栝楼薤白白酒汤抗心肌缺氧缺血处方优选
作者：程秀娟 王乃利 吴波 王敏伟 姚新生
单位：沈阳药科大学中药系，沈阳 110015
关键词：栝楼；薤白；半数有效量；心肌缺氧；心肌缺血
沈阳药科大学学报000522 摘 要 考察了4种组方的栝楼薤白白酒汤提取物抗小鼠心肌缺氧及大鼠心肌缺血作用.结果表明:4种组方对小鼠及大鼠灌胃给药或腹腔注射给药，在两种实验模型中均有明显的拮抗作用.各组方的半数有效量(ED50)做两组比较的显著性检验，证明薤白与栝楼以1∶1.5的组方为最佳组合的处方.
分类号 R965.1；R972
The Selected Effective Prescription of Gualou-xiebai-baijiu-tang on Myocardial Anoxia and Ischemia in Rodents
, 百拇医药
Cheng Xiujuan, Wang Naili, Wu Bo, Wang Minwei, Yao Xinsheng
(Department of Traditional Chinese Medicines, Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract Four effective prescriptions of Gualou-xiebai-baijiu-tang extracts on myocardial anoxia and ischemia were investigated in mice and rats. It was proved that the four prescriptions were effective on myocardial anoxia in mice and myocardial ischemia in rats during the administration by po or ip. Median effective doses(ED50)of the four prescriptions and t-tests among them were estimated. It turned out that the ED50 of the prescription of xiebai/gualou in the ratio of 1 to 1.5 was less than the ratio of 1 to 1, 1 to 2 and 2 to 1, so that the best ratio in the prescription was 1 to 1.5.
, 百拇医药
Key words Trichosanthes kirilowii Maxim.;Allium macrostemon Bge.;ED50;myocardial anoxia;myocardial ischemia
栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.),薤白(Allium macrostemon Bunge) 白酒汤为汉代经典方剂，出自张仲景《金匮要略》,为历代医家用于宣痹通阳，现代临床治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病的基本方.但近代汉方方剂书中记载的栝楼、薤白、白酒的用量配比不一，差别甚大，酒的品种也不同.为了整理并提高我国中医药经典方剂，考证该处方的原料及配比用量、工艺及药效成分，作者用现代科学方法，从原料药选材、提取工艺流程、有效成分质量监控及主要药效实验等方面对该处方进行了系统的研究.根据文献〔1～5〕中栝楼、薤白白酒汤不同组方，以统一的工艺设计制成标准制剂，用药理学方法比较各组方抗心肌缺氧、抗心肌缺血作用，优选出最佳处方，以便进一步研究有效成分、药理作用及作用机理，为该处方成药早日进入临床及市场打基础.
, 百拇医药
1 材料与仪器
1.1 药物
栝楼薤白白酒汤提取物由本校天然药物化学教研室提供.选购标准药材10批，经外观检查，按文献〔1～5〕中薤白栝楼用量配比，大体归纳成4种配比的组方.栝楼、薤白用同一工艺(20倍量60 %乙醇煎煮1 h，过滤，滤液减压浓缩成浸膏)制备，用TLC或HPLC图谱分析并辅以化学反应，制备成标准汤剂浸膏.药效实验按每克浸膏含药材量用生理盐水配成所需浓度.4种组方中薤白与栝楼的配比分别为1∶1.5(1)、1∶1(2)、1∶2(3)、2∶1(4).
盐酸异丙肾上腺素(简称异丙肾,isoprenaline,ISO)上海禾丰药厂生产；垂体后叶素(pituitrin,Pit)，沈阳市生化制药厂生产；戊巴比妥钠，UNION进口，上海化学试剂采购供应部分装；钠石灰，北票矿务局氢氧化钙厂生产.
, http://www.100md.com 1.2 动物
小白鼠，昆明种，雄性，体重(18±2.0)g,沈阳药科大学实验动物中心提供；大白鼠，wistar种，雌雄各半，体重160～190 g,沈阳药科大学动物中心及沈阳化工研究院农药评价中心提供.
1.3 仪器
ECG—6511心电图机,上海光电医用电子仪器有限公司生产.
2 方法与结果
2.1 栝楼薤白白酒汤提取物对异丙肾致小鼠心肌缺氧半数有效量(ED50)测定
小鼠440只，雄性，皮下注射异丙肾20 mg/kg,使小鼠心率加快，按常压低氧法测小鼠心肌缺氧后存活时间〔6〕.4种组方的栝楼薤白白酒汤制出的标准制剂，用灌胃及腹腔注射两种给药途径，求出每种制剂的ED50.每种给药途径共分22组，每组10只小鼠.生理盐水为空白对照组；生理盐水+异丙肾为心肌缺氧模型组；每一组方的栝楼薤白白酒制剂分为5个等比级数剂量+异丙肾组;(灌胃给药各组方剂量的等比级数1、2、3为1∶0.75,4为1∶0.80;腹腔注射给药各组方的等比级数1、3、4为1∶0.75，2为1∶0.84),栝楼薤白白酒制剂灌胃给药40 min后，皮下注射异丙肾；腹腔注射栝楼薤白白酒制剂30 min后, 皮下注射异丙肾，均在15 min后将每只鼠放入选定的330 mL磨口瓶中，瓶内预先放入10 g钠石灰，密封倒置于水中，记录小鼠呼吸停止时间.每一组方抗心肌缺氧的平均有效时间(min)是以自由度=18、t(0.05)=2.101为条件，用t检验公式计算而得. 而后计算每组有效动物数及有效率，按正规法计算每组方抗心肌缺氧半数有效量ED50〔7〕.并将4种栝楼薤白组方的ED50做两两组方间的显著性检验〔7〕，结果见表1.
, 百拇医药
Tab.1 The tests of significance of ED50 among the four prescriptions of extracts of Gualou-xiebai-baijiu-tang on myocardial anoxia by ISO in mice Route of
admini-
stration
Pre-
scription
No.
ED50/
g*kg-1
, 百拇医药
Confidence limits/
g*kg-1
P=0.95
Ratio of mean
confidence limits/%
P=0.95
P1
vs
1
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35.10
28.85～42.65
19.66
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37.84～67.71
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37.24～63.55
27.03
>0.05
>0.05
4
52.02
44.54～60.71
15.54
<0.01
>0.05
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ip
1
17.60
15.10～20.50
15.30
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27.80～34.30
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3
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14.60～25.60
28.50
>0.05
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4
27.20
21.80～33.80
22.10
<0.01
>0.05
<0.01
由表1看出：灌胃给药或腹腔注射给药，4种组方栝楼薤白白酒汤制剂抗小鼠心肌缺氧的ED50中，组方1与3无显著差别，但1显著小于2与4.不同的是腹腔注射给药.3的ED50显著小于4.最佳组方为1，即薤白与栝楼用量之比以1∶1.5为最好.
, http://www.100md.com
2.2 栝楼薤白白酒汤提取物对垂体后叶素致心肌缺血半数有效量(ED50)测定
大白鼠320只，雌雄各半.腹腔注射戊巴比妥钠35 mg/kg,麻醉后，仰位固定.连接肢体导联与胸前导联，记录P波、R波、T波直立导联的心电图.电压1 mV=10 mm,纸速50 mm/s.舌静脉注射垂体后叶素0.8 u/kg,10 s注射完毕,注射后记录0、5、10、15、30 s及1、3、5、8 min时的心电图.正常大鼠注射垂体后叶素0.8 u/kg引起心电图两期变化.第一期0～30 s，ST段抬高，T波高耸，第二期30 s～5 min，呈明显的ST段下移,T波低平，或双向倒置.T波变化为100%,8 min后恢复正常〔6〕.
4种配方的栝楼薤白白酒汤标准制剂，大鼠灌胃及腹腔注射两种途径给药，求出每种组方制剂的ED50.每组10只动物，每种组方按等比级数分成4～5个剂量组(灌胃给药各组方剂量的等比级数1、2、3为1∶0.75，4为1∶0.80,腹腔注射给药各组方剂量的等比级数1为1∶0.70，2为1∶0.80，3、4为1∶0.75).灌胃给药组给生理盐水，麻醉后描记垂体后叶素的心肌缺血心电图，大鼠清醒后2 d，按栝楼薤白白酒汤不同剂量空腹灌胃给药,6 min后麻醉,30 min后静注垂体后叶素，按上述方法记录各期心电图.以未出现T波低平、倒置或双向为有效.计算有效动物数及有效率.
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栝楼薤白白酒汤腹腔注射给药组，在静注垂体后叶素心电图恢复正常后，按每一组方的等比级数剂量腹腔注射30 min后，再次静注垂体后叶素，判断方法及指标同上,按正规统计法计算出各处方组ED50〔7〕,并做两组方间的显著性检验〔7〕.见表2.
由表2看出：4种不同组方的栝楼薤白白酒汤对垂体后叶素致大鼠心肌缺血均有保护作用.灌胃给药组方1、3、4的ED50显著小于2.腹腔注射给药组方1的ED50显著小于2. 1、3、4无显著差异.但两种给药途径均以1的ED50为最小，故为最佳组方.
3 讨论
实验采用异丙肾上腺素致小鼠心肌缺氧及垂体后叶素致大鼠心肌缺血两种实验模型，考察了栝楼薤白白酒汤治疗胸痹的主要药效，其结果与当今临床上治疗心绞痛、冠心病的作用基本一致.以小鼠、大鼠灌胃给药及腹腔注射两种给药途径，运用两种实验模型测定4种配方的栝楼薤白白酒汤组方的ED50,并分析比较其药效，这是定量药理学中比较药效的常用指标.实验结果证明：4种配比的组方，均以组方1的ED50为最小，即薤白与栝楼之比以1∶1.5为最佳组方，其次为3，栝楼比例均大于薤白，若二者比例相等或栝楼比例小于薤白，其药效作用并不能提高.这一结果为避免临床用药配比混乱提供了可靠的依据.另一方面也证明了本组方无论灌胃(口服)或注射用药，均能产生同样的药效作用，为改进本组方的剂型提供了有力的证据.Tab.2 Tests of significance of ED50 between the four prescriptions of extracts of gualou-xiebai baijiu-tang on myocardial ischemia by pit in rats. Route of
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15.49～32.65
38.17
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1
19.90
13.10～23.90
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27.10
2
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24.90～37.50
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16.10～26.00
22.00
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24.60
17.30～29.70
25.20
>0.05
>0.05
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致谢 参加本实验的有本校1995、1996级学生陈先武、王琰、李大恺、员国萍、姜笑笈等.
国家新药研究基金项目，No.93-44-N-22
参考文献
1，许鸿源,许照信.常用汉方方剂图解.台北:新医药出版社印行，1984.321
, http://www.100md.com
2，戴新民.中国方药学.台北:启业书局印行,1985.558
3，上海中医学院中药系方剂学、中药学教研室.中医方剂临床手册.上海:上海科学技术出版社,1982.125
4，矢数道明[日].临床应用汉方处方解说.李文瑞等译.北京:人民卫生出版社,1983.58
5，周凤悟主编.古今药方纵横.北京:人民卫生出版社,1987.197
6，徐叔云,卞如濂,陈修主编.药理学实验方法.北京：人民卫生出版社,1982.711～713
7，孙瑞元主编.定量药理学.北京:人民卫生出版社,1987.169～176,216
收稿日期:2000-03-06, 百拇医药
单位：沈阳药科大学中药系，沈阳 110015
关键词：栝楼；薤白；半数有效量；心肌缺氧；心肌缺血
沈阳药科大学学报000522 摘 要 考察了4种组方的栝楼薤白白酒汤提取物抗小鼠心肌缺氧及大鼠心肌缺血作用.结果表明:4种组方对小鼠及大鼠灌胃给药或腹腔注射给药，在两种实验模型中均有明显的拮抗作用.各组方的半数有效量(ED50)做两组比较的显著性检验，证明薤白与栝楼以1∶1.5的组方为最佳组合的处方.
分类号 R965.1；R972
The Selected Effective Prescription of Gualou-xiebai-baijiu-tang on Myocardial Anoxia and Ischemia in Rodents
, 百拇医药
Cheng Xiujuan, Wang Naili, Wu Bo, Wang Minwei, Yao Xinsheng
(Department of Traditional Chinese Medicines, Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract Four effective prescriptions of Gualou-xiebai-baijiu-tang extracts on myocardial anoxia and ischemia were investigated in mice and rats. It was proved that the four prescriptions were effective on myocardial anoxia in mice and myocardial ischemia in rats during the administration by po or ip. Median effective doses(ED50)of the four prescriptions and t-tests among them were estimated. It turned out that the ED50 of the prescription of xiebai/gualou in the ratio of 1 to 1.5 was less than the ratio of 1 to 1, 1 to 2 and 2 to 1, so that the best ratio in the prescription was 1 to 1.5.
, 百拇医药
Key words Trichosanthes kirilowii Maxim.;Allium macrostemon Bge.;ED50;myocardial anoxia;myocardial ischemia
栝楼(Trichosanthes kirilowii Maxim.),薤白(Allium macrostemon Bunge) 白酒汤为汉代经典方剂，出自张仲景《金匮要略》,为历代医家用于宣痹通阳，现代临床治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病的基本方.但近代汉方方剂书中记载的栝楼、薤白、白酒的用量配比不一，差别甚大，酒的品种也不同.为了整理并提高我国中医药经典方剂，考证该处方的原料及配比用量、工艺及药效成分，作者用现代科学方法，从原料药选材、提取工艺流程、有效成分质量监控及主要药效实验等方面对该处方进行了系统的研究.根据文献〔1～5〕中栝楼、薤白白酒汤不同组方，以统一的工艺设计制成标准制剂，用药理学方法比较各组方抗心肌缺氧、抗心肌缺血作用，优选出最佳处方，以便进一步研究有效成分、药理作用及作用机理，为该处方成药早日进入临床及市场打基础.
, 百拇医药
1 材料与仪器
1.1 药物
栝楼薤白白酒汤提取物由本校天然药物化学教研室提供.选购标准药材10批，经外观检查，按文献〔1～5〕中薤白栝楼用量配比，大体归纳成4种配比的组方.栝楼、薤白用同一工艺(20倍量60 %乙醇煎煮1 h，过滤，滤液减压浓缩成浸膏)制备，用TLC或HPLC图谱分析并辅以化学反应，制备成标准汤剂浸膏.药效实验按每克浸膏含药材量用生理盐水配成所需浓度.4种组方中薤白与栝楼的配比分别为1∶1.5(1)、1∶1(2)、1∶2(3)、2∶1(4).
盐酸异丙肾上腺素(简称异丙肾,isoprenaline,ISO)上海禾丰药厂生产；垂体后叶素(pituitrin,Pit)，沈阳市生化制药厂生产；戊巴比妥钠，UNION进口，上海化学试剂采购供应部分装；钠石灰，北票矿务局氢氧化钙厂生产.
, http://www.100md.com 1.2 动物
小白鼠，昆明种，雄性，体重(18±2.0)g,沈阳药科大学实验动物中心提供；大白鼠，wistar种，雌雄各半，体重160～190 g,沈阳药科大学动物中心及沈阳化工研究院农药评价中心提供.
1.3 仪器
ECG—6511心电图机,上海光电医用电子仪器有限公司生产.
2 方法与结果
2.1 栝楼薤白白酒汤提取物对异丙肾致小鼠心肌缺氧半数有效量(ED50)测定
小鼠440只，雄性，皮下注射异丙肾20 mg/kg,使小鼠心率加快，按常压低氧法测小鼠心肌缺氧后存活时间〔6〕.4种组方的栝楼薤白白酒汤制出的标准制剂，用灌胃及腹腔注射两种给药途径，求出每种制剂的ED50.每种给药途径共分22组，每组10只小鼠.生理盐水为空白对照组；生理盐水+异丙肾为心肌缺氧模型组；每一组方的栝楼薤白白酒制剂分为5个等比级数剂量+异丙肾组;(灌胃给药各组方剂量的等比级数1、2、3为1∶0.75,4为1∶0.80;腹腔注射给药各组方的等比级数1、3、4为1∶0.75，2为1∶0.84),栝楼薤白白酒制剂灌胃给药40 min后，皮下注射异丙肾；腹腔注射栝楼薤白白酒制剂30 min后, 皮下注射异丙肾，均在15 min后将每只鼠放入选定的330 mL磨口瓶中，瓶内预先放入10 g钠石灰，密封倒置于水中，记录小鼠呼吸停止时间.每一组方抗心肌缺氧的平均有效时间(min)是以自由度=18、t(0.05)=2.101为条件，用t检验公式计算而得. 而后计算每组有效动物数及有效率，按正规法计算每组方抗心肌缺氧半数有效量ED50〔7〕.并将4种栝楼薤白组方的ED50做两两组方间的显著性检验〔7〕，结果见表1.
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Tab.1 The tests of significance of ED50 among the four prescriptions of extracts of Gualou-xiebai-baijiu-tang on myocardial anoxia by ISO in mice Route of
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No.
ED50/
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Confidence limits/
g*kg-1
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Ratio of mean
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P=0.95
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vs
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P2
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35.10
28.85～42.65
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14.60～25.60
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21.80～33.80
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由表1看出：灌胃给药或腹腔注射给药，4种组方栝楼薤白白酒汤制剂抗小鼠心肌缺氧的ED50中，组方1与3无显著差别，但1显著小于2与4.不同的是腹腔注射给药.3的ED50显著小于4.最佳组方为1，即薤白与栝楼用量之比以1∶1.5为最好.
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2.2 栝楼薤白白酒汤提取物对垂体后叶素致心肌缺血半数有效量(ED50)测定
大白鼠320只，雌雄各半.腹腔注射戊巴比妥钠35 mg/kg,麻醉后，仰位固定.连接肢体导联与胸前导联，记录P波、R波、T波直立导联的心电图.电压1 mV=10 mm,纸速50 mm/s.舌静脉注射垂体后叶素0.8 u/kg,10 s注射完毕,注射后记录0、5、10、15、30 s及1、3、5、8 min时的心电图.正常大鼠注射垂体后叶素0.8 u/kg引起心电图两期变化.第一期0～30 s，ST段抬高，T波高耸，第二期30 s～5 min，呈明显的ST段下移,T波低平，或双向倒置.T波变化为100%,8 min后恢复正常〔6〕.
4种配方的栝楼薤白白酒汤标准制剂，大鼠灌胃及腹腔注射两种途径给药，求出每种组方制剂的ED50.每组10只动物，每种组方按等比级数分成4～5个剂量组(灌胃给药各组方剂量的等比级数1、2、3为1∶0.75，4为1∶0.80,腹腔注射给药各组方剂量的等比级数1为1∶0.70，2为1∶0.80，3、4为1∶0.75).灌胃给药组给生理盐水，麻醉后描记垂体后叶素的心肌缺血心电图，大鼠清醒后2 d，按栝楼薤白白酒汤不同剂量空腹灌胃给药,6 min后麻醉,30 min后静注垂体后叶素，按上述方法记录各期心电图.以未出现T波低平、倒置或双向为有效.计算有效动物数及有效率.
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栝楼薤白白酒汤腹腔注射给药组，在静注垂体后叶素心电图恢复正常后，按每一组方的等比级数剂量腹腔注射30 min后，再次静注垂体后叶素，判断方法及指标同上,按正规统计法计算出各处方组ED50〔7〕,并做两组方间的显著性检验〔7〕.见表2.
由表2看出：4种不同组方的栝楼薤白白酒汤对垂体后叶素致大鼠心肌缺血均有保护作用.灌胃给药组方1、3、4的ED50显著小于2.腹腔注射给药组方1的ED50显著小于2. 1、3、4无显著差异.但两种给药途径均以1的ED50为最小，故为最佳组方.
3 讨论
实验采用异丙肾上腺素致小鼠心肌缺氧及垂体后叶素致大鼠心肌缺血两种实验模型，考察了栝楼薤白白酒汤治疗胸痹的主要药效，其结果与当今临床上治疗心绞痛、冠心病的作用基本一致.以小鼠、大鼠灌胃给药及腹腔注射两种给药途径，运用两种实验模型测定4种配方的栝楼薤白白酒汤组方的ED50,并分析比较其药效，这是定量药理学中比较药效的常用指标.实验结果证明：4种配比的组方，均以组方1的ED50为最小，即薤白与栝楼之比以1∶1.5为最佳组方，其次为3，栝楼比例均大于薤白，若二者比例相等或栝楼比例小于薤白，其药效作用并不能提高.这一结果为避免临床用药配比混乱提供了可靠的依据.另一方面也证明了本组方无论灌胃(口服)或注射用药，均能产生同样的药效作用，为改进本组方的剂型提供了有力的证据.Tab.2 Tests of significance of ED50 between the four prescriptions of extracts of gualou-xiebai baijiu-tang on myocardial ischemia by pit in rats. Route of
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No.
ED50/
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Confidence limits/
g*kg-1
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致谢 参加本实验的有本校1995、1996级学生陈先武、王琰、李大恺、员国萍、姜笑笈等.
国家新药研究基金项目，No.93-44-N-22
参考文献
1，许鸿源,许照信.常用汉方方剂图解.台北:新医药出版社印行，1984.321
, http://www.100md.com
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收稿日期:2000-03-06, 百拇医药