大鼠口服阿司匹林铜分布、蓄积、排泄的实验研究
作者：陆瑛 邱红莲 杨荣 刘伟平 陈静 熊惠周
单位：陆瑛 杨荣 陈静(昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室，昆明 650031)；邱红莲 刘伟平 熊惠周(昆明贵金属研究所，昆明 650221)
关键词：阿司匹林铜；铜含量；分布；蓄积；排泄
昆明医学院学报000312 摘要：采用SD大鼠灌胃给予阿司匹林铜10 mg/kg体重，50 mg/kg体重连续90 d，用多通道等离子体光谱仪(ICPQ-1012)测定大鼠血清、脑、肝、肾、脾、粪便的铜含量，并进行主要脏器的病理组织学检查.结果显示：大鼠摄入阿司匹林铜后血清、脑、肝、肾、脾中铜含量与对照组无显著性差异(P>0.05)粪便中铜含量明显高于对照组，有高度显著性差异(P<0.01).病理组织学检查除给药动物肝脏Kupffer's细胞增多外未发现异常，提示口服阿司匹林铜后体内主要脏器未见铜蓄积，摄入过量的铜主要从粪便排出.
, 百拇医药
中图分类号：R 99 文献标识码：A 文章编号：1003-4706(2000)03-0045-04
An Experimental Study on Distribution,Accumulation and Excretion of Copper
in Rats Treated with Oral Copper Aspirin
LU Ying，YANG Rong，CHEN Jing
(Yunnan Pharmacological Laboratory of Natural Products, Kunming Medical College, Kunming 650031)
QU Hong-lian，YANG Yi-kun，XING Hui-zhou
, http://www.100md.com
(Kunming Institute of Precious Metals, Kunming 650221)
Abstract：The S.D rats were orally given Copper Asprin at the doses of 10 mg, 50 mg/kg body weight. By ICPQ-1021 technique, the copper concentration was determined in serum, brain, liver, kidney, spleen and feces. The results showed that the concentrations of copper in serum, brain, liver, kidney and spleen had no significant differences between the treated groups and the control. (P>0.05). The copper concentration in feces was significantly higher than that of the control group(P<0.01). The pathological section showed the Kupper's cells increased in rat liver in the treated groups. It was also suggested that the copper of oral Copper Aspirin did not accumulate in organs and the copper was excreted from feces.
, 百拇医药
Key words：Copper aspirin； Copper concentration distribution； Accumulation； Excretion
近年来许多研究报道：阿司匹林的临床应用日趋广泛，除作为抗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的药用于临床外，在治疗急性心肌梗塞的同时加服阿司匹林有理想的疗效，亦可作为冠心病的常规治疗用药.但由于阿司匹林有明显的消化道刺激副作用，常引起腹痛、恶心、呕吐甚至胃肠溃疡出血.研究报道铜与阿司匹林结合后可降低其毒副作用并提高药效.铜 是人体所需微量元素之一，是合成人体30多种酶的原料，但摄入过量铜有害健康.本试验旨在观察大鼠经口摄入阿司匹林铜后，体内铜分布、蓄积及排泄情况，为临床用药的安全性提供科学依据.
1 材料和方法
1.1 材料
阿司匹林铜原药，由昆明贵金属研究所提供，用1.4%聚乙烯醇和5%1，3-丙二醇混合液作为溶媒，将阿司匹林铜配成0.5%和0.1%的混悬液备用，pH5～6.SD大鼠由昆明医学院省级天然药物药理重点实验室提供.
, 百拇医药
1.2 剂量设计分组
将60只大鼠随机分为3组：溶媒对照组，阿司匹林铜高剂量组(50 mg/kg)和低剂量组(10 mg/kg)每组20只动物，另取15只在给药前测大鼠血及主要脏器铜含量作为空白对照.
1.3 血清及主要脏器铜含量测定
分别于给药前、给药1个月、2个月、3个月及停药后1个月各组取5只动物处死，取血、肝、肾、脾、脑及收集粪便，用岛津ICPQ-1012多通道等离子体光谱仪测定铜含量.测定条件：分析线波长324.75 nm；发生器入射功率1.0 kW；反射功率近于零.氩气流量(L/min)：冷却气12.5，辅助气1.0，载气0.9.观察高度15 mm，玻璃气动雾化器，积分时间20 s，每次测量积分3次.
1.4 病理组织学检查
给药后3个月取各组动物的肝、肾、脾、脑进行病理组织学检查.
, 百拇医药
2 结果
给药前血液铜测定含量为(1.01±0.18) μg/g湿重；肝脏为(3.20±0.37) μg/g湿重；肾脏为(5.60±1.80 )μg/g湿重；脾脏为(1.10±0.17) μg/g湿重；脑为(1.90±0.30) μg/g湿重，其中肾脏含量最高，与其它几个脏器比较有显著性差异(P<0.05).
给药后3个月测定动物粪便中铜含量，空白对照组为(25.00±1.00) μg/g湿重；溶剂对照组为(26.00±1.00) μg/g湿重，低剂量组为(97.00±2.00) μg/g湿重；高剂量组动物粪便中铜含量最高，与其他几组比较有高度显著性差异(P<0.01).
给药不同时间血液、肝脏、脾脏和脑组织中铜含量测定结果见表1～5.
表1 阿司匹林铜不同给药时间血液中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
, 百拇医药
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
1.01±0.18
溶剂对照
5
1.35±0.14
1.20±0.10
, 百拇医药
1.40±0.30
1.20±0.20
低剂量
5
1.22±0.19
1.15±0.15
1.30±0.30
1.20±0.17
高剂量
5
1.30±0.25
1.20±0.15
, 百拇医药
1.30±0.30
1.13±0.14
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表2 阿司匹林铜不同给药时间肝脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
3.20±0.37
, 百拇医药
溶剂对照
5
3.20±0.14
3.80±0.57
4.20±0.47
4.10±0.40
低剂量
5
3.60±0.32
4.00±0.48
4.20±0.43
3.90±0.45
, http://www.100md.com
高剂量
5
4.10±0.49
4.10±0.39
4.40±0.85
3.80±0.15
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表3 阿司匹林铜不同给药时间肾脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
n
给药前
给药1月
给药2月
, 百拇医药
给药3月
停药后1月
空白对照
15
5.60±1.80
溶剂对照
5
5.20±1.10
6.80±1.10
5.90±0.90
6.30±2.50
低剂量
, 百拇医药 5
4.60±1.30
5.40±1.00
5.60±0.90
6.70±1.20
高剂量
5
6.40±1.10
7.30±2.30
5.90±1.40
6.60±0.90
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表4 阿司匹林铜不同给药时间脾脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
, 百拇医药
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
1.10±0.17
溶剂对照
5
1.20±0.90
1.60±0.20
, 百拇医药
1.30±0.10
1.20±0.10
低剂量
5
1.30±0.40
1.60±0.10
0.87±0.20
1.50±0.20
高剂量
5
1.30±0.60
1.60±0.20
, http://www.100md.com
1.00±0.20
1.60±0.20
给药前、不同给药时间剂量间均无显著性差异.表5 阿司匹林铜不同给药时间脑组织中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
1.90±0.30
, 百拇医药
溶剂对照
5
2.30±0.10
2.60±0.10
2.40±0.10
2.10±0.30
低剂量
5
2.80±0.60
2.30±0.30
2.20±0.10
2.60±0.10
, 百拇医药
高剂量
5
2.40±0.50
2.70±0.10
2.40±0.10
2.50±0.10
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.
以上结果显示：给药前大鼠肾脏中铜 含量较血液、肝、脾、脑组织中高，差异有显著性(P<0.05)，不同给药时间及不同给药剂量测定血液、肝、肾、脾、脑组织中的铜含量，给药组与对照组间无显著性差异(P>0.05)，给药3个月后测定粪便铜含量发现高剂量组粪铜含量明显高于低剂量及对照组和溶剂组，有高度显著性差异(P<0.01).
, http://www.100md.com
病理组织学检查显示除给药组大鼠肝脏Kupffer's细胞较对照组增多外，未发现其他病理组织学改变.
3 讨论
近年对阿司匹林的抗血小板聚集及抗栓、溶栓作用研究很多.有报道阿司匹林能抑制TXA2的合成，从而抑制血小板聚集.抗栓治疗中建议服用阿司匹林一次大剂量(500 mg/日),后再连续口服50 mg/日,疗效较好.在急性心肌梗塞治疗基础上加服阿司匹林150～300 mg/日可预防进一步冠脉事件发生.口服阿司匹林150～300 mg/日亦可作为冠心病的常规治疗[1].铜与阿司匹林结合后可降低其毒副作用，并提高药效约20倍[2].铜是人体所需微量元素之一，是构成细胞色素C氧化酶、超氧化歧化酶等多种酶的重要物质，是合成人体30多种酶的重要元素.但如果人体微量元素含量异常或失衡，将会引起多种疾病发生[3].口服阿司匹林铜后是否会引起血清铜增高或蓄积在主要脏器而导致铜在体内失衡是本研究的目的，实验结果显示：给药组与对照组间血液及主要脏器中铜含量无显著性差异(P>0.05).病理组织学检查发现给药组动物Kupffer's细胞增加，这一发现与国外文献报道一致[4].这可能与其吞噬进入肝脏内的铜离子有关.高剂量组粪铜比低剂量和对照组高，有高度显著性差异(P<0.01).证实哺乳动物经口摄入铜，主要排泄是通过分泌胆汁进行的，胆汁中的氨基酸与铜结合后经粪便排出，微量的铜则由尿液排出[2].为进一步证实阿司匹林铜的胆汁分泌排泄过程，有待进行相关的实验观察.
, 百拇医药
基金项目：云南省应用基础研究基金资助项目(94C046Q)
作者简介：陆瑛 (1952～)，女，云南昆明人，副教授，主要从事毒理学研究.
参考文献
[1] 汪钟.现代血栓病学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1997.362～368
[2] 王夔.生命科学中的微量元素(上册)[M].北京：中国计量出版社，1991.144～145
[3] 肖敏，周广嵘.常见元素锌铜铁钙镁的临床检测意义 [J].微量元素与健康研究，1997，14(1)：61
[4] JOHNR J S, ROLNIAK M T.Preliminary chronic toxicity study of copper asprimate [J].Inorganica Chimica Acta,1984,91:131
(2000-04-20收稿), 百拇医药
单位：陆瑛 杨荣 陈静(昆明医学院云南省天然药物药理重点实验室，昆明 650031)；邱红莲 刘伟平 熊惠周(昆明贵金属研究所，昆明 650221)
关键词：阿司匹林铜；铜含量；分布；蓄积；排泄
昆明医学院学报000312 摘要：采用SD大鼠灌胃给予阿司匹林铜10 mg/kg体重，50 mg/kg体重连续90 d，用多通道等离子体光谱仪(ICPQ-1012)测定大鼠血清、脑、肝、肾、脾、粪便的铜含量，并进行主要脏器的病理组织学检查.结果显示：大鼠摄入阿司匹林铜后血清、脑、肝、肾、脾中铜含量与对照组无显著性差异(P>0.05)粪便中铜含量明显高于对照组，有高度显著性差异(P<0.01).病理组织学检查除给药动物肝脏Kupffer's细胞增多外未发现异常，提示口服阿司匹林铜后体内主要脏器未见铜蓄积，摄入过量的铜主要从粪便排出.
, 百拇医药
中图分类号：R 99 文献标识码：A 文章编号：1003-4706(2000)03-0045-04
An Experimental Study on Distribution,Accumulation and Excretion of Copper
in Rats Treated with Oral Copper Aspirin
LU Ying，YANG Rong，CHEN Jing
(Yunnan Pharmacological Laboratory of Natural Products, Kunming Medical College, Kunming 650031)
QU Hong-lian，YANG Yi-kun，XING Hui-zhou
, http://www.100md.com
(Kunming Institute of Precious Metals, Kunming 650221)
Abstract：The S.D rats were orally given Copper Asprin at the doses of 10 mg, 50 mg/kg body weight. By ICPQ-1021 technique, the copper concentration was determined in serum, brain, liver, kidney, spleen and feces. The results showed that the concentrations of copper in serum, brain, liver, kidney and spleen had no significant differences between the treated groups and the control. (P>0.05). The copper concentration in feces was significantly higher than that of the control group(P<0.01). The pathological section showed the Kupper's cells increased in rat liver in the treated groups. It was also suggested that the copper of oral Copper Aspirin did not accumulate in organs and the copper was excreted from feces.
, 百拇医药
Key words：Copper aspirin； Copper concentration distribution； Accumulation； Excretion
近年来许多研究报道：阿司匹林的临床应用日趋广泛，除作为抗风湿性关节炎和类风湿性关节炎的药用于临床外，在治疗急性心肌梗塞的同时加服阿司匹林有理想的疗效，亦可作为冠心病的常规治疗用药.但由于阿司匹林有明显的消化道刺激副作用，常引起腹痛、恶心、呕吐甚至胃肠溃疡出血.研究报道铜与阿司匹林结合后可降低其毒副作用并提高药效.铜 是人体所需微量元素之一，是合成人体30多种酶的原料，但摄入过量铜有害健康.本试验旨在观察大鼠经口摄入阿司匹林铜后，体内铜分布、蓄积及排泄情况，为临床用药的安全性提供科学依据.
1 材料和方法
1.1 材料
阿司匹林铜原药，由昆明贵金属研究所提供，用1.4%聚乙烯醇和5%1，3-丙二醇混合液作为溶媒，将阿司匹林铜配成0.5%和0.1%的混悬液备用，pH5～6.SD大鼠由昆明医学院省级天然药物药理重点实验室提供.
, 百拇医药
1.2 剂量设计分组
将60只大鼠随机分为3组：溶媒对照组，阿司匹林铜高剂量组(50 mg/kg)和低剂量组(10 mg/kg)每组20只动物，另取15只在给药前测大鼠血及主要脏器铜含量作为空白对照.
1.3 血清及主要脏器铜含量测定
分别于给药前、给药1个月、2个月、3个月及停药后1个月各组取5只动物处死，取血、肝、肾、脾、脑及收集粪便，用岛津ICPQ-1012多通道等离子体光谱仪测定铜含量.测定条件：分析线波长324.75 nm；发生器入射功率1.0 kW；反射功率近于零.氩气流量(L/min)：冷却气12.5，辅助气1.0，载气0.9.观察高度15 mm，玻璃气动雾化器，积分时间20 s，每次测量积分3次.
1.4 病理组织学检查
给药后3个月取各组动物的肝、肾、脾、脑进行病理组织学检查.
, 百拇医药
2 结果
给药前血液铜测定含量为(1.01±0.18) μg/g湿重；肝脏为(3.20±0.37) μg/g湿重；肾脏为(5.60±1.80 )μg/g湿重；脾脏为(1.10±0.17) μg/g湿重；脑为(1.90±0.30) μg/g湿重，其中肾脏含量最高，与其它几个脏器比较有显著性差异(P<0.05).
给药后3个月测定动物粪便中铜含量，空白对照组为(25.00±1.00) μg/g湿重；溶剂对照组为(26.00±1.00) μg/g湿重，低剂量组为(97.00±2.00) μg/g湿重；高剂量组动物粪便中铜含量最高，与其他几组比较有高度显著性差异(P<0.01).
给药不同时间血液、肝脏、脾脏和脑组织中铜含量测定结果见表1～5.
表1 阿司匹林铜不同给药时间血液中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
, 百拇医药
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
1.01±0.18
溶剂对照
5
1.35±0.14
1.20±0.10
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1.40±0.30
1.20±0.20
低剂量
5
1.22±0.19
1.15±0.15
1.30±0.30
1.20±0.17
高剂量
5
1.30±0.25
1.20±0.15
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1.30±0.30
1.13±0.14
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表2 阿司匹林铜不同给药时间肝脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
n
给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
3.20±0.37
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溶剂对照
5
3.20±0.14
3.80±0.57
4.20±0.47
4.10±0.40
低剂量
5
3.60±0.32
4.00±0.48
4.20±0.43
3.90±0.45
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高剂量
5
4.10±0.49
4.10±0.39
4.40±0.85
3.80±0.15
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表3 阿司匹林铜不同给药时间肾脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
n
给药前
给药1月
给药2月
, 百拇医药
给药3月
停药后1月
空白对照
15
5.60±1.80
溶剂对照
5
5.20±1.10
6.80±1.10
5.90±0.90
6.30±2.50
低剂量
, 百拇医药 5
4.60±1.30
5.40±1.00
5.60±0.90
6.70±1.20
高剂量
5
6.40±1.10
7.30±2.30
5.90±1.40
6.60±0.90
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.表4 阿司匹林铜不同给药时间脾脏中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
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给药前
给药1月
给药2月
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停药后1月
空白对照
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1.10±0.17
溶剂对照
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1.20±0.90
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低剂量
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1.30±0.40
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1.50±0.20
高剂量
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1.00±0.20
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给药前、不同给药时间剂量间均无显著性差异.表5 阿司匹林铜不同给药时间脑组织中铜含量[(±s)，μg/g湿重] 组别
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给药前
给药1月
给药2月
给药3月
停药后1月
空白对照
15
1.90±0.30
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溶剂对照
5
2.30±0.10
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2.40±0.10
2.10±0.30
低剂量
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2.80±0.60
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2.20±0.10
2.60±0.10
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高剂量
5
2.40±0.50
2.70±0.10
2.40±0.10
2.50±0.10
给药前、不同给药时间与剂量间均无显著性差异.
以上结果显示：给药前大鼠肾脏中铜 含量较血液、肝、脾、脑组织中高，差异有显著性(P<0.05)，不同给药时间及不同给药剂量测定血液、肝、肾、脾、脑组织中的铜含量，给药组与对照组间无显著性差异(P>0.05)，给药3个月后测定粪便铜含量发现高剂量组粪铜含量明显高于低剂量及对照组和溶剂组，有高度显著性差异(P<0.01).
, http://www.100md.com
病理组织学检查显示除给药组大鼠肝脏Kupffer's细胞较对照组增多外，未发现其他病理组织学改变.
3 讨论
近年对阿司匹林的抗血小板聚集及抗栓、溶栓作用研究很多.有报道阿司匹林能抑制TXA2的合成，从而抑制血小板聚集.抗栓治疗中建议服用阿司匹林一次大剂量(500 mg/日),后再连续口服50 mg/日,疗效较好.在急性心肌梗塞治疗基础上加服阿司匹林150～300 mg/日可预防进一步冠脉事件发生.口服阿司匹林150～300 mg/日亦可作为冠心病的常规治疗[1].铜与阿司匹林结合后可降低其毒副作用，并提高药效约20倍[2].铜是人体所需微量元素之一，是构成细胞色素C氧化酶、超氧化歧化酶等多种酶的重要物质，是合成人体30多种酶的重要元素.但如果人体微量元素含量异常或失衡，将会引起多种疾病发生[3].口服阿司匹林铜后是否会引起血清铜增高或蓄积在主要脏器而导致铜在体内失衡是本研究的目的，实验结果显示：给药组与对照组间血液及主要脏器中铜含量无显著性差异(P>0.05).病理组织学检查发现给药组动物Kupffer's细胞增加，这一发现与国外文献报道一致[4].这可能与其吞噬进入肝脏内的铜离子有关.高剂量组粪铜比低剂量和对照组高，有高度显著性差异(P<0.01).证实哺乳动物经口摄入铜，主要排泄是通过分泌胆汁进行的，胆汁中的氨基酸与铜结合后经粪便排出，微量的铜则由尿液排出[2].为进一步证实阿司匹林铜的胆汁分泌排泄过程，有待进行相关的实验观察.
, 百拇医药
基金项目：云南省应用基础研究基金资助项目(94C046Q)
作者简介：陆瑛 (1952～)，女，云南昆明人，副教授，主要从事毒理学研究.
参考文献
[1] 汪钟.现代血栓病学[M].北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1997.362～368
[2] 王夔.生命科学中的微量元素(上册)[M].北京：中国计量出版社，1991.144～145
[3] 肖敏，周广嵘.常见元素锌铜铁钙镁的临床检测意义 [J].微量元素与健康研究，1997，14(1)：61
[4] JOHNR J S, ROLNIAK M T.Preliminary chronic toxicity study of copper asprimate [J].Inorganica Chimica Acta,1984,91:131
(2000-04-20收稿), 百拇医药