IgA肾病肾小球毛细血管内血浆蛋白淤积的临床病理意义
IgA肾病肾小球毛细血管内血浆蛋白淤积的临床病理意义
郑智勇 刘秉翰 余英豪 孙慧敏 吴文钰 谢福安
摘要 目的：观察IgA肾病(IgAN)肾小球毛细血管内血浆蛋白平均吸光度(MAPG)变化与微血栓形成率、IgA沉积量、临床表现及病理类型之间的关系。方法：用图像分析仪定量测定55例IgAN肾穿标本MAPG和IgA沉积物，比较高MAPG组与低MAPG组之间微血栓形成率、IgA沉积量、临床表现及病理类型的差异。结果：高MAPG组IgAN微血栓形成率、IgA沉积量、肾小球硬化率均显著高于低MAPG组。结论：IgAN肾微循环内血浆蛋白浓度升高促进IgA沉积、微血栓形成和肾小球硬化。
关键词：IgA肾病 微循环 图像分析
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我们曾报道IgA肾病(简称IgAN)整个病程中肾脏微循环内始终存在着较高浓度的血浆蛋白，并认为这会造成血流缓慢，加速免疫复合物的沉积和微血栓的形成[1]。为了证实这一观点，本文采用图像分析仪进一步观察了IgAN患者肾小球毛细血管内血浆蛋白浓度的变化，及其与临床病理之间的关系。
材料和方法
1 病例选择
随机选择我院1993～1996年经光镜、免疫组化、电镜及临床资料确诊，且肾穿组织标本中肾小球数多于15个的IgAN共55例，其中轻微病变型、局灶系膜增生型、 弥漫系膜增生型各选10例，系膜增生伴局灶性硬化型选25例(轻度硬化10例，中度硬化10例，重度硬化5例)。诊断依据WHO 1982年标准[2]，肾小球硬化轻度为≤20%、中度为≤40%、重度为41%～60%肾小球有节段或球性硬化。男性37例，女性18例，平均年龄23.4±4.9岁，平均病程24.7±18月。5例正常对照为下尿路血尿经肾穿病理检查排除肾炎的病例。取存档蜡块重新切片2μm厚，行PASM-Masson染色及SP法免疫组化IgA染色[1,3]。患者各项血清检验值均为穿刺前测定值。
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2 图像分析[1,4]
2.1 仪器及摄像：采用CMIAS型真彩色病理图像分析仪，其分辨率为512×512像素点，灰度0～255级。肾组织PASM-Masson染色片及SP法免疫组化IgA染色片，经显微镜放大250倍，入射光强度严格控制在空白玻片区的平均灰度值在160±1。每例摄取含有完整肾小球的肾皮质组织图像8～10幅。
2.2 测量方法
PASM-Masson染色 通过彩色分割、图形编辑等方法，准确分割出肾小球毛细血管内血浆区，测定肾小球毛细血管内血浆区平均吸光度(简称MAPG)。
IgA染色 通过彩色分割、图形编辑等方法，准确分割出肾小球IgA沉积物区。测定每例肾小球IgA沉积物吸光度(每例IgA沉积物总积分吸光度值÷测定肾小球数，简称IgA沉积量)，用于显示IgA沉积物的含量。
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2.3 光镜下观察
每例肾组织肾小球微血栓率(出现微血栓的肾小球数÷该例肾小球总数%)。
2.4 统计学分析：组间计量数值比较采用t检验，计数数值比较用x2检验。
结 果
正常组MAPG为0.024±0.005，IgAN组MAPG为0.043±0.012，两组相比相差非常显著(P<0.01)。IgAN组中MAPG<0.043者32例，称为低MAPG组；≥0.043者23例，称为高MAPG组。
1. IgAN患者MAPG的高低与临床表现的关系(表1)
与低MAPG组相比，高MAPG组患者的年龄较大，病程偏长，血尿(肉眼及镜下)出现率较高，尿蛋白含量较低。
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表1 IgAN患者MAPG高低与临床表现的关系(x±s)
组别
例数
男/女
年龄
(岁)
病程
(月)
血尿
(%)
蛋白尿
(g/d)
Scr(μmol/L)
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低MAPG组
27/5
20.4±9.1
31.3±38.8
66.7
3.3±1.4
141±27
高MAPG组
18/5
28.6±8.5
42.5±54.3
75.0
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2.4±1.1
169±39
2. IgAN患者MAPG的高低与微血栓率及IgA沉积量的关系(见表2)
高MAPG组的肾小球IgA沉积量和微血栓率都显著高于低MAPG组。
表2 IgAN患者MAPG高低与微血栓率及IgA沉积量的关系(x±s)
组别
MAPG(/μm2)
IgA沉积量(/每个肾小球)
微血栓率(%)
低MAPG组
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0.035±0.006
286±257
1.1±1.7
高MAPG组
0.054±0.009
450±139
22.3±38.9
P值
<0.05
<0.05
<0.001
4. IgAN患者MAPG的高低与病理类型的关系(见表3)
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表3 IgAN患者MAPG的高低与病理类型的关系
病理类型
低MAPG组
高MAPG组
轻微病变
10
0
局灶系膜增生
7
3
弥漫系膜增生
6
4
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轻度硬化
5
5
中度和重度硬化
4
11
共计
32
23
局灶性肾小球硬化病例在低MAPG组占9例(28.16%)，高MAPG组中占16例(68.57%)，两组相差非常显著(P<0.001)
讨 论
用图像分析仪研究IgAN静态微循环图像是一种新尝试。临床微循环研究体表微循环血液流变，无法了解内脏器官微循环改变[5]。手术切除标本由于血流阻断等因素影响，微循环的血流和血管舒缩均有一定程度改变，无法观察到原有状态。肾穿组织属于瞬间穿刺并及时固定的标本，最大程度保留了疾病状态下微循环改变，用此标本测定体内微循环形态改变，能够获得最接近真实的微循环病理状态的数据。
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本文用血浆平均吸光度来显示血浆蛋白浓度的变化，吸光度越高说明血浆蛋白浓度越高。研究结果表明，IgAN组MAPG均值是正常组的179%，说明IgAN时肾小球毛细血管内血浆蛋白浓度明显升高[1]。IgAN组MAPG均值为0.043，我们以此值为中线，将本组IgAN分为低MAPG组和高MAPG组，然后比较两组的临床表现和病理学改变。
表1显示两组IgAN在临床表现存在差别。与低MAPG组相比，高MAPG组患者的年龄较大，病程偏长，血尿(肉眼及镜下)率较高，尿蛋白含量较低。表2显示，高MAPG组的IgA沉积量和微血栓率都显著高于低MAPG组，表明该组患者肾小球免疫沉积物多，血液凝集性高的病理学特点。这证实血浆蛋白浓度升高会加速免疫复合物沉积，促进微血栓形成[1，6]。表3显示，局灶肾小球硬化病例在高MAPG组占69.57%，在低MAPG组为28.16%，两组相差非常显著。其原因可能与高MAPG组病程偏长，免疫沉积物多，微血栓形成多有关。肾小球硬化破坏毛细血管床，使血浆蛋白进一步淤积，会造成恶性循环[7]。因此，对高MAPG的IgAN患者应该加强抗凝治疗，并设法降低肾组织微循环内血浆蛋白的浓度。这对阻止或延缓IgAN肾小球硬化的形成可能有很大意义。
, 百拇医药
采用图像分析仪分割测定肾小球毛细血管血浆区蛋白浓度变化的作法，在既往文献中尚未见报道。我们认为这种研究方法有很大的发展潜力，值得从多方面探索和研究[1，4]。
福建省科研基金资助项目97-Z-180
作者单位：郑智勇(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
余英豪(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
孙慧敏(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
谢福安(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
刘秉翰(福州大学计算机系)
, 百拇医药
吴文钰(福州大学计算机系)
参考文献
1 郑智勇，刘秉翰，余英豪，等.IgA肾病肾微循环病变的图像分析研究中国体视学与图像分析1998，3(2)：78
2 邹万忠.肾脏病理与临床长沙：湖南科学技术出版社.1997，58～59
3 郑智勇，余英豪，李京荣，等SP免疫组织化学染色用于肾活检石蜡切片中华病理学杂志1993，22(5)：309
4 郑智勇，吴文钰图像分析仪与定量诊断病理学诊断病理学杂志.1996，3(4)：246
5 田牛，刘育英，李向红，等微循环的临床与基础北京：原子能出版社1996，25～86
6 Sagripanti A, Barsotti G. Hypercoagulability, intraglomerular coagulation, and thromboembolism in nephrotic syndrome. Nephron. 1995,70:271.
7，Haas M. Histologic subclassification of IgA nephropathy: a clinicopathologic study of 244 cases. Am J Kidney Dis. 1997,29:829., 百拇医药
郑智勇 刘秉翰 余英豪 孙慧敏 吴文钰 谢福安
摘要 目的：观察IgA肾病(IgAN)肾小球毛细血管内血浆蛋白平均吸光度(MAPG)变化与微血栓形成率、IgA沉积量、临床表现及病理类型之间的关系。方法：用图像分析仪定量测定55例IgAN肾穿标本MAPG和IgA沉积物，比较高MAPG组与低MAPG组之间微血栓形成率、IgA沉积量、临床表现及病理类型的差异。结果：高MAPG组IgAN微血栓形成率、IgA沉积量、肾小球硬化率均显著高于低MAPG组。结论：IgAN肾微循环内血浆蛋白浓度升高促进IgA沉积、微血栓形成和肾小球硬化。
关键词：IgA肾病 微循环 图像分析
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我们曾报道IgA肾病(简称IgAN)整个病程中肾脏微循环内始终存在着较高浓度的血浆蛋白，并认为这会造成血流缓慢，加速免疫复合物的沉积和微血栓的形成[1]。为了证实这一观点，本文采用图像分析仪进一步观察了IgAN患者肾小球毛细血管内血浆蛋白浓度的变化，及其与临床病理之间的关系。
材料和方法
1 病例选择
随机选择我院1993～1996年经光镜、免疫组化、电镜及临床资料确诊，且肾穿组织标本中肾小球数多于15个的IgAN共55例，其中轻微病变型、局灶系膜增生型、 弥漫系膜增生型各选10例，系膜增生伴局灶性硬化型选25例(轻度硬化10例，中度硬化10例，重度硬化5例)。诊断依据WHO 1982年标准[2]，肾小球硬化轻度为≤20%、中度为≤40%、重度为41%～60%肾小球有节段或球性硬化。男性37例，女性18例，平均年龄23.4±4.9岁，平均病程24.7±18月。5例正常对照为下尿路血尿经肾穿病理检查排除肾炎的病例。取存档蜡块重新切片2μm厚，行PASM-Masson染色及SP法免疫组化IgA染色[1,3]。患者各项血清检验值均为穿刺前测定值。
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2 图像分析[1,4]
2.1 仪器及摄像：采用CMIAS型真彩色病理图像分析仪，其分辨率为512×512像素点，灰度0～255级。肾组织PASM-Masson染色片及SP法免疫组化IgA染色片，经显微镜放大250倍，入射光强度严格控制在空白玻片区的平均灰度值在160±1。每例摄取含有完整肾小球的肾皮质组织图像8～10幅。
2.2 测量方法
PASM-Masson染色 通过彩色分割、图形编辑等方法，准确分割出肾小球毛细血管内血浆区，测定肾小球毛细血管内血浆区平均吸光度(简称MAPG)。
IgA染色 通过彩色分割、图形编辑等方法，准确分割出肾小球IgA沉积物区。测定每例肾小球IgA沉积物吸光度(每例IgA沉积物总积分吸光度值÷测定肾小球数，简称IgA沉积量)，用于显示IgA沉积物的含量。
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2.3 光镜下观察
每例肾组织肾小球微血栓率(出现微血栓的肾小球数÷该例肾小球总数%)。
2.4 统计学分析：组间计量数值比较采用t检验，计数数值比较用x2检验。
结 果
正常组MAPG为0.024±0.005，IgAN组MAPG为0.043±0.012，两组相比相差非常显著(P<0.01)。IgAN组中MAPG<0.043者32例，称为低MAPG组；≥0.043者23例，称为高MAPG组。
1. IgAN患者MAPG的高低与临床表现的关系(表1)
与低MAPG组相比，高MAPG组患者的年龄较大，病程偏长，血尿(肉眼及镜下)出现率较高，尿蛋白含量较低。
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表1 IgAN患者MAPG高低与临床表现的关系(x±s)
组别
例数
男/女
年龄
(岁)
病程
(月)
血尿
(%)
蛋白尿
(g/d)
Scr(μmol/L)
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低MAPG组
27/5
20.4±9.1
31.3±38.8
66.7
3.3±1.4
141±27
高MAPG组
18/5
28.6±8.5
42.5±54.3
75.0
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2.4±1.1
169±39
2. IgAN患者MAPG的高低与微血栓率及IgA沉积量的关系(见表2)
高MAPG组的肾小球IgA沉积量和微血栓率都显著高于低MAPG组。
表2 IgAN患者MAPG高低与微血栓率及IgA沉积量的关系(x±s)
组别
MAPG(/μm2)
IgA沉积量(/每个肾小球)
微血栓率(%)
低MAPG组
, http://www.100md.com
0.035±0.006
286±257
1.1±1.7
高MAPG组
0.054±0.009
450±139
22.3±38.9
P值
<0.05
<0.05
<0.001
4. IgAN患者MAPG的高低与病理类型的关系(见表3)
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表3 IgAN患者MAPG的高低与病理类型的关系
病理类型
低MAPG组
高MAPG组
轻微病变
10
0
局灶系膜增生
7
3
弥漫系膜增生
6
4
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轻度硬化
5
5
中度和重度硬化
4
11
共计
32
23
局灶性肾小球硬化病例在低MAPG组占9例(28.16%)，高MAPG组中占16例(68.57%)，两组相差非常显著(P<0.001)
讨 论
用图像分析仪研究IgAN静态微循环图像是一种新尝试。临床微循环研究体表微循环血液流变，无法了解内脏器官微循环改变[5]。手术切除标本由于血流阻断等因素影响，微循环的血流和血管舒缩均有一定程度改变，无法观察到原有状态。肾穿组织属于瞬间穿刺并及时固定的标本，最大程度保留了疾病状态下微循环改变，用此标本测定体内微循环形态改变，能够获得最接近真实的微循环病理状态的数据。
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本文用血浆平均吸光度来显示血浆蛋白浓度的变化，吸光度越高说明血浆蛋白浓度越高。研究结果表明，IgAN组MAPG均值是正常组的179%，说明IgAN时肾小球毛细血管内血浆蛋白浓度明显升高[1]。IgAN组MAPG均值为0.043，我们以此值为中线，将本组IgAN分为低MAPG组和高MAPG组，然后比较两组的临床表现和病理学改变。
表1显示两组IgAN在临床表现存在差别。与低MAPG组相比，高MAPG组患者的年龄较大，病程偏长，血尿(肉眼及镜下)率较高，尿蛋白含量较低。表2显示，高MAPG组的IgA沉积量和微血栓率都显著高于低MAPG组，表明该组患者肾小球免疫沉积物多，血液凝集性高的病理学特点。这证实血浆蛋白浓度升高会加速免疫复合物沉积，促进微血栓形成[1，6]。表3显示，局灶肾小球硬化病例在高MAPG组占69.57%，在低MAPG组为28.16%，两组相差非常显著。其原因可能与高MAPG组病程偏长，免疫沉积物多，微血栓形成多有关。肾小球硬化破坏毛细血管床，使血浆蛋白进一步淤积，会造成恶性循环[7]。因此，对高MAPG的IgAN患者应该加强抗凝治疗，并设法降低肾组织微循环内血浆蛋白的浓度。这对阻止或延缓IgAN肾小球硬化的形成可能有很大意义。
, 百拇医药
采用图像分析仪分割测定肾小球毛细血管血浆区蛋白浓度变化的作法，在既往文献中尚未见报道。我们认为这种研究方法有很大的发展潜力，值得从多方面探索和研究[1，4]。
福建省科研基金资助项目97-Z-180
作者单位：郑智勇(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
余英豪(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
孙慧敏(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
谢福安(350025 福建省福州市， 南京军区福州总医院病理科)
刘秉翰(福州大学计算机系)
, 百拇医药
吴文钰(福州大学计算机系)
参考文献
1 郑智勇，刘秉翰，余英豪，等.IgA肾病肾微循环病变的图像分析研究中国体视学与图像分析1998，3(2)：78
2 邹万忠.肾脏病理与临床长沙：湖南科学技术出版社.1997，58～59
3 郑智勇，余英豪，李京荣，等SP免疫组织化学染色用于肾活检石蜡切片中华病理学杂志1993，22(5)：309
4 郑智勇，吴文钰图像分析仪与定量诊断病理学诊断病理学杂志.1996，3(4)：246
5 田牛，刘育英，李向红，等微循环的临床与基础北京：原子能出版社1996，25～86
6 Sagripanti A, Barsotti G. Hypercoagulability, intraglomerular coagulation, and thromboembolism in nephrotic syndrome. Nephron. 1995,70:271.
7，Haas M. Histologic subclassification of IgA nephropathy: a clinicopathologic study of 244 cases. Am J Kidney Dis. 1997,29:829., 百拇医药