大补阴丸的降血糖与免疫调节作用
作者：刘雪莉 陈凯 史红 陈珏 钱伯初
单位：杭州 310013 浙江省医学科 学院药物研究所
关键词：大补阴丸；阴虚；血糖；四氧嘧啶；免疫
中国现代应用药学000306 摘要 目的：观察大补阴丸对血糖和免疫功 能的影响。方法：复制阴虚小鼠模型和四氧嘧啶糖尿病小鼠，测定血糖 和免疫功能。结果：大补阴丸对正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠有降血糖作 用，对阴虚小鼠的血糖降低有保护作用，对正常及阴虚小鼠有免疫调节作用。结 论：大补阴丸有降血糖和调节免疫功能作用。观察大补阴丸对血糖和免疫功 能的影响。方法：复制阴虚小鼠模型和四氧嘧啶糖尿病小鼠，测定血糖 和免疫功能。结果：大补阴丸对正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠有降血糖作 用，对阴虚小鼠的血糖降低有保护作用，对正常及阴虚小鼠有免疫调节作用。结 论：大补阴丸有降血糖和调节免疫功能作用。
Effects of dabuyin wan on blood glucose level and
, http://www.100md.com
immune function in experimental diabetic or Yin
deficiency mice
Liu Xueli
(Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
Chen Kai
(Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
Shi Hong
, 百拇医药 (Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
ABSTRACT OBJECTIVE：To observe the effect of dabuyin wan which is a traditional Chinese medicine composed of plastrum testudinis,radix rehmanniae,rhizoma anemarrhenae,cortex phellodendri etc., on blood glucose levels and immune function.METHODS:The blood glucos e level and immune function were measured in Yin deficiency mice induced by oral administration of reserpine 1mg/kg and thyroxine 150mg/kg for 5 days,and diabet ic mice induced by alloxan 200mg/kg intraperitoneally.RESULTS:Dabuyi n wan lowered blood glucose in normal and diabetic mice.However,the decrease of blood glucose in Yin deficiency mice was prevented by dabuyin wan.The immunologi cal regulation was found by oral administration of dabuyin wan in normal and Yin deficiency mice.CONCLUSION:Dabuyin wan has an actions of lowering b lood glucose and regulating immune function.
, http://www.100md.com
KEY WORDS dabuyin wan,Yin deficiency,blood glucose,alloxan,immune
大补阴丸由黄柏、知母、熟地黄、猪脊髓、龟甲等药组成，源自元《丹 溪心法》，具有滋阴降火功能，用于肝肾阴虚、虚火上亢所致骨蒸潮热、盗汗，或咳嗽咯血 ，或烦热易饥、足膝热痛等病症，近代用于治疗阴虚火旺，阴虚阳亢见症的肺结核咯血，更 年期综合症，糖尿病等症，虽有组方中单味药的抑菌抗炎、增强免疫功能或降血糖等作用的 报告，但该方剂的药理作用少有研究[1]。本文报告大补阴丸对正常及阴虚小鼠的 血糖与免疫功能的调节作用。
1 材料与方法
1.1 动物
ICR系小鼠，雄性，体重18～24g(浙江省实验动物中心)。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
大补阴丸和六味地黄丸(杭州胡庆堂制药厂，批号分别 为980526和97103003,打成细粉供实验用)；甲状腺片(40mg/片，浙江金华生物化学制药厂， 批号:961006);利血平注射液(1mg/ml,上海医科大学红旗制药厂，批号:960312);伴刀豆球蛋 白(COn A,美国Sigma产品，批号:9206202);RPMI-1640培养基(美国Gibco产品，批号:67K14 35);无支原体新生小牛血清与绵羊红细胞(SRBC,杭州四季青生物工程材料研究所)；噻唑蓝( MTT,Thiazoly Blue,美国Sigma产品，批号331097/1-594);邻甲苯胺(上海试剂三厂)，上述 试剂均由市售购得。
1.3 仪器
UV-754型分光光度计(上海第三分析 仪器厂);Ribror AEL-200型电子天平(日本岛津);2300型CO2培养箱(美国Shelden);离心 机(美国Beckman);显微镜(日本Olympus)。
, 百拇医药
1.4 实验方法
1.4.1 小 鼠阴虚模型的制备 按文献[2]方法制作小鼠阴虚动物模型，将甲状腺片研成粉末 加入利血平注射液，用1%CMC-Na配成含甲状腺片7.5mg/ml和利血平0.05mg/ml的混悬液，每 天灌胃0.4ml/20g体重，连续5d。
1.4.2 血糖测定法 按文献[3 ]用邻甲苯胺法测定血糖含量。
1.4.3 小鼠抗SRBC血清溶血素和凝 集素测定 每组小鼠ip 20% SRBC 0.2ml/只，免疫后第4天股动脉取血，按文献方法测定血 清溶血素和凝集素[4]。
1.4.4 小鼠脾淋巴细胞MTT法增殖试 验 小鼠处死后无菌取脾，按文献用MTT法测定淋巴细胞增殖率[5]。
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2 结 果
2.1 对正常小鼠血糖的影响
实验小鼠分4 组：①对照组，喂等体积水；②阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;③与④组为大补阴丸小、大 剂量,4g/kg,8g/kg;每天灌胃1次，连续5d,末次给药前禁食6h,末次给药后1h取血测定血糖含 量。
表1结果表明，大补阴丸对正常小鼠有一定的降血糖作用。
表1 大补阴丸对正常小鼠血糖的影响/±s ,n=10 组 别
剂量/g. kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
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对照
0
6.39±0.78
六味地黄丸
8
5.85±0.50*1
大补阴丸
4
4.94±0.67*2
8
6.49±0.89
注：与对照组比较，*1P<0.05；*2P<0.01
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2.2 对阴虚小鼠血糖的影响
实验小鼠分5组：①对照组及②阴虚模型对 照组，均喂等体积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤组为大补阴丸小、大剂量组4g/kg，8g/kg;每天灌胃1次，连续5d。上午给药试验，下午给造型药，除组①外各组均给造 型药，末次给药前禁食6h,末次药后1h取血测定血糖含量。
表2结果表明，阴虚模型组的血 糖含量较正常对照组显著降低，给予大补阴丸后，对阴虚所致血糖降低有较好的保护作用。
表2大补阴丸对阴虚小鼠血糖的影响/±s ,n=10 组 别
剂量/g. kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
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对照
0
6.11±1.17
阴虚模型
0
2.11±1.11
六味地黄丸
8
4.11±2.00*
大补阴丸
4
3.28±1.55
8
, http://www.100md.com
4.66±2.78*
注：与阴虚模型对照组比较，*P<0.05
2.3 对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖的影响
实验小鼠分5组：①对照 组及②四氧嘧啶模型对照组，均喂等容积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤ 组为大补阴丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg。除组①外，各组均于禁食16h后ip四氧嘧啶2 00mg/kg,72h后取血测血糖，将血糖在10mmol/L以上的小鼠随机分组，每天灌胃给药1次 ，连续5d。末次给药前禁食15h,末次药后1h取血测定血糖含量。
表3结果表明，四氧嘧啶 模型组的血糖含量较正常对照组显著升高，给予大补阴丸后，对四氧嘧啶所致血糖升高有明 显的治疗作用。
2.4 对正常小鼠免疫功能的影响
, 百拇医药
实验小鼠分4组：①对照组，喂等体积 水；②阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;③与④组为大补阴丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg;每 天灌胃1次，连续7d,末次药后24h股动脉取血，同时取脾按前述方法测定各项免疫参数。
表3 大补阴丸对四氧嘧啶所致糖尿病 小鼠高血糖的影响/±s,n=10 组 别
剂量/g.kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
对照
0
5.40±0.74
四氧嘧啶模型
, 百拇医药
0
16.03±2.80
六味地黄丸
8
11.42±3.78*1
大补阴丸
4
12.36±3.71*2
8
11.29±3.56*1
注：与四氧嘧啶模型对照组比较 ，*1P<0.01，*2P<0.05
, http://www.100md.com
表4结果表明，大补阴丸对正常小鼠的体液免疫和细胞免疫均有一定的增强作用。
表4 大补阴丸对正常小鼠免疫功能的影响/±s,n=10 组 别
剂量
/g.kg -1
血清溶血素
/单位
血清凝集素
/抗体积数
脾T细胞增
殖能力/OD
对照
, 百拇医药
0
227±119
114±29
0.72±0.16
六味地黄丸
8
394±114*1
153±2 9*1
1.05±0.17*1
大补阴丸
4
306±134
, 百拇医药
109±19
0 .80±0.13
8
383±127*2
142±21*2
0.92±0.20*2
注：与对照组比较，*1P<0.01,*2P<0. 05
2.5 对阴虚小鼠免疫功能的影响
实验小鼠分5组：① 对照组和②阴虚模型组，喂等体积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤组为大补阴 丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg;②～⑤组为阴虚造型组。上午灌胃给药，下午灌胃给造型药 ，连续7d，末次药后24h股动脉取血，同时取脾按前述方法测定各项免疫参数。
, 百拇医药
表5结果表 明，阴虚小鼠的体液免疫和细胞免疫功能均明显降低，大补阴丸对阴虚小鼠的体液免疫和细 胞免疫功能降低有显著的保护作用。
3 讨 论
表5 大补阴丸对阴虚小鼠免疫功能的影响/±s,n=10 组 别
剂量
/g.kg -1
血清溶血素
/单位
血清凝集素
/抗体积数
脾T细胞增
, 百拇医药
殖能力/OD
对照
0
330±146
152±23
0.66±0.21
阴虚模型组
0
142±24
60±24
0.38±0.03
六味地黄丸
8
, 百拇医药
355±121*1
162±21*1
0. 46±0.04*2
大补阴丸
4
277±103
162±28*1
0.54±0. 15*2
8
271±61
145±18*1
, 百拇医药
0.40±0.02
注：与模型组比较，*1P<0.001；*2P<0.01
大补阴丸为历代中医治疗阴 虚证的要方，糖尿病属中医消渴症，系肺、胃、肾三脏燥热阴虚，水谷输布失常所致，临床 用大补阴丸治疗取得满意疗效[6]。本研究证明大补阴丸对正常小鼠及四氧嘧啶所 致小鼠高血糖有降糖作用，这与文献报道组成大补阴丸的单味药黄柏、知母、熟地均有降低 正常家兔血糖作用的结果相一致[7]。关于实验性阴虚小鼠的血糖变化，文献无一 致结果，本试验发现阴虚小鼠的血糖明显下降，可能系由于用作复制模型的甲状腺激素提高 代谢速率、增加组织氧耗和热能消耗、加速糖代谢、促进糖利用的结果。大补阴丸对这种阴 虚小鼠的血糖下降有保护作用，提示该药对阴虚时的糖代谢紊乱有调整作用，而其对正常动 物的降血糖作用是否系影响胰岛细胞功能尚待探讨。本研究还证明大补阴丸对正常及阴虚小 鼠有免疫调节作用，此与文献证明多数补阴药有调整免疫功能的结果相符[1]。上 述结果为大补阴丸的临床应用提供了若干依据。
, 百拇医药
参考文献
1，陈奇主编.中成药名方药理与临床.第1版.北京：人民卫 生出版社，1998∶560.
2，刘雪莉.百合固金丸对 实验性阴虚小鼠的免疫调节作用.现代应用药学，1995，12(5)∶1.
3，朱忠勇.实用医学检验学.北京：人民军医出版社，1992 ∶425.
4，周金黄主编.药理学进展：抗炎免疫药 理分册.北京：人民卫生出版社，1983∶213.
5，徐叔云，等主编.药理实验方法学.北京：人民卫生出版 社，1991∶1221.
6，姚公树.大补阴丸临床应用经 验.黑龙江中医药，1985，(3)∶22.
7，顾关云.从知母根茎分得降低血糖的活性聚糖Anemarans A、B、C和D.国外医学药学分册，1985，12(6)∶368.
收稿日期：1999-03-29, 百拇医药
单位：杭州 310013 浙江省医学科 学院药物研究所
关键词：大补阴丸；阴虚；血糖；四氧嘧啶；免疫
中国现代应用药学000306 摘要 目的：观察大补阴丸对血糖和免疫功 能的影响。方法：复制阴虚小鼠模型和四氧嘧啶糖尿病小鼠，测定血糖 和免疫功能。结果：大补阴丸对正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠有降血糖作 用，对阴虚小鼠的血糖降低有保护作用，对正常及阴虚小鼠有免疫调节作用。结 论：大补阴丸有降血糖和调节免疫功能作用。观察大补阴丸对血糖和免疫功 能的影响。方法：复制阴虚小鼠模型和四氧嘧啶糖尿病小鼠，测定血糖 和免疫功能。结果：大补阴丸对正常及四氧嘧啶糖尿病小鼠有降血糖作 用，对阴虚小鼠的血糖降低有保护作用，对正常及阴虚小鼠有免疫调节作用。结 论：大补阴丸有降血糖和调节免疫功能作用。
Effects of dabuyin wan on blood glucose level and
, http://www.100md.com
immune function in experimental diabetic or Yin
deficiency mice
Liu Xueli
(Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
Chen Kai
(Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
Shi Hong
, 百拇医药 (Institute of Materia Medica,Zhejiang Academy of Medical Sciences,Hangzhou 310013)
ABSTRACT OBJECTIVE：To observe the effect of dabuyin wan which is a traditional Chinese medicine composed of plastrum testudinis,radix rehmanniae,rhizoma anemarrhenae,cortex phellodendri etc., on blood glucose levels and immune function.METHODS:The blood glucos e level and immune function were measured in Yin deficiency mice induced by oral administration of reserpine 1mg/kg and thyroxine 150mg/kg for 5 days,and diabet ic mice induced by alloxan 200mg/kg intraperitoneally.RESULTS:Dabuyi n wan lowered blood glucose in normal and diabetic mice.However,the decrease of blood glucose in Yin deficiency mice was prevented by dabuyin wan.The immunologi cal regulation was found by oral administration of dabuyin wan in normal and Yin deficiency mice.CONCLUSION:Dabuyin wan has an actions of lowering b lood glucose and regulating immune function.
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KEY WORDS dabuyin wan,Yin deficiency,blood glucose,alloxan,immune
大补阴丸由黄柏、知母、熟地黄、猪脊髓、龟甲等药组成，源自元《丹 溪心法》，具有滋阴降火功能，用于肝肾阴虚、虚火上亢所致骨蒸潮热、盗汗，或咳嗽咯血 ，或烦热易饥、足膝热痛等病症，近代用于治疗阴虚火旺，阴虚阳亢见症的肺结核咯血，更 年期综合症，糖尿病等症，虽有组方中单味药的抑菌抗炎、增强免疫功能或降血糖等作用的 报告，但该方剂的药理作用少有研究[1]。本文报告大补阴丸对正常及阴虚小鼠的 血糖与免疫功能的调节作用。
1 材料与方法
1.1 动物
ICR系小鼠，雄性，体重18～24g(浙江省实验动物中心)。
, 百拇医药
1.2 药品与试剂
大补阴丸和六味地黄丸(杭州胡庆堂制药厂，批号分别 为980526和97103003,打成细粉供实验用)；甲状腺片(40mg/片，浙江金华生物化学制药厂， 批号:961006);利血平注射液(1mg/ml,上海医科大学红旗制药厂，批号:960312);伴刀豆球蛋 白(COn A,美国Sigma产品，批号:9206202);RPMI-1640培养基(美国Gibco产品，批号:67K14 35);无支原体新生小牛血清与绵羊红细胞(SRBC,杭州四季青生物工程材料研究所)；噻唑蓝( MTT,Thiazoly Blue,美国Sigma产品，批号331097/1-594);邻甲苯胺(上海试剂三厂)，上述 试剂均由市售购得。
1.3 仪器
UV-754型分光光度计(上海第三分析 仪器厂);Ribror AEL-200型电子天平(日本岛津);2300型CO2培养箱(美国Shelden);离心 机(美国Beckman);显微镜(日本Olympus)。
, 百拇医药
1.4 实验方法
1.4.1 小 鼠阴虚模型的制备 按文献[2]方法制作小鼠阴虚动物模型，将甲状腺片研成粉末 加入利血平注射液，用1%CMC-Na配成含甲状腺片7.5mg/ml和利血平0.05mg/ml的混悬液，每 天灌胃0.4ml/20g体重，连续5d。
1.4.2 血糖测定法 按文献[3 ]用邻甲苯胺法测定血糖含量。
1.4.3 小鼠抗SRBC血清溶血素和凝 集素测定 每组小鼠ip 20% SRBC 0.2ml/只，免疫后第4天股动脉取血，按文献方法测定血 清溶血素和凝集素[4]。
1.4.4 小鼠脾淋巴细胞MTT法增殖试 验 小鼠处死后无菌取脾，按文献用MTT法测定淋巴细胞增殖率[5]。
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2 结 果
2.1 对正常小鼠血糖的影响
实验小鼠分4 组：①对照组，喂等体积水；②阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;③与④组为大补阴丸小、大 剂量,4g/kg,8g/kg;每天灌胃1次，连续5d,末次给药前禁食6h,末次给药后1h取血测定血糖含 量。
表1结果表明，大补阴丸对正常小鼠有一定的降血糖作用。
表1 大补阴丸对正常小鼠血糖的影响/±s ,n=10 组 别
剂量/g. kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
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对照
0
6.39±0.78
六味地黄丸
8
5.85±0.50*1
大补阴丸
4
4.94±0.67*2
8
6.49±0.89
注：与对照组比较，*1P<0.05；*2P<0.01
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2.2 对阴虚小鼠血糖的影响
实验小鼠分5组：①对照组及②阴虚模型对 照组，均喂等体积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤组为大补阴丸小、大剂量组4g/kg，8g/kg;每天灌胃1次，连续5d。上午给药试验，下午给造型药，除组①外各组均给造 型药，末次给药前禁食6h,末次药后1h取血测定血糖含量。
表2结果表明，阴虚模型组的血 糖含量较正常对照组显著降低，给予大补阴丸后，对阴虚所致血糖降低有较好的保护作用。
表2大补阴丸对阴虚小鼠血糖的影响/±s ,n=10 组 别
剂量/g. kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
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对照
0
6.11±1.17
阴虚模型
0
2.11±1.11
六味地黄丸
8
4.11±2.00*
大补阴丸
4
3.28±1.55
8
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4.66±2.78*
注：与阴虚模型对照组比较，*P<0.05
2.3 对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠高血糖的影响
实验小鼠分5组：①对照 组及②四氧嘧啶模型对照组，均喂等容积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤ 组为大补阴丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg。除组①外，各组均于禁食16h后ip四氧嘧啶2 00mg/kg,72h后取血测血糖，将血糖在10mmol/L以上的小鼠随机分组，每天灌胃给药1次 ，连续5d。末次给药前禁食15h,末次药后1h取血测定血糖含量。
表3结果表明，四氧嘧啶 模型组的血糖含量较正常对照组显著升高，给予大补阴丸后，对四氧嘧啶所致血糖升高有明 显的治疗作用。
2.4 对正常小鼠免疫功能的影响
, 百拇医药
实验小鼠分4组：①对照组，喂等体积 水；②阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;③与④组为大补阴丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg;每 天灌胃1次，连续7d,末次药后24h股动脉取血，同时取脾按前述方法测定各项免疫参数。
表3 大补阴丸对四氧嘧啶所致糖尿病 小鼠高血糖的影响/±s,n=10 组 别
剂量/g.kg-1.d-1
血糖/mmol.L-1
对照
0
5.40±0.74
四氧嘧啶模型
, 百拇医药
0
16.03±2.80
六味地黄丸
8
11.42±3.78*1
大补阴丸
4
12.36±3.71*2
8
11.29±3.56*1
注：与四氧嘧啶模型对照组比较 ，*1P<0.01，*2P<0.05
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表4结果表明，大补阴丸对正常小鼠的体液免疫和细胞免疫均有一定的增强作用。
表4 大补阴丸对正常小鼠免疫功能的影响/±s,n=10 组 别
剂量
/g.kg -1
血清溶血素
/单位
血清凝集素
/抗体积数
脾T细胞增
殖能力/OD
对照
, 百拇医药
0
227±119
114±29
0.72±0.16
六味地黄丸
8
394±114*1
153±2 9*1
1.05±0.17*1
大补阴丸
4
306±134
, 百拇医药
109±19
0 .80±0.13
8
383±127*2
142±21*2
0.92±0.20*2
注：与对照组比较，*1P<0.01,*2P<0. 05
2.5 对阴虚小鼠免疫功能的影响
实验小鼠分5组：① 对照组和②阴虚模型组，喂等体积水；③阳性对照组，六味地黄丸8g/kg;④与⑤组为大补阴 丸小、大剂量组,4g/kg,8g/kg;②～⑤组为阴虚造型组。上午灌胃给药，下午灌胃给造型药 ，连续7d，末次药后24h股动脉取血，同时取脾按前述方法测定各项免疫参数。
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表5结果表 明，阴虚小鼠的体液免疫和细胞免疫功能均明显降低，大补阴丸对阴虚小鼠的体液免疫和细 胞免疫功能降低有显著的保护作用。
3 讨 论
表5 大补阴丸对阴虚小鼠免疫功能的影响/±s,n=10 组 别
剂量
/g.kg -1
血清溶血素
/单位
血清凝集素
/抗体积数
脾T细胞增
, 百拇医药
殖能力/OD
对照
0
330±146
152±23
0.66±0.21
阴虚模型组
0
142±24
60±24
0.38±0.03
六味地黄丸
8
, 百拇医药
355±121*1
162±21*1
0. 46±0.04*2
大补阴丸
4
277±103
162±28*1
0.54±0. 15*2
8
271±61
145±18*1
, 百拇医药
0.40±0.02
注：与模型组比较，*1P<0.001；*2P<0.01
大补阴丸为历代中医治疗阴 虚证的要方，糖尿病属中医消渴症，系肺、胃、肾三脏燥热阴虚，水谷输布失常所致，临床 用大补阴丸治疗取得满意疗效[6]。本研究证明大补阴丸对正常小鼠及四氧嘧啶所 致小鼠高血糖有降糖作用，这与文献报道组成大补阴丸的单味药黄柏、知母、熟地均有降低 正常家兔血糖作用的结果相一致[7]。关于实验性阴虚小鼠的血糖变化，文献无一 致结果，本试验发现阴虚小鼠的血糖明显下降，可能系由于用作复制模型的甲状腺激素提高 代谢速率、增加组织氧耗和热能消耗、加速糖代谢、促进糖利用的结果。大补阴丸对这种阴 虚小鼠的血糖下降有保护作用，提示该药对阴虚时的糖代谢紊乱有调整作用，而其对正常动 物的降血糖作用是否系影响胰岛细胞功能尚待探讨。本研究还证明大补阴丸对正常及阴虚小 鼠有免疫调节作用，此与文献证明多数补阴药有调整免疫功能的结果相符[1]。上 述结果为大补阴丸的临床应用提供了若干依据。
, 百拇医药
参考文献
1，陈奇主编.中成药名方药理与临床.第1版.北京：人民卫 生出版社，1998∶560.
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收稿日期：1999-03-29, 百拇医药