联用两种检测抗结核杆菌抗体的方法诊断结核病
作者：胡天勇 阎伯强 梁庆正
单位：胡天勇(河南省胸科医院，河南郑州 450003)；阎伯强(三门峡市人民医院)；梁庆正(河南省胸科医院，河南郑州 450003)
关键词：结核病；抗结核杆菌抗体；诊断
细胞与分子免疫学杂志000231
中图号：R521 文献标识码：B
文章编号：1007-8738(2000)02-0174-02
目前，通过检测抗结核杆菌的抗体(IgG)诊断结核病时有报道，已商品化的试剂盒也较多。采用的方法包括：EIA、胶体金标记的免疫层析法和胶体金标记的渗滤法等，采用的抗原也各不相同。这些方法单独使用时，其检测的特异性和灵敏度都有些缺点。为了探讨较理想的结核病的辅助诊断方法，我们将包被抗原为结核杆菌外膜蛋白的金标渗滤试剂和包被抗原为PPD的快速ELISA诊断试剂，两种检测抗结核杆菌抗体的方法联 合应用，观察了其对结核病的诊断价值。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 对象 分为两组：①实验组：为127例活动性肺结核患者，男72例，女55例，年龄15～69岁。其中痰涂片检查抗酸杆菌阳性者49例，阴性78例。所有患者均经临床表现、实验室检查、X线或CT胸片检查和临床治疗转归证实而确诊。②对照组：为45例非结核病患者，男24例，女21例，年龄16～72岁。其中包括：原发性肺癌和肺转移癌27例，各种肺炎14例，慢性支气管肺炎
、肺气肿伴肺心病4例。均为各种检查方法检查和临床治疗转 归证实而确诊的患者。
1.2 方法 金标渗滤TB-DOT结核抗体诊断试剂盒，为澳大利亚B＆JLifeSciLab公司的产品，购自上海金桥国际生物技术交流中心。快速ELISA结核抗体诊断试剂，购自四川省绵阳解放军404医院科技开发部。两种方法均按照试剂盒中的产品说明书进行操作。金标渗滤TB-DOT结核抗体诊断试剂盒中的包被抗原为结核菌外膜蛋白，结果以滤膜中央显示红色圆点者为阳性，未显色者为阴性；快速ELISA诊断试剂盒中的包被抗原为PPD，结果以波长为450nm时的吸光度(A)值表示：测定孔A值之比乘以100%，大于或等于100者为阳性，小于100者为阴性。结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)为北京高科技生命科学技术开发公司产品，系人型PPD。试验时，在受试者前臂掌侧用1mL一次性注射器皮内注射0.1mL(含5IUPPD)，72h后查验反应，硬结直径<5mm者为阴性，≥5mm者为阳性，≥20mm者为强阳性，或注射部位出现丘疹、水泡、溃烂、坏死亦为强阳性。本研究对象均为成 人，故以强阳性标准诊断肺结核病。
, 百拇医药
2 结果
2.1 抗结核杆菌抗体的检测 应用TB-DOT和快速ELISA检测及PPD试验，检测了活动性肺结核患者及对照组患者的抗结核杆菌抗体，同时对两组患者进行了PPD皮肤试验，所获结果见表1。
表1 三种方法检测活动性肺结核的结果比较 分组
n
TB-DOT阳性率
ELISA阳性率
PPD试验阳性率
实验组
127
74.0(94/127)b
, http://www.100md.com
70.9(90/129)b
66.9(85/127)a
痰涂片(+)
49
77.6(38/49)b
75.5(37/49)b
73.5(36/49)b
痰涂片(-)
78
71.8(56/78)b
, 百拇医药
67.9(53/78)b
62.8(49/78)a
对照组
45
11.1(5/45)
20.0(9/45)
46.7(21/45)
aP<0.05，bP<0.01 vs 对照组.
由表1可推算出，TB-DOT和ELISA两种方法检测抗结核杆菌抗体及PPD试验对肺结核病诊断的特异性、敏感性和真实性。计算公式分别为：
aP<0.05，bP<0.01 vs 对照组.
, 百拇医药
由表1可推算出，TB-DOT和ELISA两种方法检测抗结核杆菌抗体及PPD试验对肺结核病诊断的特异性、敏感性和真实性。计算公式分别为：
所获结果见表2。由表2可见，对活动性肺结核患者，TB-DOT 法检测抗体的特异性为88.9%，敏感性为74.0%，真实性为77.9%；ELISA法的特异性为80.0%，敏感性为70.9%，真实性为73.3%；PPD皮肤试验的特异性为53.3%，敏感性为66.9%，真实性为63.4%。
表2 三种方法检测活动性肺结核的特异性、敏感性和真实 性比较(%)
, http://www.100md.com
所获结果见表2。由表2可见，对活动性肺结核患者，TB-DOT 法检测抗体的特异性为88.9%，敏感性为74.0%，真实性为77.9%；ELISA法的特异性为80.0%，敏感性为70.9%，真实性为73.3%；PPD皮肤试验的特异性为53.3%，敏感性为66.9%，真实性为63.4%。
表2 三种方法检测活动性肺结核的特异性、敏感性和真实 性比较(%) 组别
TB-DOT
ELISA
PPD试验
特异性
敏感性
真实性
特异性
, 百拇医药
敏感性
真实性
特异性
敏感性
真实性
实验组
88.9
74.0
77.9
80.0
70.9
73.3
53.3
, 百拇医药
66.9
63.4
痰涂片(+)
88.9
77.6
83.0
80.0
75.5
77.7
53.3
73.5
63.8
痰涂片(-)
, http://www.100md.com
88.9
71.8
78.0
80.0
67.9
72.4
53.3
62.8
59.4
2.2 TB-DOT与ELISA联用检测的敏感性 将TB-DOT法与快速ELISA法联合应用与单独应用，检测抗结核杆菌抗体的敏感性做了比较，结果见表3。单独应用与联合应用的阳性率比较，TB-DOT：χ2=2.2908，P>0.05；ELISA：χ2=4.2770，P>0.05。在104名检测结果呈阳性的活动性肺结核患者中，两种法检测方法的结果均为阳性者80例，单用TB-DOT法检测阳性者14例，单用ELISA法检测阳性者10例；而11例对照组中，两法联用检测结果均阳性者3例，单用TB-DOT法检测阳性者2例，单用ELIS A法检测阳性者6例。表3 3种方法检测活动性肺结核阳性率(%)的比较 分组
, 百拇医药
n
TB-DOT+ELISA
TB-DOT
ELISA
实验组
127
81.9(104/127)b
74.0(94/127)b
70.9(90/127)a
对照组
45
, http://www.100md.com 24.4(11/45)
11.1(5/45)
20.0(9/45)
aP<0.05，bP<0.01vs对照组.
3 讨论
PPD试验作为传统方法，已被卫生部生物制品标准化委员会规定为可直接用于临床诊断结核病的方法。与用检测抗结核杆菌抗体诊断结核病的方法相比较，无论是澳大利亚生产的TB-DOT金标渗滤诊断试剂盒，还是国产ELISA法，在特异性、敏感性、真实性方面均优于PPD皮肤试验，且与文献报道相接近〔1-3〕，说明检测抗结核杆菌抗体较PPD试验对结核病的诊断具 有更大的价值。
联合应用两种检测抗结核杆菌抗体的方法结果显示，在对104例抗结核杆菌抗体阳性的活动性肺结核患者中，联合法检测阳性者80例(占76.9%)，单项阳性者24例(占23.1%)，其中TB-DOT单项阳性者14例(占13.5%)，ELISA单项阳性者10例(占19.6%)。对照组亦存在类似情况，说明两种方法存在一定的差异。我们认为，可能与所用包被抗原的不同有关，因此，采取更好的 包被抗原是提高检出敏感性的一个重要环节。
, 百拇医药
作者简介：胡天勇，男，42岁，副主任医师 郑州市纬五路1号，Tel.(0371)5997252
参考文献：
〔1〕 Danial TM. The rapid diagnosis of tuberculosis:laboratory techniques applicable in developing country setting〔J〕.Rev Infect Dis,1989;11(Suppl.):47-48.
〔2〕马屿，高薇薇，赵丰曾，等.快速酶联免疫吸附法检测血清抗阿拉伯甘露糖IgG对肺结核的诊断价值〔J〕.中华结 核与呼吸杂志，1996；19(1)：41-43.
〔3〕秦光祖，汪月华，范四禄，等.快速ELISA检测血清抗PPD-IgG对肺结核的诊断价值〔J〕.中国防痨杂志，1997；19(1):31- 32.
收稿日期：1999-07-12
修回日期：1999-10-08, http://www.100md.com
单位：胡天勇(河南省胸科医院，河南郑州 450003)；阎伯强(三门峡市人民医院)；梁庆正(河南省胸科医院，河南郑州 450003)
关键词：结核病；抗结核杆菌抗体；诊断
细胞与分子免疫学杂志000231
中图号：R521 文献标识码：B
文章编号：1007-8738(2000)02-0174-02
目前，通过检测抗结核杆菌的抗体(IgG)诊断结核病时有报道，已商品化的试剂盒也较多。采用的方法包括：EIA、胶体金标记的免疫层析法和胶体金标记的渗滤法等，采用的抗原也各不相同。这些方法单独使用时，其检测的特异性和灵敏度都有些缺点。为了探讨较理想的结核病的辅助诊断方法，我们将包被抗原为结核杆菌外膜蛋白的金标渗滤试剂和包被抗原为PPD的快速ELISA诊断试剂，两种检测抗结核杆菌抗体的方法联 合应用，观察了其对结核病的诊断价值。
, 百拇医药
1 材料和方法
1.1 对象 分为两组：①实验组：为127例活动性肺结核患者，男72例，女55例，年龄15～69岁。其中痰涂片检查抗酸杆菌阳性者49例，阴性78例。所有患者均经临床表现、实验室检查、X线或CT胸片检查和临床治疗转归证实而确诊。②对照组：为45例非结核病患者，男24例，女21例，年龄16～72岁。其中包括：原发性肺癌和肺转移癌27例，各种肺炎14例，慢性支气管肺炎
、肺气肿伴肺心病4例。均为各种检查方法检查和临床治疗转 归证实而确诊的患者。
1.2 方法 金标渗滤TB-DOT结核抗体诊断试剂盒，为澳大利亚B＆JLifeSciLab公司的产品，购自上海金桥国际生物技术交流中心。快速ELISA结核抗体诊断试剂，购自四川省绵阳解放军404医院科技开发部。两种方法均按照试剂盒中的产品说明书进行操作。金标渗滤TB-DOT结核抗体诊断试剂盒中的包被抗原为结核菌外膜蛋白，结果以滤膜中央显示红色圆点者为阳性，未显色者为阴性；快速ELISA诊断试剂盒中的包被抗原为PPD，结果以波长为450nm时的吸光度(A)值表示：测定孔A值之比乘以100%，大于或等于100者为阳性，小于100者为阴性。结核菌素纯蛋白衍化物(PPD)为北京高科技生命科学技术开发公司产品，系人型PPD。试验时，在受试者前臂掌侧用1mL一次性注射器皮内注射0.1mL(含5IUPPD)，72h后查验反应，硬结直径<5mm者为阴性，≥5mm者为阳性，≥20mm者为强阳性，或注射部位出现丘疹、水泡、溃烂、坏死亦为强阳性。本研究对象均为成 人，故以强阳性标准诊断肺结核病。
, 百拇医药
2 结果
2.1 抗结核杆菌抗体的检测 应用TB-DOT和快速ELISA检测及PPD试验，检测了活动性肺结核患者及对照组患者的抗结核杆菌抗体，同时对两组患者进行了PPD皮肤试验，所获结果见表1。
表1 三种方法检测活动性肺结核的结果比较 分组
n
TB-DOT阳性率
ELISA阳性率
PPD试验阳性率
实验组
127
74.0(94/127)b
, http://www.100md.com
70.9(90/129)b
66.9(85/127)a
痰涂片(+)
49
77.6(38/49)b
75.5(37/49)b
73.5(36/49)b
痰涂片(-)
78
71.8(56/78)b
, 百拇医药
67.9(53/78)b
62.8(49/78)a
对照组
45
11.1(5/45)
20.0(9/45)
46.7(21/45)
aP<0.05，bP<0.01 vs 对照组.
由表1可推算出，TB-DOT和ELISA两种方法检测抗结核杆菌抗体及PPD试验对肺结核病诊断的特异性、敏感性和真实性。计算公式分别为：
aP<0.05，bP<0.01 vs 对照组., 百拇医药
由表1可推算出，TB-DOT和ELISA两种方法检测抗结核杆菌抗体及PPD试验对肺结核病诊断的特异性、敏感性和真实性。计算公式分别为：
所获结果见表2。由表2可见，对活动性肺结核患者，TB-DOT 法检测抗体的特异性为88.9%，敏感性为74.0%，真实性为77.9%；ELISA法的特异性为80.0%，敏感性为70.9%，真实性为73.3%；PPD皮肤试验的特异性为53.3%，敏感性为66.9%，真实性为63.4%。
表2 三种方法检测活动性肺结核的特异性、敏感性和真实 性比较(%)
, http://www.100md.com
所获结果见表2。由表2可见，对活动性肺结核患者，TB-DOT 法检测抗体的特异性为88.9%，敏感性为74.0%，真实性为77.9%；ELISA法的特异性为80.0%，敏感性为70.9%，真实性为73.3%；PPD皮肤试验的特异性为53.3%，敏感性为66.9%，真实性为63.4%。
表2 三种方法检测活动性肺结核的特异性、敏感性和真实 性比较(%) 组别
TB-DOT
ELISA
PPD试验
特异性
敏感性
真实性
特异性
, 百拇医药
敏感性
真实性
特异性
敏感性
真实性
实验组
88.9
74.0
77.9
80.0
70.9
73.3
53.3
, 百拇医药
66.9
63.4
痰涂片(+)
88.9
77.6
83.0
80.0
75.5
77.7
53.3
73.5
63.8
痰涂片(-)
, http://www.100md.com
88.9
71.8
78.0
80.0
67.9
72.4
53.3
62.8
59.4
2.2 TB-DOT与ELISA联用检测的敏感性 将TB-DOT法与快速ELISA法联合应用与单独应用，检测抗结核杆菌抗体的敏感性做了比较，结果见表3。单独应用与联合应用的阳性率比较，TB-DOT：χ2=2.2908，P>0.05；ELISA：χ2=4.2770，P>0.05。在104名检测结果呈阳性的活动性肺结核患者中，两种法检测方法的结果均为阳性者80例，单用TB-DOT法检测阳性者14例，单用ELISA法检测阳性者10例；而11例对照组中，两法联用检测结果均阳性者3例，单用TB-DOT法检测阳性者2例，单用ELIS A法检测阳性者6例。表3 3种方法检测活动性肺结核阳性率(%)的比较 分组
, 百拇医药
n
TB-DOT+ELISA
TB-DOT
ELISA
实验组
127
81.9(104/127)b
74.0(94/127)b
70.9(90/127)a
对照组
45
, http://www.100md.com 24.4(11/45)
11.1(5/45)
20.0(9/45)
aP<0.05，bP<0.01vs对照组.
3 讨论
PPD试验作为传统方法，已被卫生部生物制品标准化委员会规定为可直接用于临床诊断结核病的方法。与用检测抗结核杆菌抗体诊断结核病的方法相比较，无论是澳大利亚生产的TB-DOT金标渗滤诊断试剂盒，还是国产ELISA法，在特异性、敏感性、真实性方面均优于PPD皮肤试验，且与文献报道相接近〔1-3〕，说明检测抗结核杆菌抗体较PPD试验对结核病的诊断具 有更大的价值。
联合应用两种检测抗结核杆菌抗体的方法结果显示，在对104例抗结核杆菌抗体阳性的活动性肺结核患者中，联合法检测阳性者80例(占76.9%)，单项阳性者24例(占23.1%)，其中TB-DOT单项阳性者14例(占13.5%)，ELISA单项阳性者10例(占19.6%)。对照组亦存在类似情况，说明两种方法存在一定的差异。我们认为，可能与所用包被抗原的不同有关，因此，采取更好的 包被抗原是提高检出敏感性的一个重要环节。
, 百拇医药
作者简介：胡天勇，男，42岁，副主任医师 郑州市纬五路1号，Tel.(0371)5997252
参考文献：
〔1〕 Danial TM. The rapid diagnosis of tuberculosis:laboratory techniques applicable in developing country setting〔J〕.Rev Infect Dis,1989;11(Suppl.):47-48.
〔2〕马屿，高薇薇，赵丰曾，等.快速酶联免疫吸附法检测血清抗阿拉伯甘露糖IgG对肺结核的诊断价值〔J〕.中华结 核与呼吸杂志，1996；19(1)：41-43.
〔3〕秦光祖，汪月华，范四禄，等.快速ELISA检测血清抗PPD-IgG对肺结核的诊断价值〔J〕.中国防痨杂志，1997；19(1):31- 32.
收稿日期：1999-07-12
修回日期：1999-10-08, http://www.100md.com