.com
1
2
4
6
8
12
A
1.2497
1.7632
2.4168
2.7395
2.6513
1.6475
, http://www.100md.com
1.6966
0.9986
0.9263
0.6435
B
1.0346
2.0116
2.5238
3.1424
2.9904
2.2932
2.1965
1.3885
, http://www.100md.com
0.9275
0.4907
C
0.9644
2.3798
3.0460
3.7945
3.6153
3.1254
2.9617
2.0017
0.9759
0.2876
, 百拇医药
D
1.1547
2.0740
2.7164
3.3695
3.1472
2.4461
2.2917
1.5079
0.9056
0.3908
E
1.1930
, http://www.100md.com
1.7427
2.2749
2.7115
2.6233
1.5521
1.4629
0.9211
0.8686
0.5944
F
0.9412
2.3093
2.7685
, http://www.100md.com
3.7777
3.3844
2.7330
2.4678
1.8709
0.9006
0.2674
±s
1.09±0.13
2.05±0.27
2.62±0.28
3.3±0.5
, 百拇医药
3.1±0.4
3.0±0.6
2.2±0.5
1.4±0.4
0.92±0.04
0.45±0.16
表2 单剂量给予注射剂后兔体内氟比洛芬的血浆浓度(μg.ml-1) 编号
Time/h
0.08
0.25
0.5
, 百拇医药
0.75
1
2
4
6
8
A
50.1832
31.1357
19.8514
14.9015
10.2635
3.3944
, http://www.100md.com
1.2384
0.6214
0.1121
B
46.9356
30.9059
18.7050
13.8000
9.2170
3.3678
1.2164
0.4224
, http://www.100md.com C
48.7155
35.4451
24.4156
16.5587
11.0056
3.0408
0.7094
0.2258
D
37.9101
30.7387
14.9460
, 百拇医药
9.5692
6.0899
2.1945
0.2892
0.1213
E
47.1024
35.3476
23.8455
15.5113
11.0840
4.0085
, http://www.100md.com 0.7375
0.1945
F
41.4388
30.8312
15.9271
9.6360
7.0115
3.2767
0.3278
0.1615
±s
45.4±4.7
, 百拇医药
32.4±2.3
19.6±3.9
13.3±3.0
9.1±2.1
3.2±0.6
0.8±0.4
0.29±0.19
表3 口服剂量组的药动学参数 编号
Ka
h-1
T1/2Ka
, http://www.100md.com
h
K1/2Ke
h
Tmax
h
Cmax
μg.ml-1
AUC
μg.ml-1.h
MRT
h
, 百拇医药
A
7.7713
0.0892
5.6940
0.5433
2.2727
19.9463
4.5543
B
4.1192
0.1683
4.2963
0.8186
, 百拇医药
2.9374
20.7778
4.3252
C
2.1633
0.3204
2.8625
1.1399
4.0859
22.2378
4.0481
D
3.8340
, 百拇医药
0.1808
3.7385
0.8302
3.2101
20.1944
4.1581
E
8.0580
0.0860
5.5047
0.5243
2.1647
, http://www.100md.com 18.3640
4.5185
F
2.5474
0.2721
2.9554
1.0313
3.6873
20.0240
4.0986
±s
4.8±2.6
0.19±0.10
, 百拇医药
4.2±1.2
0.81±0.25
3.1±0.8
20.3±1.3
4.28±0.22
表4 注射剂组的药动学参数 编号
T1/2α
h
T1/2β
h
AUC
μg.ml-1.h-1
, 百拇医药
MRT
h
A
0.4540
2.4666
35.3037
0.9761
B
0.2792
1.3827
35.4970
0.8057
C
, 百拇医药
0.3664
1.2816
37.4173
0.7069
D
0.3433
1.3564
24.3618
0.8669
E
0.3266
0.9845
37.8199
, 百拇医药
0.7827
F
0.3974
1.8215
25.9477
1.0663
±s
0.36±0.06
1.6±0.5
32.7±6.0
0.87±0.13
3 讨论
, 百拇医药 本文参照文献[3.4]，建立的反相高效液相色谱法提取方法简便，检测灵敏度高，在0.1～50μg.ml-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9999)，平均回收率为(99.6±1.8)%，日内和日间RSD分别为2.30%和3.32%。体内含量测定不受代谢产物的干扰，能较好地满足FP不同剂型的体内药物动力学研究。
文献报道[1]，健康志愿者口服FP制剂C-t曲线有双峰现象，且口服溶液剂较口服片剂更易出现双峰现象。本实验口服混悬剂组中A兔C-t曲线出现一双峰现象，产生双峰现象的原因有待于进一步研究。
本实验中两组实验数据经药动学软件拟合，静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，与文献报道[2]一致。FP口服混悬剂的绝对生物利用度较低，为61.90%，提示我们在剂型改革中应从增加FP的溶出速度入手，通过固体分散等技术提高药物在胃肠道的溶出，从而提高固体制剂的生物利用度。对于FP口服制剂的绝对生物利用度研究国内外未见文献报道。
, 百拇医药
参考文献
1 Jennifer DB,Rosemary RB,Grace HE,et al.Absorption of Flurbiprofen in the Fed and Fasted States.Pharmaceutical Research,1992,9(7):901
2 Szpunar GJ,Albert KS,Bole GG,et al.Pharmacokinetics of flurbiprofen in man I area/dose relationships.Biopharmaceutics & Drug Disposition,1987,8(2):273
3 Kaiser DG,Shaw SR and Vangiessen GJ.GLC determination of dl-2-(2-fluoro-4-biphenylyl propionic acid flurbiprofen) in plasma. J Pharm Sci,1974;63(4):567
4 Alber KS,Gillespie WR and Raabe AM,et al.Determination of flurbiprofen in human serum by high performance liquid chromatography with fluorescence detection.J Pharm Sci,1984,73(12):901
收稿日期：1999年1月9日, http://www.100md.com
单位：(钟延强 孙其荣 高申)中国人民解放军第二军医大学药学院 上海 200433；(任常顺)中国人民解放军第202医院
关键词：氟比洛芬，药物动力学，生物利用度，高效液相色谱法
中国医院药学杂志991201 摘要 目的:研究氟比洛芬口服给药的药物动力学及生物利用度。方法:利用HPLC法测定氟比洛芬的血药浓度，以交叉给药方式分别给予家兔注射剂和口服混悬剂并且对其药物动力学和生物利用度进行研究。结果:氟比洛芬在家兔体内药动学静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，氟比洛芬口服混悬剂的绝对生物利用度为61.9%。结论:在进行氟比洛芬剂型研究时应注重提高其口服制剂的生物利用度。
Study on pharmacokinetics and bioavailability of flurbiprofen suspension in rabbits
, http://www.100md.com
Zhong Yanqing Ren Changshun Sun Qirong et al
Department of Pharmaceutics,School of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai 200433
ABSTRACT OBJECTIVE：To study the pharmacokinetics and bioavailabilities of flurbiprofen suspension.METHODS：A reversed phase HPLC was established to determine serum flurbiprofen concentration,the pharmacokinetics and bioavailability of FP were investigated in 6 rabbits.RESULTS：The results showed that the pharmacokinetics of FP conformed to two-compartment open models after injective administration of FP, and the pharmacokinetics of FP conformed to one-compartment open models after oral administration, the bioavailability of the suspension against the injection was 61.9%.CONCLUSION：Improving the bioavailability of FP preparation should be considered.
, 百拇医药
KEY WORDS flurbiprofen, pharmacokinetics, bioavailability, HPLC
氟比洛芬(flurbiprofen,FP)是布洛芬类非甾体抗炎药物(NSAIDs)，于1977年首次在欧洲投放市场，其片剂被获准用于急性或长期类风湿性关节炎与骨关节炎的治疗。口服给药吸收快，达峰时间短，体内生物半衰期约为3～5h，血浆蛋白结合率高，其体内主要代谢途径为水解和甲基化，(20～25)%的原形药物经肾排泄，其体内吸收与代谢过程不受给药剂量的影响[1.2]。为了探求FP口服给药的生物利用度，本实验选取家兔为实验对象，并对其体内药物动力学和FP口服混悬剂的绝对生物利用度进行了研究，以期为氟比洛芬的剂型改革和制剂开发提供依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与药品 Waters高效液相色谱系统(日本Waters公司)；XW-80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂)；氟比洛芬(德国Knoll制药公司，批号971108)；酮基布洛芬(重庆合成制药厂，批号980102)；氟比洛芬注射剂(自制，批号980520)；氟比洛芬混悬剂(自制，5mg.ml-1，10ml/瓶，批号980520)；乙腈、甲醇为色谱纯(上海吴泾化工总厂)；其它试剂均为分析纯。
, 百拇医药
1.2 色谱条件 色谱柱：25cm×0.5cm，内装YWG-C1810μm，保护柱：5cm×0.5cm，内装RP-C1810μm，流动相：乙腈∶pH7.0的磷酸盐缓冲液(30∶70)，流速：1.0ml.min-1，检测波长：254nm，灵敏度：0.02AUFS，内标：酮基布洛芬。在该色谱条件下，酮基布洛芬(内标)和FP(样品)的保留时间分别为6.4min和10.8min(图1)。
图1 氟比洛芬的HPLC色谱图
a.空白兔血浆样品 b.含药兔血浆样品(1.内标，2.FP)
1.3 样品处理 0.2ml兔血浆中加入内标20μl(20μg)，0.1mol.L-1盐酸0.2ml，旋涡混合1min。加环己烷5ml提取，旋涡混合5min，3000r.min-1离心10min。分离有机层，30℃水浴中N2吹干，用流动相200μl溶解，离心，进样10μl测定。
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1.4 标准曲线的制备 取0.2ml空白兔血浆7份，分别加入FP标准液，使成浓度为0.1，0.3，1，3，10，30，50μg.ml-1。按样品处理方法项下操作，以氟比洛芬浓度对峰面积比值进行线性回归，得回归方程：C=6.4612×A/Ai-0.3874，r=0.9999，线性范围0.1～50μg.ml-1。最低检测浓度为5ng.ml-1。本法高、中、低3种浓度的回收率分别为(99.5±0.8)%，(97.7±1.5)%及(101.4±4.3)%(n=3)，日内和日间RSD分别为2.30%和3.32%。
1.5 家兔实验 健康家兔6只，♀♂不拘，体重(2.04±0.25)kg，随机分为两组，分别给予氟比洛芬口服混悬剂和氟比洛芬静脉注射剂(给药剂量均为5.0mg.kg-1)。服药前两组均禁食12h，正常饮水。于给药后0.08，0.25，0.50，0.75，1，2，4，6，8，12，24h耳缘静脉取血1ml，肝素钠抗凝，离心10min，取血浆0.2ml，冰箱-4℃保存至分析。1周后两组交叉。
, 百拇医药
2 结果
6只家兔分别给予口服混悬剂和氟比洛芬注射剂的血药浓度数据见表1，表2。将血药浓度数据用药动学3P87软件按静脉注射和血管外给药进行模型拟合，并计算药动学参数。FP在家兔体内药动学静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，主要药物动力学参数见表3，表4。氟比洛芬口服混悬剂的绝对生物利用度为61.90%。
表1 单剂量口服氟比洛芬混悬剂后兔体内氟比洛芬的血浆浓度(μg.ml-1) 编号
Time/h
0.08
0.25
0.5
0.75
, http://www.100md.com
1
2
4
6
8
12
A
1.2497
1.7632
2.4168
2.7395
2.6513
1.6475
, http://www.100md.com
1.6966
0.9986
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B
1.0346
2.0116
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2.1965
1.3885
, http://www.100md.com
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C
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, 百拇医药
D
1.1547
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E
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, http://www.100md.com
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F
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, http://www.100md.com
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±s
1.09±0.13
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, 百拇医药
3.1±0.4
3.0±0.6
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1.4±0.4
0.92±0.04
0.45±0.16
表2 单剂量给予注射剂后兔体内氟比洛芬的血浆浓度(μg.ml-1) 编号
Time/h
0.08
0.25
0.5
, 百拇医药
0.75
1
2
4
6
8
A
50.1832
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, http://www.100md.com
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F
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13.3±3.0
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0.29±0.19
表3 口服剂量组的药动学参数 编号
Ka
h-1
T1/2Ka
, http://www.100md.com
h
K1/2Ke
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Tmax
h
Cmax
μg.ml-1
AUC
μg.ml-1.h
MRT
h
, 百拇医药
A
7.7713
0.0892
5.6940
0.5433
2.2727
19.9463
4.5543
B
4.1192
0.1683
4.2963
0.8186
, 百拇医药
2.9374
20.7778
4.3252
C
2.1633
0.3204
2.8625
1.1399
4.0859
22.2378
4.0481
D
3.8340
, 百拇医药
0.1808
3.7385
0.8302
3.2101
20.1944
4.1581
E
8.0580
0.0860
5.5047
0.5243
2.1647
, http://www.100md.com 18.3640
4.5185
F
2.5474
0.2721
2.9554
1.0313
3.6873
20.0240
4.0986
±s
4.8±2.6
0.19±0.10
, 百拇医药
4.2±1.2
0.81±0.25
3.1±0.8
20.3±1.3
4.28±0.22
表4 注射剂组的药动学参数 编号
T1/2α
h
T1/2β
h
AUC
μg.ml-1.h-1
, 百拇医药
MRT
h
A
0.4540
2.4666
35.3037
0.9761
B
0.2792
1.3827
35.4970
0.8057
C
, 百拇医药
0.3664
1.2816
37.4173
0.7069
D
0.3433
1.3564
24.3618
0.8669
E
0.3266
0.9845
37.8199
, 百拇医药
0.7827
F
0.3974
1.8215
25.9477
1.0663
±s
0.36±0.06
1.6±0.5
32.7±6.0
0.87±0.13
3 讨论
, 百拇医药 本文参照文献[3.4]，建立的反相高效液相色谱法提取方法简便，检测灵敏度高，在0.1～50μg.ml-1浓度范围内线性关系良好(r=0.9999)，平均回收率为(99.6±1.8)%，日内和日间RSD分别为2.30%和3.32%。体内含量测定不受代谢产物的干扰，能较好地满足FP不同剂型的体内药物动力学研究。
文献报道[1]，健康志愿者口服FP制剂C-t曲线有双峰现象，且口服溶液剂较口服片剂更易出现双峰现象。本实验口服混悬剂组中A兔C-t曲线出现一双峰现象，产生双峰现象的原因有待于进一步研究。
本实验中两组实验数据经药动学软件拟合，静脉注射符合二室开放模型，口服符合一室开放模型，与文献报道[2]一致。FP口服混悬剂的绝对生物利用度较低，为61.90%，提示我们在剂型改革中应从增加FP的溶出速度入手，通过固体分散等技术提高药物在胃肠道的溶出，从而提高固体制剂的生物利用度。对于FP口服制剂的绝对生物利用度研究国内外未见文献报道。
, 百拇医药
参考文献
1 Jennifer DB,Rosemary RB,Grace HE,et al.Absorption of Flurbiprofen in the Fed and Fasted States.Pharmaceutical Research,1992,9(7):901
2 Szpunar GJ,Albert KS,Bole GG,et al.Pharmacokinetics of flurbiprofen in man I area/dose relationships.Biopharmaceutics & Drug Disposition,1987,8(2):273
3 Kaiser DG,Shaw SR and Vangiessen GJ.GLC determination of dl-2-(2-fluoro-4-biphenylyl propionic acid flurbiprofen) in plasma. J Pharm Sci,1974;63(4):567
4 Alber KS,Gillespie WR and Raabe AM,et al.Determination of flurbiprofen in human serum by high performance liquid chromatography with fluorescence detection.J Pharm Sci,1984,73(12):901
收稿日期：1999年1月9日, http://www.100md.com