普萘洛尔联合硝苯地平对实验性肝硬化大鼠血流动力学的影响
作者：杨东旭 胡小敏 丁惠国
单位：杨东旭 胡小敏(首都医科大学药理学教研室)；丁惠国(北京佑安医院)
关键词：肝硬化；门静脉高压；门脉血流动力学；普萘洛尔；硝苯地平
首都医科大学学报000305 提要：通过测定CCl4性肝硬化门静脉高压大鼠的平均动脉压、门静脉压及门脉血流量，研究普萘洛尔和硝苯地平单用及联合应用对肝硬化门静脉高压模型大鼠血流动力学的影响。结果：普萘洛尔及硝苯地平单用及联合应用均可降低肝硬化门脉高压模型大鼠的门脉压力及血流量(P<0.05或P<0.01)，但对平均动脉压均影响不大，且2药之间无明显差异。提示：联合应用普萘洛尔和硝苯地平可明显改变肝硬化大鼠的门脉血流动力学，且与单独用药效果相近。
中图分类号：R975+.5； R575.2
, 百拇医药
Study on Effects of Combined Application
of Propranolol and Nifedipine on
Portal Hemodynamics in
Experimental Cirrhotic Rats
Yang Dongxu，Hu Xiaomin
(Department of Pharmacology，Capital University of Medical Sciences)
Ding Huiguo
(Beijing Youan Hopital)
, 百拇医药
Abstract: The research on the effects of sigle and combined application of propranolol and nifedipine on portal hemodynamics in experimental cirrhotic rats were carried out by testing the rats′ average artery pressure, portal pressure and portal bloodstream. The results demonstrated that propranolol and nifedipine, whether used singly or in combination, could both decrease the portal pressure and rate of portal bloodstream (P<0.05 or P<0.01) in the rats, but neicher had apparent effect on the average artery pressure, and furthermore, there were no apparent diferences on the effects between the two drugs. In conclusion, combined use of propranolol and nifedipine has a distinct improvement on portal hemodynamics in experimental cirrhotic rats, whose effect is approximately equal to either of the drugs used singly.
, 百拇医药
Key words: liver cirrhosis; portal hepertension; portal hemodynamics; propranolol; nifedipine
普萘洛尔和硝苯地平均为临床应用的降门脉压药物，对它们各自的降门脉压作用均有研究报道[1，2]，但未见2药联合应用的实验研究报道。北京佑安医院曾采用2药联用治疗肝硬化门脉高压症，证明2药合用能明显改善患者的肝硬化胰岛素抵抗[3]。1998年9～12月，进行了本研究，旨在观察2药联合与单独应用对肝硬化门静脉高压大鼠血流动力学的影响，为其临床联合用药提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠，雄性，体质量150～200 g，由首都医科大学动物部提供。
, 百拇医药
1.2 药品与仪器
CCl4：北京化工厂,分析纯。液体石蜡：北京益利精细化学品有限公司，分析纯。硝苯地平：石家庄市新华制药厂(批号950911)，片剂，实验时配成0.1%生理盐水混悬液。盐酸普萘洛尔：江苏丹阳市药业有限责任公司(批号9603051)，片剂，实验时配成0.1%生理盐水混悬液。MFV-1200型电磁血流量计：日本光电公司。TYPE3056多导生理记录仪：四川仪表四厂。压力换能器：航天医学工程研究所。
1.3 制备肝硬化模型[4]
取大鼠50只，随机分为5组：① 对照组：生理盐水3 mL/kg灌胃，共3周。②模型组：以40% CCl4 液体石蜡皮下注射，2 mL/(kg*次)，2次/周，共7周[4] 。③硝苯地平治疗组：3 mg/(kg*d) 。④普萘洛尔治疗组：3 mg/(kg*d)。⑤硝苯地平+普萘洛尔治疗组(联合用药组)，药量分别为3 mg/(kg*d)。③～⑤组复制模型方法同②。第8周初，每组随机取1只大鼠做肝病理切片，证明肝硬化模型成功后，开始灌胃给药治疗共3周。
, 百拇医药
1.4 血流动力学测定
第11周初分别给各组大鼠腹腔注射戊巴比妥钠50 mg/kg麻醉。做颈动脉插管，接压力换能器测平均动脉血压; 然后分离门静脉，测门脉血流量；最后做门静脉插管测门静脉压。记录各项指标，比较各组结果。
1.5 肝脏组织学检查
将动物处死后取肝脏，10%甲醛固定，石蜡包埋,HE、Malloy染色，观察组织学变化情况。
1.6 数据处理
2组间比较采用t检验，多组间比较采用析因方差分析(F检验)。
2 结果
2.1 药物对肝硬化大鼠血流动力学的影响
, 百拇医药
普萘洛尔、硝苯地平单独和联合应用对实验性肝硬化大鼠血流动力学的影响见表1。
表1 普萘洛尔、硝苯地平单用和联合用药对肝硬化大鼠血流动力学的影响 组别
平均动脉压/kPa
门静脉压/kPa
门脉血流量/(mL*min-1)
对照组
18.42±2.47
3.46±0.90
14.11±2.57
模型组
, 百拇医药
18.27±1.13
4.06±1.04△
16.89±2.37△
硝苯地平组
18.28±1.94
3.53±0.91*
13.44±4.21*
普萘洛尔组
18.47±2.23
3.37±1.12*
, 百拇医药
13.75±2.49*
联合用药组
17.84±2.05
3.34±1.03*
12.77±3.46**
每组n=10；与模型组比较*P<0.05，**P<0.01；△与对照组比较P<0.05
表1结果表明，肝硬化模型组、普萘洛尔组、硝苯地平组和联合用药组与对照组相比，血压的变化均不大(P>0.05)。即药物对血压正常大鼠的血压影响不大，即使2药联用也未见有明显的血压下降。而硝苯地平组、普萘洛尔组和联合用药组大鼠的门静脉压力及门脉血流量均明显降低(P<0.05或P<0.01)，但各给药组间无显著性差异(P>0.05)。其中联合用药组的血流动力学改变在一定程度上优于单用普萘洛尔和硝苯地平组,但无统计学意义。
, 百拇医药
2.2 药物对肝硬化大鼠肝脏组织学的影响
结果表明：模型组大鼠肝硬化成型率100%，肝纤维化分级Ⅳ～Ⅴ级。治疗组大鼠肝硬化情况较模型组略有减轻，为Ⅲ～Ⅳ级。
3 讨论
普萘洛尔和硝苯地平在心血管系统的联合用药在临床较常见，如治疗心绞痛，每1种药单独用于改善肝硬化血流动力学的临床及实验研究也均有报道[1，2]。其中普萘洛尔的临床疗效确定，并已应用于临床多年。而近几年才开始研究硝苯地平用于降门脉压的可行性，疗效还不十分确定，报道也不多。已有研究证实，2药联合应用能增加肝硬化患者胰岛素的敏感性，改善糖代谢异常[3]，但尚未见2药联合应用对肝硬化血流动力学影响的实验报告。
普萘洛尔为非选择性β受体阻滞剂，它既可以通过阻断心肌β1受体，减少心排出量，降低内脏动脉灌注而降低门脉压力；也可通过阻断肝窦部动脉括约肌上的β2受体，减少肝动脉血流量，降低肝窦内压，而使门静脉压下降[1]。
, http://www.100md.com
硝苯地平为钙拮抗剂，已知在硬化的肝内，肝纤维间隔和肝窦周围存在1种肌成纤维细胞，对于门脉高压的发生可能具有重要作用。据报道病理性钙离子升高可能介导肌成纤维细胞收缩，导致硬化肝内门静脉血流阻力增加。而硝苯地平通过阻断细胞钙内流，可使肌成纤维细胞松弛，降低门静脉阻力[2]。且在门静脉压力降低的同时对肝脏的总血流量影响不大，对心率及动脉血压等影响甚少[5]。2药通过不同的机制，均产生降低门脉阻力并改善门脉血流的作用，且在作用机制方面无拮抗作用。
本研究证明，在本实验剂量下(以人用剂量下限折算)，2药对血压正常的大鼠并没有构成不利影响，且可明显改善门静脉血流动力学。提示用较小剂量(不引起体循环改变)即可达到改善门静脉血流动力学的目的。
从本实验结果来看，2药联合应用有协同改善门脉血流的趋势，而对体循环并未造成不利的影响。更主要的是长期服用普萘洛尔对糖代谢有不良影响，使胰岛素敏感性降低，而硝苯地平可使胰岛素敏感性增加[6]。因此，2药联合应用对纠正肝硬化患者异常的糖代谢及胰岛素抵抗状态，以及克服普萘洛尔长期应用的不良反应是十分有利的。本研究为临床联合应用普萘洛尔和硝苯地平治疗肝硬化门脉高压提供了实验依据。
, 百拇医药
另外，从本实验结果看，单用硝苯地平也可得到与普萘洛尔相似的改善门静脉血流动力学的结果，加之硝苯地平可提高胰岛素敏感性，提示临床可用硝苯地平取代普萘洛尔来治疗肝硬化门脉高压症。但确切结果有待进一步的基础与临床研究。
北京市卫生局基础与临床合作课题基金资助项目
参考文献
1，王先明，文明星，房献平，等.心得安对肝硬变大鼠门脉血流动力学和胰高糖素影响的实验研究.中华消化杂志，1992，12：214～216
2，胡颖，王秀玲，李定国，等.钙拮抗剂对大鼠肝硬化模型门脉高压的实验研究.中华消化杂志，1995，15：89～91
3，丁惠国，闵佳，林秀玉，等. 肝硬化胰岛素抵抗及药物治疗可行性研究. 中华肝脏病杂志，1998,6：28～30
, http://www.100md.com
4，张冠群，李佰鹏.肝炎一号对大鼠慢性肝损伤的作用. 中草药，1996，27：549～551
5，许君望. 钙通道阻滞剂在肝硬化治疗中的应用. 临床内科杂志，1995,12: 10～11
6，Harano Y,Kageyama A, Horose J，et al. Improvement of insulin sensitivity for glucose metabolism with the long-acting Ca-channel blacker amlodi-pine in essential hypertensive subjects. Metabolism, l995,44：3l5～324
收稿日期：1999-06-26, 百拇医药
单位：杨东旭 胡小敏(首都医科大学药理学教研室)；丁惠国(北京佑安医院)
关键词：肝硬化；门静脉高压；门脉血流动力学；普萘洛尔；硝苯地平
首都医科大学学报000305 提要：通过测定CCl4性肝硬化门静脉高压大鼠的平均动脉压、门静脉压及门脉血流量，研究普萘洛尔和硝苯地平单用及联合应用对肝硬化门静脉高压模型大鼠血流动力学的影响。结果：普萘洛尔及硝苯地平单用及联合应用均可降低肝硬化门脉高压模型大鼠的门脉压力及血流量(P<0.05或P<0.01)，但对平均动脉压均影响不大，且2药之间无明显差异。提示：联合应用普萘洛尔和硝苯地平可明显改变肝硬化大鼠的门脉血流动力学，且与单独用药效果相近。
中图分类号：R975+.5； R575.2
, 百拇医药
Study on Effects of Combined Application
of Propranolol and Nifedipine on
Portal Hemodynamics in
Experimental Cirrhotic Rats
Yang Dongxu，Hu Xiaomin
(Department of Pharmacology，Capital University of Medical Sciences)
Ding Huiguo
(Beijing Youan Hopital)
, 百拇医药
Abstract: The research on the effects of sigle and combined application of propranolol and nifedipine on portal hemodynamics in experimental cirrhotic rats were carried out by testing the rats′ average artery pressure, portal pressure and portal bloodstream. The results demonstrated that propranolol and nifedipine, whether used singly or in combination, could both decrease the portal pressure and rate of portal bloodstream (P<0.05 or P<0.01) in the rats, but neicher had apparent effect on the average artery pressure, and furthermore, there were no apparent diferences on the effects between the two drugs. In conclusion, combined use of propranolol and nifedipine has a distinct improvement on portal hemodynamics in experimental cirrhotic rats, whose effect is approximately equal to either of the drugs used singly.
, 百拇医药
Key words: liver cirrhosis; portal hepertension; portal hemodynamics; propranolol; nifedipine
普萘洛尔和硝苯地平均为临床应用的降门脉压药物，对它们各自的降门脉压作用均有研究报道[1，2]，但未见2药联合应用的实验研究报道。北京佑安医院曾采用2药联用治疗肝硬化门脉高压症，证明2药合用能明显改善患者的肝硬化胰岛素抵抗[3]。1998年9～12月，进行了本研究，旨在观察2药联合与单独应用对肝硬化门静脉高压大鼠血流动力学的影响，为其临床联合用药提供实验基础。
1 材料和方法
1.1 实验动物
Wistar大鼠，雄性，体质量150～200 g，由首都医科大学动物部提供。
, 百拇医药
1.2 药品与仪器
CCl4：北京化工厂,分析纯。液体石蜡：北京益利精细化学品有限公司，分析纯。硝苯地平：石家庄市新华制药厂(批号950911)，片剂，实验时配成0.1%生理盐水混悬液。盐酸普萘洛尔：江苏丹阳市药业有限责任公司(批号9603051)，片剂，实验时配成0.1%生理盐水混悬液。MFV-1200型电磁血流量计：日本光电公司。TYPE3056多导生理记录仪：四川仪表四厂。压力换能器：航天医学工程研究所。
1.3 制备肝硬化模型[4]
取大鼠50只，随机分为5组：① 对照组：生理盐水3 mL/kg灌胃，共3周。②模型组：以40% CCl4 液体石蜡皮下注射，2 mL/(kg*次)，2次/周，共7周[4] 。③硝苯地平治疗组：3 mg/(kg*d) 。④普萘洛尔治疗组：3 mg/(kg*d)。⑤硝苯地平+普萘洛尔治疗组(联合用药组)，药量分别为3 mg/(kg*d)。③～⑤组复制模型方法同②。第8周初，每组随机取1只大鼠做肝病理切片，证明肝硬化模型成功后，开始灌胃给药治疗共3周。
, 百拇医药
1.4 血流动力学测定
第11周初分别给各组大鼠腹腔注射戊巴比妥钠50 mg/kg麻醉。做颈动脉插管，接压力换能器测平均动脉血压; 然后分离门静脉，测门脉血流量；最后做门静脉插管测门静脉压。记录各项指标，比较各组结果。
1.5 肝脏组织学检查
将动物处死后取肝脏，10%甲醛固定，石蜡包埋,HE、Malloy染色，观察组织学变化情况。
1.6 数据处理
2组间比较采用t检验，多组间比较采用析因方差分析(F检验)。
2 结果
2.1 药物对肝硬化大鼠血流动力学的影响
, 百拇医药
普萘洛尔、硝苯地平单独和联合应用对实验性肝硬化大鼠血流动力学的影响见表1。
表1 普萘洛尔、硝苯地平单用和联合用药对肝硬化大鼠血流动力学的影响 组别
平均动脉压/kPa
门静脉压/kPa
门脉血流量/(mL*min-1)
对照组
18.42±2.47
3.46±0.90
14.11±2.57
模型组
, 百拇医药
18.27±1.13
4.06±1.04△
16.89±2.37△
硝苯地平组
18.28±1.94
3.53±0.91*
13.44±4.21*
普萘洛尔组
18.47±2.23
3.37±1.12*
, 百拇医药
13.75±2.49*
联合用药组
17.84±2.05
3.34±1.03*
12.77±3.46**
每组n=10；与模型组比较*P<0.05，**P<0.01；△与对照组比较P<0.05
表1结果表明，肝硬化模型组、普萘洛尔组、硝苯地平组和联合用药组与对照组相比，血压的变化均不大(P>0.05)。即药物对血压正常大鼠的血压影响不大，即使2药联用也未见有明显的血压下降。而硝苯地平组、普萘洛尔组和联合用药组大鼠的门静脉压力及门脉血流量均明显降低(P<0.05或P<0.01)，但各给药组间无显著性差异(P>0.05)。其中联合用药组的血流动力学改变在一定程度上优于单用普萘洛尔和硝苯地平组,但无统计学意义。
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2.2 药物对肝硬化大鼠肝脏组织学的影响
结果表明：模型组大鼠肝硬化成型率100%，肝纤维化分级Ⅳ～Ⅴ级。治疗组大鼠肝硬化情况较模型组略有减轻，为Ⅲ～Ⅳ级。
3 讨论
普萘洛尔和硝苯地平在心血管系统的联合用药在临床较常见，如治疗心绞痛，每1种药单独用于改善肝硬化血流动力学的临床及实验研究也均有报道[1，2]。其中普萘洛尔的临床疗效确定，并已应用于临床多年。而近几年才开始研究硝苯地平用于降门脉压的可行性，疗效还不十分确定，报道也不多。已有研究证实，2药联合应用能增加肝硬化患者胰岛素的敏感性，改善糖代谢异常[3]，但尚未见2药联合应用对肝硬化血流动力学影响的实验报告。
普萘洛尔为非选择性β受体阻滞剂，它既可以通过阻断心肌β1受体，减少心排出量，降低内脏动脉灌注而降低门脉压力；也可通过阻断肝窦部动脉括约肌上的β2受体，减少肝动脉血流量，降低肝窦内压，而使门静脉压下降[1]。
, http://www.100md.com
硝苯地平为钙拮抗剂，已知在硬化的肝内，肝纤维间隔和肝窦周围存在1种肌成纤维细胞，对于门脉高压的发生可能具有重要作用。据报道病理性钙离子升高可能介导肌成纤维细胞收缩，导致硬化肝内门静脉血流阻力增加。而硝苯地平通过阻断细胞钙内流，可使肌成纤维细胞松弛，降低门静脉阻力[2]。且在门静脉压力降低的同时对肝脏的总血流量影响不大，对心率及动脉血压等影响甚少[5]。2药通过不同的机制，均产生降低门脉阻力并改善门脉血流的作用，且在作用机制方面无拮抗作用。
本研究证明，在本实验剂量下(以人用剂量下限折算)，2药对血压正常的大鼠并没有构成不利影响，且可明显改善门静脉血流动力学。提示用较小剂量(不引起体循环改变)即可达到改善门静脉血流动力学的目的。
从本实验结果来看，2药联合应用有协同改善门脉血流的趋势，而对体循环并未造成不利的影响。更主要的是长期服用普萘洛尔对糖代谢有不良影响，使胰岛素敏感性降低，而硝苯地平可使胰岛素敏感性增加[6]。因此，2药联合应用对纠正肝硬化患者异常的糖代谢及胰岛素抵抗状态，以及克服普萘洛尔长期应用的不良反应是十分有利的。本研究为临床联合应用普萘洛尔和硝苯地平治疗肝硬化门脉高压提供了实验依据。
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另外，从本实验结果看，单用硝苯地平也可得到与普萘洛尔相似的改善门静脉血流动力学的结果，加之硝苯地平可提高胰岛素敏感性，提示临床可用硝苯地平取代普萘洛尔来治疗肝硬化门脉高压症。但确切结果有待进一步的基础与临床研究。
北京市卫生局基础与临床合作课题基金资助项目
参考文献
1，王先明，文明星，房献平，等.心得安对肝硬变大鼠门脉血流动力学和胰高糖素影响的实验研究.中华消化杂志，1992，12：214～216
2，胡颖，王秀玲，李定国，等.钙拮抗剂对大鼠肝硬化模型门脉高压的实验研究.中华消化杂志，1995，15：89～91
3，丁惠国，闵佳，林秀玉，等. 肝硬化胰岛素抵抗及药物治疗可行性研究. 中华肝脏病杂志，1998,6：28～30
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4，张冠群，李佰鹏.肝炎一号对大鼠慢性肝损伤的作用. 中草药，1996，27：549～551
5，许君望. 钙通道阻滞剂在肝硬化治疗中的应用. 临床内科杂志，1995,12: 10～11
6，Harano Y,Kageyama A, Horose J，et al. Improvement of insulin sensitivity for glucose metabolism with the long-acting Ca-channel blacker amlodi-pine in essential hypertensive subjects. Metabolism, l995,44：3l5～324
收稿日期：1999-06-26, 百拇医药