广东省德国小蠊对杀虫剂的抗药性调查
林立丰 卢文成 蔡松武 刘礼平
摘 要 目的：了解广东省德国小蠊对常用杀虫剂的抗药性，指导科学、合理使用杀虫剂。方法：药膜接触法。结果：野外采集5个品系德国小蠊与敏感品系比较，对氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗性系数分别为1.99～20.34、1.62～10.28，对毒死蜱、残杀威的抗性系数分别为0.96～3.42、1.28～3.88。其中肇庆及茂名地区野外种群均对氯氰菊酯、溴氰菊酯产生了较高抗性。结论：广东省德国小蠊对4种杀虫剂的敏感性及抗药性不一，其化学防制须选择适当的杀虫剂。
关键词：德国小蠊 抗药性
自1953年美国报道德国小蠊对林丹、DDT产生抗药性以来，国外有较多关于德国小蠊对有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的报道〔1-2〕。80年代以来，我国部分省市开展蜚蠊抗性监测工作〔3-4〕，但我省未见这方面的监测研究报告。目前，化学防制仍是最重要的防制手段。为指导科学、合理使用杀虫剂， 1997～1998年在我省东、南、西、北、中5个城市市区采集德国小蠊野外品种，测定对常用杀虫剂毒死蜱、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗药性。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 药物 96.2%毒死蜱(Chlorpyrifos)、92%氯氰菊酯(Cypermethrin)，由印度米苏工业有限公司提供；98%溴氰菊酯(Deltamethrin)，由艾格福公司提供；96%残杀威(Propoxur)，由湖南化工研究院提供。将96.2%毒死蜱配制成1.0%的丙酮标准溶液；98%溴氰菊酯、92%氯氰菊酯、96%残杀威分别配制成0.5%的丙酮标准溶液。
1.2 供试昆虫 从我省东、南、西、北、中的汕头(ST)、深圳(SZ)、茂名(MM)、肇庆(ZQ)、广州(GZ)5个监测点分别采集德国小蠊成虫或若虫，经培养1代后，取2～3周雄性成虫进行测试。德国小蠊敏感品种(S)，引自军事医学科学院微生物流行病研究所。
1.3 器械 500ml广口瓶及500ml饲养瓶;人工气候箱(珠江牌LRH-Z250-GS型)，广东省医疗器械厂生产。
, http://www.100md.com
1.4 方法 采用500ml广口瓶药膜接触法〔2〕。将标准溶液用丙酮稀释20倍，取2.5ml于瓶中，将瓶缓慢转动，使药液均匀沾布在瓶内壁形成药膜，晾干待用。以丙酮溶液作空白对照。在瓶颈内涂一层凡士林-液体石蜡防止蜚蠊逃脱，再将10只试虫加入瓶内，每隔2～5min观察被击倒数，直到95%试虫被击倒后，将试虫移入清洁饲养瓶内，置于人工气候箱中饲养，分别观察24、48、72h死亡率；试验重复5次，同时设空白对照。如对照组击倒率、死亡率>20%，则试验重做，若对照组击倒率、死亡率≤20%，则用Abbott公式校正。用机值法统计试虫的LT50。抗性系数=野外品系LT50/敏感品系LT50。试验温度25±1℃,相对湿度65%±10%。
2 结果与分折
广东省德国小蠊抗药性调查结果见表1及图1。
表1显示：德国小蠊对毒死蜱抗性系数<2.0的有ST、GZ、SZ品系， 2.0～<5.0的有MM、SQ品系；对残杀威抗性系数<2.0的有ST、GZ、SZ品系， 2.0～<5.0的有MM、SQ品系；对氯氰菊酯抗性系数2.0～<5.0的有ST、GZ品系，5.0～<10.0的有SZ品系，≥10.0有MM、SQ品系；对溴氰菊酯抗性系数<2.0的有ST、SZ品系，2.0～<5.0的有GZ品系，5.0～<10.0的有SQ品系，≥10.0有MM品系。
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3 讨论
蜚蠊抗药性监测方法目前尚未统一，主要有微量点滴法、多剂量药膜法及WHO推荐的果酱瓶药膜法。MILIO〔5〕曾对3种方法进行比较，同一种群的德国小蠊对毒死蜱的抗性用点滴法测定，抗性倍数为14.09,用果酱瓶药膜法测定抗性倍数为1.99，即果酱瓶药膜法抗性倍数为2.0时，蜚蠊已产生抗药性。美国学者D.G.Cochran〔2〕监测45个种群的德国小蠊对12种杀虫剂的抗药性，认为抗性系数<2，表示敏感或有弱的耐药；抗性系数>2，为有抗性；抗性系数>10，已产生高度抗性。茂名及肇庆市两个监测点蜚蠊对菊酯类已产生中度至高度抗性，这与经常使用该药有关，亦与实际采用菊酯类药物防制效果不佳的现象相符合。汕头市蜚蠊的抗药性不明显，与开展防制工作较晚有关。从剂量反应关系曲线看，各野外品系剂量反应关系曲线的b值明显比敏感品系小，说明存在敏感与耐药的杂合子，有抗性株存在。建议茂名及肇庆两个点停用氯氰菊酯及溴氰菊酯，选用较敏感的有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂，或用物理方法防制；其他点也要有计划地交替使用各类杀虫剂。
, 百拇医药
图1 广东省蜚蠊对常用杀虫剂的抗性
表1 广东省德国小蠊5个品系对常用杀虫剂的抗药性调查
杀 虫 剂
试虫品系
LT50及95%可信限(min)
回归方程式
抗性系数
毒死蜱
S
23.27(21.70～24.95)
Y=-5.69+7.82X
, 百拇医药
GZ
39.14(35.41～43.26)
Y=0.11+3.07X
1.68
MM
56.35(53.54～59.30)
Y=-7.56+7.18X
2.42
ST
34.10(37.63～36.76)
Y=-1.45+4.22X
, http://www.100md.com 1.47
SQ
105.29(99.28～111.67)
Y=-3.26+4.09X
4.52
SZ
29.59(27.29～32.08)
Y=-1.10+4.15X
1.27
残杀威
S
10.81(10.11～11.33)
, 百拇医药
Y=-11.12+15.59X
GZ
17.71(16.70～18.75)
Y=-7.14+9.23X
1.64
MM
29.25(27.30～31.34)
Y=-2.55+5.15X
2.71
ST
14.05(13.31～14.83)
, 百拇医药
Y=-4.01+7.85X
1.30
SQ
40.56(36.75～44.77)
Y=-0.46+3.40X
3.75
SZ
13.83(12.64～15.12)
Y=-1.90+6.05X
1.28
氯氰菊酯
S
, 百拇医药
5.43(4.95～5.96)
Y=-0.46+7.43X
GZ
22.66(20.44～25.12)
Y=1.02+2.94X
4.17
MM
94.62(88.61～101.03)
Y=-2.28+3.68X
17.43
ST
, 百拇医药 11.00(9.99～12.10)
Y=1.74+3.13X
2.03
SQ
107.79(101.63～114.31)
Y=-2.75+3.81X
19.85
SZ
29.46(26.54～32.70)
Y=0.75+2.89X
5.43
, 百拇医药 溴氰菊酯
S
5.87(5.47～6.30)
Y=-3.72+11.35X
GZ
17.84(16.05～19.82)
Y=0.60+3.52X
3.04
MM
61.26(56.79～66.09)
Y=-1.25+3.50X
10.44
, 百拇医药
ST
9.16(8.72～10.71)
Y=1.99+3.06X
1.56
SQ
44.69(40.54～49.26)
Y=-0.24+3.18X
7.61
SZ
11.59(9.98～13.46)
Y=1.83+2.98X
1.97
, http://www.100md.com
蜚蠊的活动范围相对较稳定，同地区不同单位使用杀虫剂的频率不同，抗药程度亦可能不同，建议使用杀虫剂前简单测定所用药物的敏感性。
蜚蠊抗药性监测方法中点滴法结果精确，但操作较繁琐，使用虫量多；果酱瓶药膜法简单快捷，使用虫量少，易操作，适于基层单位应用。
第一作者简介：男，1965年生，汉族，毕业于广东医药学院，医学学士，副主任医师，科副主任
作者单位：林立丰(广东省卫生防疫站 广州510300)
卢文成(广东省卫生防疫站 广州510300)
蔡松武(广东省卫生防疫站 广州510300)
刘礼平(广东省卫生防疫站 广州510300)
, http://www.100md.com
参考文献
1，Anon. Resistance of Vectors and Reservoirs of Disease to Pesticides. WHO Tech. Rep. 1976, 585∶88.
2，Cochran DG. Monitoring for Insecticide Resistance in Field-Collected Strains of the German Cockroach(Dictyoptera: Blattellidae).J.Econ. Entomol.1989,82(2)∶336-341.
3，曾晓？,柯海萍,胡建波，等.北京市区德国小蠊对4种杀虫剂的抗性测定. 中国媒介生物学及控制杂志，1998，9(5)∶344-346.
4，何上虹，梁铁麟，王士珍，等.蜚蠊抗性测定初报.昆虫知识，1986，23(3)∶127.
5，MILIO JF.Evaluation of Three Methods for Detecting Chlorpyrifos Resistance in German Cockroach(Orthoptera: lattellidae)Populations. J.Econ. Entomol.1987,80(1)∶44-46., http://www.100md.com
摘 要 目的：了解广东省德国小蠊对常用杀虫剂的抗药性，指导科学、合理使用杀虫剂。方法：药膜接触法。结果：野外采集5个品系德国小蠊与敏感品系比较，对氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗性系数分别为1.99～20.34、1.62～10.28，对毒死蜱、残杀威的抗性系数分别为0.96～3.42、1.28～3.88。其中肇庆及茂名地区野外种群均对氯氰菊酯、溴氰菊酯产生了较高抗性。结论：广东省德国小蠊对4种杀虫剂的敏感性及抗药性不一，其化学防制须选择适当的杀虫剂。
关键词：德国小蠊 抗药性
自1953年美国报道德国小蠊对林丹、DDT产生抗药性以来，国外有较多关于德国小蠊对有机磷类、氨基甲酸酯类、拟除虫菊酯类杀虫剂产生抗性的报道〔1-2〕。80年代以来，我国部分省市开展蜚蠊抗性监测工作〔3-4〕，但我省未见这方面的监测研究报告。目前，化学防制仍是最重要的防制手段。为指导科学、合理使用杀虫剂， 1997～1998年在我省东、南、西、北、中5个城市市区采集德国小蠊野外品种，测定对常用杀虫剂毒死蜱、残杀威、氯氰菊酯、溴氰菊酯的抗药性。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 药物 96.2%毒死蜱(Chlorpyrifos)、92%氯氰菊酯(Cypermethrin)，由印度米苏工业有限公司提供；98%溴氰菊酯(Deltamethrin)，由艾格福公司提供；96%残杀威(Propoxur)，由湖南化工研究院提供。将96.2%毒死蜱配制成1.0%的丙酮标准溶液；98%溴氰菊酯、92%氯氰菊酯、96%残杀威分别配制成0.5%的丙酮标准溶液。
1.2 供试昆虫 从我省东、南、西、北、中的汕头(ST)、深圳(SZ)、茂名(MM)、肇庆(ZQ)、广州(GZ)5个监测点分别采集德国小蠊成虫或若虫，经培养1代后，取2～3周雄性成虫进行测试。德国小蠊敏感品种(S)，引自军事医学科学院微生物流行病研究所。
1.3 器械 500ml广口瓶及500ml饲养瓶;人工气候箱(珠江牌LRH-Z250-GS型)，广东省医疗器械厂生产。
, http://www.100md.com
1.4 方法 采用500ml广口瓶药膜接触法〔2〕。将标准溶液用丙酮稀释20倍，取2.5ml于瓶中，将瓶缓慢转动，使药液均匀沾布在瓶内壁形成药膜，晾干待用。以丙酮溶液作空白对照。在瓶颈内涂一层凡士林-液体石蜡防止蜚蠊逃脱，再将10只试虫加入瓶内，每隔2～5min观察被击倒数，直到95%试虫被击倒后，将试虫移入清洁饲养瓶内，置于人工气候箱中饲养，分别观察24、48、72h死亡率；试验重复5次，同时设空白对照。如对照组击倒率、死亡率>20%，则试验重做，若对照组击倒率、死亡率≤20%，则用Abbott公式校正。用机值法统计试虫的LT50。抗性系数=野外品系LT50/敏感品系LT50。试验温度25±1℃,相对湿度65%±10%。
2 结果与分折
广东省德国小蠊抗药性调查结果见表1及图1。
表1显示：德国小蠊对毒死蜱抗性系数<2.0的有ST、GZ、SZ品系， 2.0～<5.0的有MM、SQ品系；对残杀威抗性系数<2.0的有ST、GZ、SZ品系， 2.0～<5.0的有MM、SQ品系；对氯氰菊酯抗性系数2.0～<5.0的有ST、GZ品系，5.0～<10.0的有SZ品系，≥10.0有MM、SQ品系；对溴氰菊酯抗性系数<2.0的有ST、SZ品系，2.0～<5.0的有GZ品系，5.0～<10.0的有SQ品系，≥10.0有MM品系。
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3 讨论
蜚蠊抗药性监测方法目前尚未统一，主要有微量点滴法、多剂量药膜法及WHO推荐的果酱瓶药膜法。MILIO〔5〕曾对3种方法进行比较，同一种群的德国小蠊对毒死蜱的抗性用点滴法测定，抗性倍数为14.09,用果酱瓶药膜法测定抗性倍数为1.99，即果酱瓶药膜法抗性倍数为2.0时，蜚蠊已产生抗药性。美国学者D.G.Cochran〔2〕监测45个种群的德国小蠊对12种杀虫剂的抗药性，认为抗性系数<2，表示敏感或有弱的耐药；抗性系数>2，为有抗性；抗性系数>10，已产生高度抗性。茂名及肇庆市两个监测点蜚蠊对菊酯类已产生中度至高度抗性，这与经常使用该药有关，亦与实际采用菊酯类药物防制效果不佳的现象相符合。汕头市蜚蠊的抗药性不明显，与开展防制工作较晚有关。从剂量反应关系曲线看，各野外品系剂量反应关系曲线的b值明显比敏感品系小，说明存在敏感与耐药的杂合子，有抗性株存在。建议茂名及肇庆两个点停用氯氰菊酯及溴氰菊酯，选用较敏感的有机磷及氨基甲酸酯类杀虫剂，或用物理方法防制；其他点也要有计划地交替使用各类杀虫剂。
, 百拇医药
图1 广东省蜚蠊对常用杀虫剂的抗性
表1 广东省德国小蠊5个品系对常用杀虫剂的抗药性调查
杀 虫 剂
试虫品系
LT50及95%可信限(min)
回归方程式
抗性系数
毒死蜱
S
23.27(21.70～24.95)
Y=-5.69+7.82X
, 百拇医药
GZ
39.14(35.41～43.26)
Y=0.11+3.07X
1.68
MM
56.35(53.54～59.30)
Y=-7.56+7.18X
2.42
ST
34.10(37.63～36.76)
Y=-1.45+4.22X
, http://www.100md.com 1.47
SQ
105.29(99.28～111.67)
Y=-3.26+4.09X
4.52
SZ
29.59(27.29～32.08)
Y=-1.10+4.15X
1.27
残杀威
S
10.81(10.11～11.33)
, 百拇医药
Y=-11.12+15.59X
GZ
17.71(16.70～18.75)
Y=-7.14+9.23X
1.64
MM
29.25(27.30～31.34)
Y=-2.55+5.15X
2.71
ST
14.05(13.31～14.83)
, 百拇医药
Y=-4.01+7.85X
1.30
SQ
40.56(36.75～44.77)
Y=-0.46+3.40X
3.75
SZ
13.83(12.64～15.12)
Y=-1.90+6.05X
1.28
氯氰菊酯
S
, 百拇医药
5.43(4.95～5.96)
Y=-0.46+7.43X
GZ
22.66(20.44～25.12)
Y=1.02+2.94X
4.17
MM
94.62(88.61～101.03)
Y=-2.28+3.68X
17.43
ST
, 百拇医药 11.00(9.99～12.10)
Y=1.74+3.13X
2.03
SQ
107.79(101.63～114.31)
Y=-2.75+3.81X
19.85
SZ
29.46(26.54～32.70)
Y=0.75+2.89X
5.43
, 百拇医药 溴氰菊酯
S
5.87(5.47～6.30)
Y=-3.72+11.35X
GZ
17.84(16.05～19.82)
Y=0.60+3.52X
3.04
MM
61.26(56.79～66.09)
Y=-1.25+3.50X
10.44
, 百拇医药
ST
9.16(8.72～10.71)
Y=1.99+3.06X
1.56
SQ
44.69(40.54～49.26)
Y=-0.24+3.18X
7.61
SZ
11.59(9.98～13.46)
Y=1.83+2.98X
1.97
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蜚蠊的活动范围相对较稳定，同地区不同单位使用杀虫剂的频率不同，抗药程度亦可能不同，建议使用杀虫剂前简单测定所用药物的敏感性。
蜚蠊抗药性监测方法中点滴法结果精确，但操作较繁琐，使用虫量多；果酱瓶药膜法简单快捷，使用虫量少，易操作，适于基层单位应用。
第一作者简介：男，1965年生，汉族，毕业于广东医药学院，医学学士，副主任医师，科副主任
作者单位：林立丰(广东省卫生防疫站 广州510300)
卢文成(广东省卫生防疫站 广州510300)
蔡松武(广东省卫生防疫站 广州510300)
刘礼平(广东省卫生防疫站 广州510300)
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参考文献
1，Anon. Resistance of Vectors and Reservoirs of Disease to Pesticides. WHO Tech. Rep. 1976, 585∶88.
2，Cochran DG. Monitoring for Insecticide Resistance in Field-Collected Strains of the German Cockroach(Dictyoptera: Blattellidae).J.Econ. Entomol.1989,82(2)∶336-341.
3，曾晓？,柯海萍,胡建波，等.北京市区德国小蠊对4种杀虫剂的抗性测定. 中国媒介生物学及控制杂志，1998，9(5)∶344-346.
4，何上虹，梁铁麟，王士珍，等.蜚蠊抗性测定初报.昆虫知识，1986，23(3)∶127.
5，MILIO JF.Evaluation of Three Methods for Detecting Chlorpyrifos Resistance in German Cockroach(Orthoptera: lattellidae)Populations. J.Econ. Entomol.1987,80(1)∶44-46., http://www.100md.com