St.Thomas Ⅱ停搏液pH值对兔未成熟心肌的影响
梅运清 龙村 程邦昌
摘 要 目的 探讨St.Thomas Ⅱ晶体停搏液pH值对兔未成熟心肌的影响。方法 采用Langendorff离体灌注装置，St.Thomas Ⅱ晶体停搏液pH值分别为5.5、6.0、6.5、7.0、7.2、7.8、8.6时，观察7～14 d幼兔离体灌注心脏血流动力学和心肌酶的变化。结果 pH值为6.5、7.0和7.2时，主动脉流量(AF)、冠状动脉流量(CF)和心输出量(CO)恢复率与pH值为7.8相比，差异有显著性(P<0.05)。心肌酶漏出少(P<0.05)，以pH值为7.0时为最佳(P<0.01)。结论 未成熟心肌保护的晶体停搏液pH偏酸性时效果比较满意。
关键词：晶体停搏液 离体灌注
我们以离体灌注未成熟兔心为研究对象，通过改变St.Thomas Ⅱ心肌保护液pH值，观察兔心功能与心肌酶的改变，探讨较理想的适合于未成熟心肌的心肌保护液pH值，现将结果报道如下。 材料与方法
, 百拇医药
1.实验仪器与试剂：十二导生理记录仪(Macintosh,Quadra610,Japan)；Stockert血泵(Germany)；低温恒温器、pH酸度仪(上海第二分析仪器厂)；混合气(体积分数之比为O2∶CO2=95%∶5%)；离体心灌注装置根据Neely介绍的方法设计改进。心停搏液和pH值试剂均为国产分析纯试剂；Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液的成分为：118.5 mmol/L NaCl、25.0 mmol/L NaCl、4.8 mmol/L KCl、1.2 mmol/L MgSO4.7H2O、1.8 mmol/L CaCl2.2H2O、11.0 mmol/L葡萄糖、1.2 mmol/L KH2PO4,pH为7.4±0.5。St.Thomas Ⅱ的成分为：100.0 mmol/L NaCl、10.0 mmol/L NaHCO3、 16.0 mmol/L KCl、16.0 mmol/L MgCl2.6H2O、1.2 mmol/L CaCl2.2H2O,pH为7.80±0.02。
, 百拇医药
2.动物模型的建立：实验用幼兔为本校实验动物中心提供，体重180～250 g，兔龄7～14 d，以戊巴比妥钠腹腔麻醉(50 mg/kg体重)，股静脉肝素化(150 IU/kg体重)，快速开胸取出心脏，浸入4℃生理盐水，立即插管行Langendorff灌注，初始灌注用经混合气改良的Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液，温度37℃，主动脉灌注压为60 cm H\-2O(1 cm H2O=0.098 kPa)，于肺动脉根部剪开以保证冠脉回流液通畅，结扎肺静脉，上、下腔静脉，剪开左心耳，插入左房灌注管，立即将心脏移入保温缸内。主动脉灌注15 min,开启左房灌注管，阻断主动脉灌注管，转为工作模型(左房灌注压为14 cm H2O)，稳定后同步收集主动脉流量(AF)、冠状动脉流量(CF)，计算心输出量(CO,CO=AF+CF)，根据心电图计算心率(HR)。做功30 min后，关闭左房灌注管，经主动脉根部灌注4 ℃ St.Thomas Ⅱ停搏液，灌注压力为60 cm H\-2O，2 min内灌注完毕，心脏保温缸内置冷生理盐水，启动低温恒温器，使恒温器的温度恒定在14℃。心脏停搏120 min。120 min后，灌注装置复温至37℃，开放主动脉，以Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液灌注15 min，收集冠脉回流液，以测定心肌肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)，再转为做功模型，工作30 min，测定心功能指标，每个心脏均做为自身对照。
, 百拇医药
表1 各组幼兔血流动力学结果(X±s)
pH值
AF
CF
CO
基础值(ml/min)
恢复率(%)
基础值(ml/min)
恢复率(%)
基础值(ml/min)
恢复率(%)
5.5
, 百拇医药
29.3±6.3
76.4±3.4
5.7±0.2
70.3±3.1
24.3±4.8
74.6±4.6
6.0
28.5±4.7
84.2±4.8
6.2±0.4
78.2±4.6
26.1±3.5
, 百拇医药
81.2±4.0
6.5
35.0±4.6
86.2±3.3*
8.2±0.3
80.2±3.7*
38.6±5.2
85.3±6.3*
7.0
38.0±2.6
96.5±5.1+
, 百拇医药
8.1±0.8
86.9±4.5+
42.3±4.3
91.4±3.9+
7.2
37.0±3.4
88.6±4.4*
9.3±0.6
89.7±4.1+
38.9±6.3
90.6±2.8+
, 百拇医药
7.8
31.0±2.6
72.6±6.2
7.1±0.4
75.2±3.2
27.2±4.1
72.8±2.7
8.6
21.0±6.2
23.3±6.1+
6.2±0.3
76.4±4.1
, http://www.100md.com
10.4±5.1
29.8±8.2+
注：与pH值7.8比较，*P<0.05，+P<0.01
3.实验分组：将42只幼兔分为7组，实验时St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值分别设定为5.5、6.0、6.5、7.0、7.3、7.8、8.6，以pH值7.8组为对照组。St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值用NaOH/HCl滴定至所需的设定值，所有pH测定用pH酸度仪，并用已知pH值的标准仪在室温下校正，实验前检测温度对St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值的影响，检测点为14℃、37℃，每次测定前pH电极均用已知的pH标准仪校正。
4.统计学处理：所有数据均以均数±标准差(X±s)表示，进行t检验。
, 百拇医药
结 果
从表1、2可以看出，停搏前心功能基础值各组间差异无显著性(P>0.05)，缺血120 min后，心率各组间差异无显著性(P>0.05)，pH值为7.0时心功能恢复最佳，其AF、CF、CO分别为基础值的(96.5±5.1)%、(86.9±4.5)%、(91.4±3.9)%，与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.01)，心肌酶漏出最少。在pH值从6.5～7.2时，心功能AF、CF、CO，心肌酶漏出量与对照pH值为7.8相比差异亦有显著性(P<0.05)。
表2 各组幼兔心肌酶检测结果(U/L，X±s)
pH值
LDH
CK-MB
5.5
, http://www.100md.com
11.61±4.53
18.36±4.82
6.0
12.43±3.91
19.54±6.05
6.5
4.98±2.14*
14.16±3.42*
7.0
4.71±1.82+
6.24±1.16+
, 百拇医药
7.2
5.69±3.22*
11.21±3.17*
7.8
13.54±5.16
21.47±6.25
8.6
16.26±7.92
24.84±8.63
注：与pH值7.8比较，*P<0.05，+P<0.01讨 论
, http://www.100md.com 本研究结果显示，弱酸性的St.Thomas Ⅱ停搏液可促进未成熟兔心肌低温缺血心功能的恢复，以pH值7.0时最佳，与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.01)。这与Baker等[1]的研究结果相似。本研究结果显示，兔未成熟心肌在低温缺血时可耐受较大范围的pH值变化。当St.Thomas Ⅱ停搏液的pH从6.5～7.2时，离体灌注兔未成熟心功能与对照组pH值从6.5～7.2时；离体灌注兔未成熟心功能与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.05，P<0.01)。本研究结果还发现，兔未成熟心肌在pH值7.0时心肌酶LDH、CK-MB的漏出最少，与pH值7.8相比差异有非常显著性(P<0.01)。pH值在6.5～7.2范围变化时，心肌酶的漏出与对照组pH值7.8亦有显著性(P<0.05)，说明在此pH值变化范围内心肌能得到较好的保护。总之，对未成熟心肌心停搏液的pH值，我们认为可能以偏酸性为宜，但其理想的pH值及其机制尚待进一步研究。
作者单位：梅运清(430060武汉，湖北医科大学附属第一医院心胸外科)
程邦昌(430060武汉，湖北医科大学附属第一医院心胸外科)
龙村(中国协和医科大学阜外心血管病医院麻醉体外循环科)
参考文献
[1]Baker JE,Boerboon LE,Olinger GN,et al.Age and protection of the ischemic myocardium is alkaline cardioplegia appropriate Ann Thorac Surg, 1993,55:747-749., 百拇医药
摘 要 目的 探讨St.Thomas Ⅱ晶体停搏液pH值对兔未成熟心肌的影响。方法 采用Langendorff离体灌注装置，St.Thomas Ⅱ晶体停搏液pH值分别为5.5、6.0、6.5、7.0、7.2、7.8、8.6时，观察7～14 d幼兔离体灌注心脏血流动力学和心肌酶的变化。结果 pH值为6.5、7.0和7.2时，主动脉流量(AF)、冠状动脉流量(CF)和心输出量(CO)恢复率与pH值为7.8相比，差异有显著性(P<0.05)。心肌酶漏出少(P<0.05)，以pH值为7.0时为最佳(P<0.01)。结论 未成熟心肌保护的晶体停搏液pH偏酸性时效果比较满意。
关键词：晶体停搏液 离体灌注
我们以离体灌注未成熟兔心为研究对象，通过改变St.Thomas Ⅱ心肌保护液pH值，观察兔心功能与心肌酶的改变，探讨较理想的适合于未成熟心肌的心肌保护液pH值，现将结果报道如下。 材料与方法
, 百拇医药
1.实验仪器与试剂：十二导生理记录仪(Macintosh,Quadra610,Japan)；Stockert血泵(Germany)；低温恒温器、pH酸度仪(上海第二分析仪器厂)；混合气(体积分数之比为O2∶CO2=95%∶5%)；离体心灌注装置根据Neely介绍的方法设计改进。心停搏液和pH值试剂均为国产分析纯试剂；Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液的成分为：118.5 mmol/L NaCl、25.0 mmol/L NaCl、4.8 mmol/L KCl、1.2 mmol/L MgSO4.7H2O、1.8 mmol/L CaCl2.2H2O、11.0 mmol/L葡萄糖、1.2 mmol/L KH2PO4,pH为7.4±0.5。St.Thomas Ⅱ的成分为：100.0 mmol/L NaCl、10.0 mmol/L NaHCO3、 16.0 mmol/L KCl、16.0 mmol/L MgCl2.6H2O、1.2 mmol/L CaCl2.2H2O,pH为7.80±0.02。
, 百拇医药
2.动物模型的建立：实验用幼兔为本校实验动物中心提供，体重180～250 g，兔龄7～14 d，以戊巴比妥钠腹腔麻醉(50 mg/kg体重)，股静脉肝素化(150 IU/kg体重)，快速开胸取出心脏，浸入4℃生理盐水，立即插管行Langendorff灌注，初始灌注用经混合气改良的Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液，温度37℃，主动脉灌注压为60 cm H\-2O(1 cm H2O=0.098 kPa)，于肺动脉根部剪开以保证冠脉回流液通畅，结扎肺静脉，上、下腔静脉，剪开左心耳，插入左房灌注管，立即将心脏移入保温缸内。主动脉灌注15 min,开启左房灌注管，阻断主动脉灌注管，转为工作模型(左房灌注压为14 cm H2O)，稳定后同步收集主动脉流量(AF)、冠状动脉流量(CF)，计算心输出量(CO,CO=AF+CF)，根据心电图计算心率(HR)。做功30 min后，关闭左房灌注管，经主动脉根部灌注4 ℃ St.Thomas Ⅱ停搏液，灌注压力为60 cm H\-2O，2 min内灌注完毕，心脏保温缸内置冷生理盐水，启动低温恒温器，使恒温器的温度恒定在14℃。心脏停搏120 min。120 min后，灌注装置复温至37℃，开放主动脉，以Krebs-Henseleit重碳酸盐缓冲液灌注15 min，收集冠脉回流液，以测定心肌肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)，再转为做功模型，工作30 min，测定心功能指标，每个心脏均做为自身对照。
, 百拇医药
表1 各组幼兔血流动力学结果(X±s)
pH值
AF
CF
CO
基础值(ml/min)
恢复率(%)
基础值(ml/min)
恢复率(%)
基础值(ml/min)
恢复率(%)
5.5
, 百拇医药
29.3±6.3
76.4±3.4
5.7±0.2
70.3±3.1
24.3±4.8
74.6±4.6
6.0
28.5±4.7
84.2±4.8
6.2±0.4
78.2±4.6
26.1±3.5
, 百拇医药
81.2±4.0
6.5
35.0±4.6
86.2±3.3*
8.2±0.3
80.2±3.7*
38.6±5.2
85.3±6.3*
7.0
38.0±2.6
96.5±5.1+
, 百拇医药
8.1±0.8
86.9±4.5+
42.3±4.3
91.4±3.9+
7.2
37.0±3.4
88.6±4.4*
9.3±0.6
89.7±4.1+
38.9±6.3
90.6±2.8+
, 百拇医药
7.8
31.0±2.6
72.6±6.2
7.1±0.4
75.2±3.2
27.2±4.1
72.8±2.7
8.6
21.0±6.2
23.3±6.1+
6.2±0.3
76.4±4.1
, http://www.100md.com
10.4±5.1
29.8±8.2+
注：与pH值7.8比较，*P<0.05，+P<0.01
3.实验分组：将42只幼兔分为7组，实验时St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值分别设定为5.5、6.0、6.5、7.0、7.3、7.8、8.6，以pH值7.8组为对照组。St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值用NaOH/HCl滴定至所需的设定值，所有pH测定用pH酸度仪，并用已知pH值的标准仪在室温下校正，实验前检测温度对St.Thomas Ⅱ停搏液的pH值的影响，检测点为14℃、37℃，每次测定前pH电极均用已知的pH标准仪校正。
4.统计学处理：所有数据均以均数±标准差(X±s)表示，进行t检验。
, 百拇医药
结 果
从表1、2可以看出，停搏前心功能基础值各组间差异无显著性(P>0.05)，缺血120 min后，心率各组间差异无显著性(P>0.05)，pH值为7.0时心功能恢复最佳，其AF、CF、CO分别为基础值的(96.5±5.1)%、(86.9±4.5)%、(91.4±3.9)%，与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.01)，心肌酶漏出最少。在pH值从6.5～7.2时，心功能AF、CF、CO，心肌酶漏出量与对照pH值为7.8相比差异亦有显著性(P<0.05)。
表2 各组幼兔心肌酶检测结果(U/L，X±s)
pH值
LDH
CK-MB
5.5
, http://www.100md.com
11.61±4.53
18.36±4.82
6.0
12.43±3.91
19.54±6.05
6.5
4.98±2.14*
14.16±3.42*
7.0
4.71±1.82+
6.24±1.16+
, 百拇医药
7.2
5.69±3.22*
11.21±3.17*
7.8
13.54±5.16
21.47±6.25
8.6
16.26±7.92
24.84±8.63
注：与pH值7.8比较，*P<0.05，+P<0.01讨 论
, http://www.100md.com 本研究结果显示，弱酸性的St.Thomas Ⅱ停搏液可促进未成熟兔心肌低温缺血心功能的恢复，以pH值7.0时最佳，与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.01)。这与Baker等[1]的研究结果相似。本研究结果显示，兔未成熟心肌在低温缺血时可耐受较大范围的pH值变化。当St.Thomas Ⅱ停搏液的pH从6.5～7.2时，离体灌注兔未成熟心功能与对照组pH值从6.5～7.2时；离体灌注兔未成熟心功能与对照组pH值7.8相比差异有显著性(P<0.05，P<0.01)。本研究结果还发现，兔未成熟心肌在pH值7.0时心肌酶LDH、CK-MB的漏出最少，与pH值7.8相比差异有非常显著性(P<0.01)。pH值在6.5～7.2范围变化时，心肌酶的漏出与对照组pH值7.8亦有显著性(P<0.05)，说明在此pH值变化范围内心肌能得到较好的保护。总之，对未成熟心肌心停搏液的pH值，我们认为可能以偏酸性为宜，但其理想的pH值及其机制尚待进一步研究。
作者单位：梅运清(430060武汉，湖北医科大学附属第一医院心胸外科)
程邦昌(430060武汉，湖北医科大学附属第一医院心胸外科)
龙村(中国协和医科大学阜外心血管病医院麻醉体外循环科)
参考文献
[1]Baker JE,Boerboon LE,Olinger GN,et al.Age and protection of the ischemic myocardium is alkaline cardioplegia appropriate Ann Thorac Surg, 1993,55:747-749., 百拇医药