二色桌片参的化学成分研究
作者：吴萍茹 方金瑞 陈正明 苏文金
单位：吴萍茹 方金瑞 陈正明(福建海洋研究所，厦门，361012)；苏文金(厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室，厦门，361005)
关键词：二色桌片参；化学成分；分析
中国海洋药物000106 I.二色桌片参的化学成分分析
摘 要：对海参动物——二色桌片参[Mensamaria intercedens] (Lampert)的主要化学成分的分析结果表明，这种海参干品蛋白含量高达85.98%，维生素A、E含量也较高，有较高的营养价值。更重要的是这种海参还含有丰富的活性蛋白多糖、多糖和皂甙类物质，是开发海洋药物的丰富资源。
STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS FROM SEA CUCUMBER MENSAMARIA INTERCEDENS I.THE ANALYSIS OF CHEMICAL COMPANENTS FROM SEA CUCUMBER MENSAMARIA INTERCEDENS
, http://www.100md.com
Wu Pingru Fang Jinrui Chen Zhengming Su Wenjin
(Fujian Institute of Oceanology, Xiamen 361012)
ABSTRACT：The main chemical components from Sea cucumber Mensamaria intercedens (Lampert) are detected. The data indicate that it contains fairly rich protein which is about 85.98% in the dry powder. The reducing carbohydrates and free amino acids reach 535.0 mg/L and 6934.0 mg/L respectively in the enzyme digested solution (100 mL contain 5.5g dry powder). So it can be seen that this Sea cucumber has fairly high nutritional value. The important is it also contains fairly active glycoprotein, polysaccharide, as well as saponin which including triterpene-oligoglycoside and steroid-oligoglycoside. So it will be as an important resources for the discovery of new drugs.
, 百拇医药
KEY WORDS：Mensamaria intercedens (Lampert), chemical components, analysis.▲
二色桌片参Mensamaria intercedens (Lampert)]是一种大量繁衍于福建沿海——特别是东山湾和诏安湾的海参纲动物，属海参纲枝手目沙鸡子科桌片参属[1]。因其形体小(体长不足10cm，直径不足3cm)、体壁薄、口感差，一向被视为低值海参而未受重视。继陈正明等[2]考察其酶解液主要营养成分及抗癌作用后，我们系统地对其药用物质进行深入的研究，试图为其开发利用提供理论和试验依据。本文报道二色桌片参的主要化学成分分析研究的结果。
1 材料与方法
1.1 材料与样品制备
1.1.1 材料 鲜二色桌片参，产自诏安湾；干二色桌片参，由鲜海参除去内脏后经加工而成，商品，购自市场。无论鲜品或干品，均经种类鉴定，包括外部形态和体壁内骨片，特别是桌形体(图1)的鉴定。主要外部形态为：体呈纺锤形，稍弯曲；体壁柔软；触手30个；5个步带与5个间步带相间排列，仅步带具管足(成体4～6行)；活体全体为紫黑色，管足红色(干品或浸泡标本褪为白色)。桌形体形态为：底盘不规则圆形或卵圆形，有4个中央孔和4个或更多的周缘小孔；塔部高，由2个立柱和2～4个横梁构成，顶端有2～3个分歧的小齿。
, http://www.100md.com
图1 二色桌片参
a.动物侧面观；b.体壁桌形体；c.触手杆状体
比例尺 a为10mm,b～c为0.07mm
鲜参分为体壁和内脏2个部分，经测定，体壁约占鲜参重量的60%，内脏约占40%。据报道其干品率为3.3%，因此干品即为鲜参体壁的5.5%。干参或体壁均绞碎或磨粉备用。每100ml酶解液相当海参干粉5.5克。
1.1.2 分析样品制备
皂甙样品的制备：海参样品(包括鲜体壁、内脏和干品)加适量乙醇回馏2～3次，合并乙醇提取液，浓缩近干，再加入适量的水，以正丁醇萃取2～3次，合并丁醇提取液，以蒸馏水洗涤2～3次，丁醇液浓缩至干，最后以乙醇定容溶解，得到皂甙样品。
蛋白多糖样品的制备：将提取皂甙后的样品残渣，加适量的水，高压蒸煮2～3次，合并清液，加无水乙醇至乙醇总浓度为80%，静置于冰箱过夜，收集沉淀物，以热水定容溶出则得样品。
, 百拇医药
多糖样品的制备：样品经双酶水解[3]，滤除固体物，清液加乙醇至乙醇总浓度为60%，静置于冰箱过夜，收集沉淀物，以热水定容溶出，用SAVEGE法去蛋白，则得样品。
1.2 分析方法
1.2.1 主要营养成分的测定 按文献[4，5]方法进行。
1.2.2 多糖和蛋白多糖的测定 以葡萄糖为参比，应用改良的苯酚-硫酸法测定[6]。
1.2.3 三萜皂甙的总甙的测定 以Holothurin(Sigma产品)为参比，以香草醛-硫酸法显色，用722型光栅光度计，在波长544nm,以10mm比色池进行测定[7]。
1.2.4 皂甙的薄层层析分离 使用进口的硅胶预铺板Kieselgel 60 F254(Merck厂产品)和进口的纤维素板Eastman Chromogram Sheet (Kodak厂产品)进行。分别用溶剂系统A.氯仿：甲醇：水(65:35:10v/v下相)和溶剂系统B.甲醇：氯仿：乙酸乙酯：水(2：2：4：1下相)展开，以I2气显色。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 二色桌片参干粉及酶解液的主要营养成分，见表1，表2
表1 二色桌片参干粉及其酶解液的一般营养成分
干粉
酶解液
总灰分
总蛋白
碳水化合物
还原糖
游离氨基酸
Trp
无机元素
, http://www.100md.com
K
Na
Mg
Ca
Fe
Zn
Cu
Mn
Pb
Cd
维生素
VA
VE
3.724%
, http://www.100md.com
85.98%
7.4%
/
/
/
mg/kg
/
/
/
/
78.78
3.758
/
, http://www.100md.com /
/
/
/
/
/
35.7g/L
3535.0 mg/L
535.0 mg/L
6934.0mg/L
217.6mg/L
×10-6(mg/kg*)
, 百拇医药
66.0(1200.00)
1000(18181.81)
172.0(3127.27)
185.0(3363.64)
/
1.47(26.73)
0.03(0.55)
/
0.39(7.09)
0.03(0.55)
93.3μg/L
, 百拇医药 3.0mg/L(54.55)
折合在海参干粉中的含量“/”：未检表2 二色桌片参酶解液的氨基酸成分分析* 种类
含量(mg/100ml)
种类
含量(mg/100mL)
天冬氨酸
苏氨酸
丝氨酸
谷氨酸
甘氨酸
胱氨酸
, 百拇医药 缬氨酸
蛋氨酸
异氨酸
33.737
13.550
12.700
57.287
72.253
3.456
11.721
3.404
9.258
亮氨酸
, 百拇医药
酪氨酸
苯丙氨酸
赖氨酸
组氨酸
精氨酸
脯氨酸
丙氨酸
色氨酸
12.772
6.498
6.456
5.845
1.578
, 百拇医药
29.643
17.517
35.116
24.760
*除色氨酸用DAB法人工检测外，其余皆为氨基酸自动分析测试结果
2.2 二色桌片参的不同样品中蛋白多糖的含量mg/100g，见表3
表3 二色桌片参的不同样品中蛋白多糖的含量 (mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
蛋白多糖的含量
, 百拇医药
453.6
163.0
43.0
2.3 二色桌片参的不同样品中多糖的含量(mg/100g)，见表4表4 二色桌片参的不同样品中多糖的含量(mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
多糖的含量
597.0
38.2
1513.0
, http://www.100md.com
2.4 二色桌片参的不同样品中三萜皂甙总甙的含量(mg/100g)，见表5
表5 二色桌片参的不同样品中三萜皂甙总甙的含量(mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
三萜皂甙总甙的含量
4.99
10.40
13.9
2.5 甾体皂甙
2.5.1 利用Liebermann-Burchard反应阳性(初显褐色，再由黄色经红色、紫红色，最后为绿色)，确认二色桌片参鲜品的内脏和体壁的丁醇抽提物中含有甾体皂甙。
, http://www.100md.com
2.5.2 因为已发表的海参中甾体皂甙研究资料甚少，至今也没有适当的标准样品可作为参比，所以尚无法进行定量测定。
2.6 皂甙中单甙的组成情况的分析
无论采用进口的预铺的硅胶薄板或纤维素薄板，或采用溶剂系统A和B进行试验，均证明二色桌片参丁醇提取物里不仅含有Holothurin,而且还含有其他的类似holothurin 的化合物，数量至少有6种以上。使用纤维素预铺板和溶剂系统A进行试验时，还能将Holothurin 的A和B组分清楚地分离开来(图2)。这证明鲜参内脏的丁醇提取物里，同时含有Holothurin A和B。
图2 单甙簿层显迹图
纤维素薄层 溶剂系统A
, 百拇医药
样品：1.海参丁醇提取物
2.Holothurin(A+B)
3 讨论
海参纲动物中的有些海参在我国一向被视为佐膳珍品，以其丰富的营养价值和较高的药学价值而被列为“八珍”之一，对这些海参的研究也进行得较多。然而，像盛产于闽南沿海的二色桌片参，过去一向被视为低值品，研究极少。经我们检测后发现，虽然二色桌片参无机元素含量普遍较低，但其蛋白含量却高达85.98%，维生素A、E含量也较高，水解后，还原糖、游离氨基酸含量也较高(见表1)，这表明这种海参有较高的营养价值，经适当加工，可以开发为珍贵的保健品。
更重要的是除了一般营养成分外，二色桌片参里还存在有活性的蛋白多糖、多糖和多种多样的皂甙。这些活性物质，或者研究得很少，或者至今尚未被研究过，因此亟待进一步研究和开发。
, 百拇医药
从分析的结果来看，二色桌片参鲜品体壁的蛋白多糖和多糖的含量均较高(分别达450mg/100g和600mg/g)而鲜品内脏里三萜皂甙的含量较高(达到10mg/100g)。在干品里，仍保持较高的多糖含量(达到1500mg/100g干品)，可能因为经过了加工，蛋白多糖和皂甙的含量已大幅度降低。
二色桌片参的丁醇粗提物里，不仅含有三萜皂甙，而且含有甾体皂甙。不仅含有已知的海参毒素A和B，而且含有多种未知的新的成分。
把这些活性的多糖、蛋白多糖和单甙逐一分离出来，研究其特性、化学结构和作用机制,将是本文随后报道的内容。■
基金项目：福建省重中之重项目资助
参考文献：
[1]廖玉麟编著.中国动物志棘皮动物门海参纲.北京：科学出版社，1997，173
, 百拇医药
[2]陈正明，陈清西，郑文竹，等.海洋通报，1988，7(1)：34～39
[3]樊绘曾，陈菊娣，林克忠.刺参酸性粘多糖的分离和理化性质。药学学报，1980，15(5)：263
[4]中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所编著，食品营养成分测定法，北京：人民出版社第三版，1990，81～164
[5]于守祥，刘志成主编.营养与食品卫生监督检验方法指南，北京：人民卫生出版社，1990，44～7
[6]董群，郑丽伊，方积年.改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究.中国药学杂志，1996，31(9)：550～553
[7]吴广宣，卫水弟，王春荣.国产红参与高丽参中人参皂甙含量的对比研究.白求恩医科大学学报，1985，2：146
收稿日期：99-09-03, 百拇医药
单位：吴萍茹 方金瑞 陈正明(福建海洋研究所，厦门，361012)；苏文金(厦门大学肿瘤细胞工程国家专业实验室，厦门，361005)
关键词：二色桌片参；化学成分；分析
中国海洋药物000106 I.二色桌片参的化学成分分析
摘 要：对海参动物——二色桌片参[Mensamaria intercedens] (Lampert)的主要化学成分的分析结果表明，这种海参干品蛋白含量高达85.98%，维生素A、E含量也较高，有较高的营养价值。更重要的是这种海参还含有丰富的活性蛋白多糖、多糖和皂甙类物质，是开发海洋药物的丰富资源。
STUDIES ON THE CHEMICAL CONSTITUENTS FROM SEA CUCUMBER MENSAMARIA INTERCEDENS I.THE ANALYSIS OF CHEMICAL COMPANENTS FROM SEA CUCUMBER MENSAMARIA INTERCEDENS
, http://www.100md.com
Wu Pingru Fang Jinrui Chen Zhengming Su Wenjin
(Fujian Institute of Oceanology, Xiamen 361012)
ABSTRACT：The main chemical components from Sea cucumber Mensamaria intercedens (Lampert) are detected. The data indicate that it contains fairly rich protein which is about 85.98% in the dry powder. The reducing carbohydrates and free amino acids reach 535.0 mg/L and 6934.0 mg/L respectively in the enzyme digested solution (100 mL contain 5.5g dry powder). So it can be seen that this Sea cucumber has fairly high nutritional value. The important is it also contains fairly active glycoprotein, polysaccharide, as well as saponin which including triterpene-oligoglycoside and steroid-oligoglycoside. So it will be as an important resources for the discovery of new drugs.
, 百拇医药
KEY WORDS：Mensamaria intercedens (Lampert), chemical components, analysis.▲
二色桌片参Mensamaria intercedens (Lampert)]是一种大量繁衍于福建沿海——特别是东山湾和诏安湾的海参纲动物，属海参纲枝手目沙鸡子科桌片参属[1]。因其形体小(体长不足10cm，直径不足3cm)、体壁薄、口感差，一向被视为低值海参而未受重视。继陈正明等[2]考察其酶解液主要营养成分及抗癌作用后，我们系统地对其药用物质进行深入的研究，试图为其开发利用提供理论和试验依据。本文报道二色桌片参的主要化学成分分析研究的结果。
1 材料与方法
1.1 材料与样品制备
1.1.1 材料 鲜二色桌片参，产自诏安湾；干二色桌片参，由鲜海参除去内脏后经加工而成，商品，购自市场。无论鲜品或干品，均经种类鉴定，包括外部形态和体壁内骨片，特别是桌形体(图1)的鉴定。主要外部形态为：体呈纺锤形，稍弯曲；体壁柔软；触手30个；5个步带与5个间步带相间排列，仅步带具管足(成体4～6行)；活体全体为紫黑色，管足红色(干品或浸泡标本褪为白色)。桌形体形态为：底盘不规则圆形或卵圆形，有4个中央孔和4个或更多的周缘小孔；塔部高，由2个立柱和2～4个横梁构成，顶端有2～3个分歧的小齿。
, http://www.100md.com
图1 二色桌片参
a.动物侧面观；b.体壁桌形体；c.触手杆状体
比例尺 a为10mm,b～c为0.07mm
鲜参分为体壁和内脏2个部分，经测定，体壁约占鲜参重量的60%，内脏约占40%。据报道其干品率为3.3%，因此干品即为鲜参体壁的5.5%。干参或体壁均绞碎或磨粉备用。每100ml酶解液相当海参干粉5.5克。
1.1.2 分析样品制备
皂甙样品的制备：海参样品(包括鲜体壁、内脏和干品)加适量乙醇回馏2～3次，合并乙醇提取液，浓缩近干，再加入适量的水，以正丁醇萃取2～3次，合并丁醇提取液，以蒸馏水洗涤2～3次，丁醇液浓缩至干，最后以乙醇定容溶解，得到皂甙样品。
蛋白多糖样品的制备：将提取皂甙后的样品残渣，加适量的水，高压蒸煮2～3次，合并清液，加无水乙醇至乙醇总浓度为80%，静置于冰箱过夜，收集沉淀物，以热水定容溶出则得样品。
, 百拇医药
多糖样品的制备：样品经双酶水解[3]，滤除固体物，清液加乙醇至乙醇总浓度为60%，静置于冰箱过夜，收集沉淀物，以热水定容溶出，用SAVEGE法去蛋白，则得样品。
1.2 分析方法
1.2.1 主要营养成分的测定 按文献[4，5]方法进行。
1.2.2 多糖和蛋白多糖的测定 以葡萄糖为参比，应用改良的苯酚-硫酸法测定[6]。
1.2.3 三萜皂甙的总甙的测定 以Holothurin(Sigma产品)为参比，以香草醛-硫酸法显色，用722型光栅光度计，在波长544nm,以10mm比色池进行测定[7]。
1.2.4 皂甙的薄层层析分离 使用进口的硅胶预铺板Kieselgel 60 F254(Merck厂产品)和进口的纤维素板Eastman Chromogram Sheet (Kodak厂产品)进行。分别用溶剂系统A.氯仿：甲醇：水(65:35:10v/v下相)和溶剂系统B.甲醇：氯仿：乙酸乙酯：水(2：2：4：1下相)展开，以I2气显色。
, http://www.100md.com
2 结果
2.1 二色桌片参干粉及酶解液的主要营养成分，见表1，表2
表1 二色桌片参干粉及其酶解液的一般营养成分
干粉
酶解液
总灰分
总蛋白
碳水化合物
还原糖
游离氨基酸
Trp
无机元素
, http://www.100md.com
K
Na
Mg
Ca
Fe
Zn
Cu
Mn
Pb
Cd
维生素
VA
VE
3.724%
, http://www.100md.com
85.98%
7.4%
/
/
/
mg/kg
/
/
/
/
78.78
3.758
/
, http://www.100md.com /
/
/
/
/
/
35.7g/L
3535.0 mg/L
535.0 mg/L
6934.0mg/L
217.6mg/L
×10-6(mg/kg*)
, 百拇医药
66.0(1200.00)
1000(18181.81)
172.0(3127.27)
185.0(3363.64)
/
1.47(26.73)
0.03(0.55)
/
0.39(7.09)
0.03(0.55)
93.3μg/L
, 百拇医药 3.0mg/L(54.55)
折合在海参干粉中的含量“/”：未检表2 二色桌片参酶解液的氨基酸成分分析* 种类
含量(mg/100ml)
种类
含量(mg/100mL)
天冬氨酸
苏氨酸
丝氨酸
谷氨酸
甘氨酸
胱氨酸
, 百拇医药 缬氨酸
蛋氨酸
异氨酸
33.737
13.550
12.700
57.287
72.253
3.456
11.721
3.404
9.258
亮氨酸
, 百拇医药
酪氨酸
苯丙氨酸
赖氨酸
组氨酸
精氨酸
脯氨酸
丙氨酸
色氨酸
12.772
6.498
6.456
5.845
1.578
, 百拇医药
29.643
17.517
35.116
24.760
*除色氨酸用DAB法人工检测外，其余皆为氨基酸自动分析测试结果
2.2 二色桌片参的不同样品中蛋白多糖的含量mg/100g，见表3
表3 二色桌片参的不同样品中蛋白多糖的含量 (mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
蛋白多糖的含量
, 百拇医药
453.6
163.0
43.0
2.3 二色桌片参的不同样品中多糖的含量(mg/100g)，见表4表4 二色桌片参的不同样品中多糖的含量(mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
多糖的含量
597.0
38.2
1513.0
, http://www.100md.com
2.4 二色桌片参的不同样品中三萜皂甙总甙的含量(mg/100g)，见表5
表5 二色桌片参的不同样品中三萜皂甙总甙的含量(mg/100g) 样 品
鲜品的体壁
鲜品的内脏
干品
三萜皂甙总甙的含量
4.99
10.40
13.9
2.5 甾体皂甙
2.5.1 利用Liebermann-Burchard反应阳性(初显褐色，再由黄色经红色、紫红色，最后为绿色)，确认二色桌片参鲜品的内脏和体壁的丁醇抽提物中含有甾体皂甙。
, http://www.100md.com
2.5.2 因为已发表的海参中甾体皂甙研究资料甚少，至今也没有适当的标准样品可作为参比，所以尚无法进行定量测定。
2.6 皂甙中单甙的组成情况的分析
无论采用进口的预铺的硅胶薄板或纤维素薄板，或采用溶剂系统A和B进行试验，均证明二色桌片参丁醇提取物里不仅含有Holothurin,而且还含有其他的类似holothurin 的化合物，数量至少有6种以上。使用纤维素预铺板和溶剂系统A进行试验时，还能将Holothurin 的A和B组分清楚地分离开来(图2)。这证明鲜参内脏的丁醇提取物里，同时含有Holothurin A和B。
图2 单甙簿层显迹图
纤维素薄层 溶剂系统A
, 百拇医药
样品：1.海参丁醇提取物
2.Holothurin(A+B)
3 讨论
海参纲动物中的有些海参在我国一向被视为佐膳珍品，以其丰富的营养价值和较高的药学价值而被列为“八珍”之一，对这些海参的研究也进行得较多。然而，像盛产于闽南沿海的二色桌片参，过去一向被视为低值品，研究极少。经我们检测后发现，虽然二色桌片参无机元素含量普遍较低，但其蛋白含量却高达85.98%，维生素A、E含量也较高，水解后，还原糖、游离氨基酸含量也较高(见表1)，这表明这种海参有较高的营养价值，经适当加工，可以开发为珍贵的保健品。
更重要的是除了一般营养成分外，二色桌片参里还存在有活性的蛋白多糖、多糖和多种多样的皂甙。这些活性物质，或者研究得很少，或者至今尚未被研究过，因此亟待进一步研究和开发。
, 百拇医药
从分析的结果来看，二色桌片参鲜品体壁的蛋白多糖和多糖的含量均较高(分别达450mg/100g和600mg/g)而鲜品内脏里三萜皂甙的含量较高(达到10mg/100g)。在干品里，仍保持较高的多糖含量(达到1500mg/100g干品)，可能因为经过了加工，蛋白多糖和皂甙的含量已大幅度降低。
二色桌片参的丁醇粗提物里，不仅含有三萜皂甙，而且含有甾体皂甙。不仅含有已知的海参毒素A和B，而且含有多种未知的新的成分。
把这些活性的多糖、蛋白多糖和单甙逐一分离出来，研究其特性、化学结构和作用机制,将是本文随后报道的内容。■
基金项目：福建省重中之重项目资助
参考文献：
[1]廖玉麟编著.中国动物志棘皮动物门海参纲.北京：科学出版社，1997，173
, 百拇医药
[2]陈正明，陈清西，郑文竹，等.海洋通报，1988，7(1)：34～39
[3]樊绘曾，陈菊娣，林克忠.刺参酸性粘多糖的分离和理化性质。药学学报，1980，15(5)：263
[4]中国预防医学科学院营养与食品卫生研究所编著，食品营养成分测定法，北京：人民出版社第三版，1990，81～164
[5]于守祥，刘志成主编.营养与食品卫生监督检验方法指南，北京：人民卫生出版社，1990，44～7
[6]董群，郑丽伊，方积年.改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究.中国药学杂志，1996，31(9)：550～553
[7]吴广宣，卫水弟，王春荣.国产红参与高丽参中人参皂甙含量的对比研究.白求恩医科大学学报，1985，2：146
收稿日期：99-09-03, 百拇医药