不稳定性心绞痛患者血浆低密度脂蛋白、丙二醛和一氧化氮水平及与冠状动脉病变间的关系
作者：田刚 祝家庆 朱建宏
单位：田刚 祝家庆(710061,陕西省西安市,西安医科大学第一附属医院,心内科)；朱建宏(西安医科大学第二附属医院,生化研究室)
关键词：不稳定性心绞痛；氧化修饰低密度脂蛋白；冠状动脉狭窄
中国循环杂志000312 摘要
目的：探讨不稳定性心绞痛患者血浆中氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性与冠状动脉病变程度的关系。
方法：采用双抗体夹心法等方法检测不稳定性心绞痛组(48例)及对照组(33例)血浆OX-LDL、MDA、NO及SOD的变化，并分析其与冠状动脉病变程度的关系。
结果：不稳定性心绞痛组血浆OX-LDL和MDA显著高于对照组(P<0.01)，而NO和SOD显著低于对照组(P<0.01)。且冠状动脉病变程度愈重，OX-LDL和MDA愈高，NO和SOD愈低。
, 百拇医药
结论：OX-LDL升高与冠状动脉病变严重程度一致，其在不稳定性心绞痛中的作用与脂质过氧化和内皮损伤有关。
中图分类号:R541.4 文献标识码:A
文章编号:1000-3614(2000)03-0155-02
The Levels of Plasma Oxidatively Modified Low Density Lipoprotein,Malondialdehycle,Nitric Oxide and its Relationship with Coronary Stenosis in Coronary Heart Disease Unstable Angina Pectoris
Tian Gang,Zhu Jiaqing,Zhu Jianhong.
, 百拇医药
(Department of Cardiology,the First Affiliated Hospital of Xi′an Medical University,Xi′an 710061,Shaanxi)
Abstract
Objective:To investigate the levels of plasma oxidatively modified low density lipoprotein (OX-LDL),malondialdehycle (MDA),nitric oxide(NO) and its relationship with the degree of coronary stenosis in coronary heart disease unstable angina pectoris.
Methods:Blood samples were collected from 48 unstable angina pectoris patients,and 33 controls.Plasma OX-LDL、MDA、NO and superoxide dismutase (SOD) were determined by enzyme linked immunoadsorbent assay (ELISA) et al.
, http://www.100md.com
Results:The levels of OX-LDL、MDA in the unstable angina pectoris patients were higher than those in controls (p<0.01)，NO and SOD were lower than those in controls (p<0.01).The more serious the coronary stenosis,the more higher the OX-LDL and MDA,but the more less the NO and SOD.
Conclusion:Higher levels of OX-LDL were consistent with severer degree of the coronary stenosis implying that its role in coronary heart disease unstable angina pectoris may be related to lipid peroxidation and endothelial damage.
, 百拇医药
Key words Unstable angina pectoris;Oxidatively modified low densityzlipoprotein;Coronary stenosis
高脂血症是动脉粥样硬化(AS)的危险因素之一。而氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)在AS发生发展中起着十分重要的作用。研究认为OX-LDL有较强的细胞毒性，与巨噬泡沫细胞的形成、血管内皮细胞损伤、脱落和功能失调及单核细胞进入AS斑块灶有关，是导致AS的主要始动因素之一[1，2]。但大多数研究只是从单一指标报道，本文同时对4个指标的变化及其与冠状动脉病变程度进行分析，旨在探讨其4个指标的改变与脂质过氧化、内皮损伤及冠状动脉病变程度的关系。
1 对象与方法
研究对象 我院1997年6月至1998年12月间住院的48例不稳定性心绞痛患者，为不稳定性心绞痛组，均符合世界卫生组织(WHO)冠心病诊断标准，男37例，女11例，年龄42～79(平均62.3±11.8)岁，心功能(NYHA)分级为Ⅱ～Ⅲ级。其中初发劳力型心绞痛6例(男5例、女1例)，恶化劳力型心绞痛19例(男12例，女7例)，自发性心绞痛23例(男16例，女7例)。入选患者均经选择性冠状动脉造影确定冠状动脉狭窄程度，按狭窄累及冠状动脉的左前降支、左回旋支或右冠状动脉的支数分为单支、双支或三支病变；如显著累及左主干为双支病变。对照组33例，男19例，女14例，年龄40～76(平均59.1±10.6)岁，为冠状动脉造影正常的其他心血管病患者。两组均剔除合并严重感染，肝、肾、脑功能损害，高血压及糖尿病。实验前2周均停服调血脂药物和抗氧化剂。
, 百拇医药
方法 早晨抽取肘静脉血10 ml，立即加入备有抗氧化剂及抗凝剂的试管中，摇匀，分离血浆，4℃保存2周内或-20℃保存2月内，用双抗体夹心法检测OX-LDL[3]，试剂盒由上海荣盛生物试剂厂提供。用亚硝酸盐法测定一氧化氮(NO)，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)，用邻苯三氧化法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。
统计学处理 结果以均数±标准差(±s)表示，组间差异用F检验。并行直线相关分析。
2 结果
不同类型不稳定性心绞痛(初发劳力型心绞痛、恶化劳力型心绞痛、自发性心绞痛)患者血浆中OX-LDL、NO、MDA水平和SOD活性变化无显著差异。
不稳定性心绞痛患者血浆中OX-LDL、NO、MDA水平和SOD活性检测及其与冠状动脉病变程度的关系(附表)。经相关分析表明，冠状动脉病变程度与OX-LDL、MDA呈显著正相关(r=0.73，P<0.05)，与NO、SOD呈显著负相关(r=-0.57，P<0.05)。冠状动脉病变程度愈重，OX-LDL和MDA水平愈高(P<0.05)，NO水平和SOD活性愈低(P<0.05)。
, http://www.100md.com
附表 2组血浆中氧化修饰低密度脂蛋白、一氧化氮、丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性变化
及与冠状动脉病变程度的关系(±s)
例数
OX-LDL(mg/L)
NO(μmol/L)
MDA(mmol/L)
SOD(U/g)
对照组
33
0.38
±0.05
, 百拇医药
39.34
±7.61
3.64
±0.71
1673.31
±219.21
不稳定性心绞痛组
单支病变
9
0.59
±0.14**
32.22
, 百拇医药
±5.35*
5.98
±0.15**
1287.43
±134.41**
双支病变
24
0.71
±0.18***
26.42
±0.31**
, http://www.100md.com
6.27
±1.25**
945.72
±115.61**
三支病变
15
0.79
±0.25***△
20.58
±0.24***△
6.94
, 百拇医药 ±0.23***△
725.39
±124.52***△
注：与对照组比较*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001；与单支病变比较△P<0.05。 OX-LDL：氧化修饰低密度脂蛋白 NO：一氧化氮 MOA：丙二醛 SOD：超氧化物歧化酶
3 讨论
研究发现，冠心病患者血浆中低密度脂蛋白(LDL)在体内氧化的敏感性增加，且与冠状动脉病变的严重程度呈正相关[4，5]。OX-LDL、氧自由基和NO之间有着复杂的联系。血浆中脂质过氧化物可导致LDL氧化修饰，而OX-LDL释放的溶血卵磷脂进入血管内皮细胞，改变血管的生理作用，抑制一氧化氮合酶的基因调控和活性调节，引起NO合成下降，分解加快或直接灭活NO。NO能降低细胞氧化LDL的能力，也能减轻OX-LDL损害作用。实验表明高脂血症、AS和OX-LDL引发的内皮功能失调和内皮损伤是一致的。它们的改变可加速AS的形成[6]。一方面NO合成减少，可促使冠状动脉血管新内膜的形成，另一方面OX-LDL既可直接损伤内皮细胞本身，又可增强单核细胞和T淋巴细胞的粘附和向内皮下移行，导致AS。实验结果提示OX-LDL可能为促进AS发生发展的重要因素之一。但不同类型不稳定性心绞痛间比较其血浆OX-LDL、MDA、SOD水平和NO活性无显著差异。其机制尚不清楚，也有可能与观察例数少有关，有待进一步研究。
, http://www.100md.com
内皮功能损伤与机体或局部组织抗氧化能力降低和(或)自由基产生增多有关。OX-LDL的脂质过氧化物可增强动脉壁对脂蛋白的通透性，干扰细胞的能量代谢，诱导细胞Ca2+的内流，动脉内皮细胞、平滑肌细胞坏死，减少NO合成和分泌。本实验结果表明脂质过氧化、内皮损伤与OX-LDL有一定的关系。脂质过氧化物MDA极易氧化修饰LDL，并被单核/巨噬细胞识别吞饮，形成泡沫细胞，加速AS形成。脂质过氧化物和高水平的OX-LDL还可促进内皮素(ET)的合成和分泌，使内皮素与NO平衡失调，激活血小板，促进血小板聚集，导致冠状动脉痉挛或血栓形成，加速心绞痛或心肌梗塞的发生[7]。设法提高清除自由基的酶类水平有利于防止或延缓AS和冠心病的发生发展。这提示在治疗中应加强抗氧化治疗。
田刚(1964-)女,主治医师,硕士,主要从事心血管病临床研究
参考文献
1，Holvoet P,Stassen JM,Cleemput JV,et al.Oxidized low density lipoprotein in patients with transplant-associated coronary artery disease.Arterioscler Thromb Vasc Biol,1998,18:100—103.
, 百拇医药
2，Sevanian A,Asatryan L,Ziouzenkova O,et al.Low density lipoprotein(LDL) modification:basic concepts and relationship to atherosclerosis.Blood Purif,1999,17:66—78.
3，王华梁，陈思聪，张国元，等.双抗体夹心法检测血浆氧化修饰型低密度脂蛋白.上海医学检验杂志，1994，9：135—138.
4，Jimi S,Saku K,Kusaba H,et al.Deposition of oxidized low density lipoprotein and collagenosis occur coincidentally in human coronary stenosis:an immunohistochemical study of atherectomy.Coron Artery Dis,1998,9:551—557.
, http://www.100md.com
5，田庆印，潘其兴，夏洪印，等.冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平的变化.临床心血管病杂志，1996，12：146—149.
6，Rangaswamy S,Penn MS,Saidel GM,et al.Exogenous oxidized low density lipoprotein injures and alters the barrier function of endothelium in rats in vivo.Circ Res,1997,80:37—45.
7，黄晨.氧自由基在冠心病研究中的现状与展望.心血管病学进展，1994，15：129—132.
1999-12-21
2000-01-31, 百拇医药
单位：田刚 祝家庆(710061,陕西省西安市,西安医科大学第一附属医院,心内科)；朱建宏(西安医科大学第二附属医院,生化研究室)
关键词：不稳定性心绞痛；氧化修饰低密度脂蛋白；冠状动脉狭窄
中国循环杂志000312 摘要
目的：探讨不稳定性心绞痛患者血浆中氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性与冠状动脉病变程度的关系。
方法：采用双抗体夹心法等方法检测不稳定性心绞痛组(48例)及对照组(33例)血浆OX-LDL、MDA、NO及SOD的变化，并分析其与冠状动脉病变程度的关系。
结果：不稳定性心绞痛组血浆OX-LDL和MDA显著高于对照组(P<0.01)，而NO和SOD显著低于对照组(P<0.01)。且冠状动脉病变程度愈重，OX-LDL和MDA愈高，NO和SOD愈低。
, 百拇医药
结论：OX-LDL升高与冠状动脉病变严重程度一致，其在不稳定性心绞痛中的作用与脂质过氧化和内皮损伤有关。
中图分类号:R541.4 文献标识码:A
文章编号:1000-3614(2000)03-0155-02
The Levels of Plasma Oxidatively Modified Low Density Lipoprotein,Malondialdehycle,Nitric Oxide and its Relationship with Coronary Stenosis in Coronary Heart Disease Unstable Angina Pectoris
Tian Gang,Zhu Jiaqing,Zhu Jianhong.
, 百拇医药
(Department of Cardiology,the First Affiliated Hospital of Xi′an Medical University,Xi′an 710061,Shaanxi)
Abstract
Objective:To investigate the levels of plasma oxidatively modified low density lipoprotein (OX-LDL),malondialdehycle (MDA),nitric oxide(NO) and its relationship with the degree of coronary stenosis in coronary heart disease unstable angina pectoris.
Methods:Blood samples were collected from 48 unstable angina pectoris patients,and 33 controls.Plasma OX-LDL、MDA、NO and superoxide dismutase (SOD) were determined by enzyme linked immunoadsorbent assay (ELISA) et al.
, http://www.100md.com
Results:The levels of OX-LDL、MDA in the unstable angina pectoris patients were higher than those in controls (p<0.01)，NO and SOD were lower than those in controls (p<0.01).The more serious the coronary stenosis,the more higher the OX-LDL and MDA,but the more less the NO and SOD.
Conclusion:Higher levels of OX-LDL were consistent with severer degree of the coronary stenosis implying that its role in coronary heart disease unstable angina pectoris may be related to lipid peroxidation and endothelial damage.
, 百拇医药
Key words Unstable angina pectoris;Oxidatively modified low densityzlipoprotein;Coronary stenosis
高脂血症是动脉粥样硬化(AS)的危险因素之一。而氧化修饰低密度脂蛋白(OX-LDL)在AS发生发展中起着十分重要的作用。研究认为OX-LDL有较强的细胞毒性，与巨噬泡沫细胞的形成、血管内皮细胞损伤、脱落和功能失调及单核细胞进入AS斑块灶有关，是导致AS的主要始动因素之一[1，2]。但大多数研究只是从单一指标报道，本文同时对4个指标的变化及其与冠状动脉病变程度进行分析，旨在探讨其4个指标的改变与脂质过氧化、内皮损伤及冠状动脉病变程度的关系。
1 对象与方法
研究对象 我院1997年6月至1998年12月间住院的48例不稳定性心绞痛患者，为不稳定性心绞痛组，均符合世界卫生组织(WHO)冠心病诊断标准，男37例，女11例，年龄42～79(平均62.3±11.8)岁，心功能(NYHA)分级为Ⅱ～Ⅲ级。其中初发劳力型心绞痛6例(男5例、女1例)，恶化劳力型心绞痛19例(男12例，女7例)，自发性心绞痛23例(男16例，女7例)。入选患者均经选择性冠状动脉造影确定冠状动脉狭窄程度，按狭窄累及冠状动脉的左前降支、左回旋支或右冠状动脉的支数分为单支、双支或三支病变；如显著累及左主干为双支病变。对照组33例，男19例，女14例，年龄40～76(平均59.1±10.6)岁，为冠状动脉造影正常的其他心血管病患者。两组均剔除合并严重感染，肝、肾、脑功能损害，高血压及糖尿病。实验前2周均停服调血脂药物和抗氧化剂。
, 百拇医药
方法 早晨抽取肘静脉血10 ml，立即加入备有抗氧化剂及抗凝剂的试管中，摇匀，分离血浆，4℃保存2周内或-20℃保存2月内，用双抗体夹心法检测OX-LDL[3]，试剂盒由上海荣盛生物试剂厂提供。用亚硝酸盐法测定一氧化氮(NO)，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)，用邻苯三氧化法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。
统计学处理 结果以均数±标准差(±s)表示，组间差异用F检验。并行直线相关分析。
2 结果
不同类型不稳定性心绞痛(初发劳力型心绞痛、恶化劳力型心绞痛、自发性心绞痛)患者血浆中OX-LDL、NO、MDA水平和SOD活性变化无显著差异。
不稳定性心绞痛患者血浆中OX-LDL、NO、MDA水平和SOD活性检测及其与冠状动脉病变程度的关系(附表)。经相关分析表明，冠状动脉病变程度与OX-LDL、MDA呈显著正相关(r=0.73，P<0.05)，与NO、SOD呈显著负相关(r=-0.57，P<0.05)。冠状动脉病变程度愈重，OX-LDL和MDA水平愈高(P<0.05)，NO水平和SOD活性愈低(P<0.05)。
, http://www.100md.com
附表 2组血浆中氧化修饰低密度脂蛋白、一氧化氮、丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性变化
及与冠状动脉病变程度的关系(±s)
例数
OX-LDL(mg/L)
NO(μmol/L)
MDA(mmol/L)
SOD(U/g)
对照组
33
0.38
±0.05
, 百拇医药
39.34
±7.61
3.64
±0.71
1673.31
±219.21
不稳定性心绞痛组
单支病变
9
0.59
±0.14**
32.22
, 百拇医药
±5.35*
5.98
±0.15**
1287.43
±134.41**
双支病变
24
0.71
±0.18***
26.42
±0.31**
, http://www.100md.com
6.27
±1.25**
945.72
±115.61**
三支病变
15
0.79
±0.25***△
20.58
±0.24***△
6.94
, 百拇医药 ±0.23***△
725.39
±124.52***△
注：与对照组比较*P<0.05 **P<0.01 ***P<0.001；与单支病变比较△P<0.05。 OX-LDL：氧化修饰低密度脂蛋白 NO：一氧化氮 MOA：丙二醛 SOD：超氧化物歧化酶
3 讨论
研究发现，冠心病患者血浆中低密度脂蛋白(LDL)在体内氧化的敏感性增加，且与冠状动脉病变的严重程度呈正相关[4，5]。OX-LDL、氧自由基和NO之间有着复杂的联系。血浆中脂质过氧化物可导致LDL氧化修饰，而OX-LDL释放的溶血卵磷脂进入血管内皮细胞，改变血管的生理作用，抑制一氧化氮合酶的基因调控和活性调节，引起NO合成下降，分解加快或直接灭活NO。NO能降低细胞氧化LDL的能力，也能减轻OX-LDL损害作用。实验表明高脂血症、AS和OX-LDL引发的内皮功能失调和内皮损伤是一致的。它们的改变可加速AS的形成[6]。一方面NO合成减少，可促使冠状动脉血管新内膜的形成，另一方面OX-LDL既可直接损伤内皮细胞本身，又可增强单核细胞和T淋巴细胞的粘附和向内皮下移行，导致AS。实验结果提示OX-LDL可能为促进AS发生发展的重要因素之一。但不同类型不稳定性心绞痛间比较其血浆OX-LDL、MDA、SOD水平和NO活性无显著差异。其机制尚不清楚，也有可能与观察例数少有关，有待进一步研究。
, http://www.100md.com
内皮功能损伤与机体或局部组织抗氧化能力降低和(或)自由基产生增多有关。OX-LDL的脂质过氧化物可增强动脉壁对脂蛋白的通透性，干扰细胞的能量代谢，诱导细胞Ca2+的内流，动脉内皮细胞、平滑肌细胞坏死，减少NO合成和分泌。本实验结果表明脂质过氧化、内皮损伤与OX-LDL有一定的关系。脂质过氧化物MDA极易氧化修饰LDL，并被单核/巨噬细胞识别吞饮，形成泡沫细胞，加速AS形成。脂质过氧化物和高水平的OX-LDL还可促进内皮素(ET)的合成和分泌，使内皮素与NO平衡失调，激活血小板，促进血小板聚集，导致冠状动脉痉挛或血栓形成，加速心绞痛或心肌梗塞的发生[7]。设法提高清除自由基的酶类水平有利于防止或延缓AS和冠心病的发生发展。这提示在治疗中应加强抗氧化治疗。
田刚(1964-)女,主治医师,硕士,主要从事心血管病临床研究
参考文献
1，Holvoet P,Stassen JM,Cleemput JV,et al.Oxidized low density lipoprotein in patients with transplant-associated coronary artery disease.Arterioscler Thromb Vasc Biol,1998,18:100—103.
, 百拇医药
2，Sevanian A,Asatryan L,Ziouzenkova O,et al.Low density lipoprotein(LDL) modification:basic concepts and relationship to atherosclerosis.Blood Purif,1999,17:66—78.
3，王华梁，陈思聪，张国元，等.双抗体夹心法检测血浆氧化修饰型低密度脂蛋白.上海医学检验杂志，1994，9：135—138.
4，Jimi S,Saku K,Kusaba H,et al.Deposition of oxidized low density lipoprotein and collagenosis occur coincidentally in human coronary stenosis:an immunohistochemical study of atherectomy.Coron Artery Dis,1998,9:551—557.
, http://www.100md.com
5，田庆印，潘其兴，夏洪印，等.冠心病患者血浆氧化修饰低密度脂蛋白水平的变化.临床心血管病杂志，1996，12：146—149.
6，Rangaswamy S,Penn MS,Saidel GM,et al.Exogenous oxidized low density lipoprotein injures and alters the barrier function of endothelium in rats in vivo.Circ Res,1997,80:37—45.
7，黄晨.氧自由基在冠心病研究中的现状与展望.心血管病学进展，1994，15：129—132.
1999-12-21
2000-01-31, 百拇医药