藏药小叶莲的化学成分研究
作者：尚明英 李军 蔡少青 李萍 徐珞珊 徐国钧
单位：尚明英 李军 蔡少青(北京医科大学药学院生药学研究室 100083)；李萍 徐珞珊 徐国钧(中国药科大学)
关键词：小叶莲；鬼臼；毒素；桃儿七素
中草药000804摘 要 目的：对藏药小叶莲的化学成分进行研究。方法：采用硅胶色谱柱进行分离，通过物理、化学和光谱学方法鉴定各化合物的结构。结果：分离并鉴定了6 个化合物，分别为去氧鬼臼毒素(deoxypodophyllotoxin)、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、4′-去甲去氧鬼臼毒素(4′-demethdeoxypodophyllotoxin)、8-异戊烯基山柰酚(8-prenylkeamf-erol)、柠檬酚(citrusinol)和β-谷甾醇。结论：各化合物均为首次从小叶莲中分得，其中8-prenylkeamferol和citrusinol为首次从鬼臼亚科植物中分得。
, 百拇医药
Studies on the Chemical Constituents of the Fruit of Sinopodophyllum emodi
Shang Mingying
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
Li Jun
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
Cai Shaoqing
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
, 百拇医药
Li Ping
(China Pharmaceutical University)
Xu Luoshan
(China Pharmaceutical University)
Xu Guojun
(China Pharmaceutical University)
Abstract The chemical constituents of the fruit of Sinopodophyllum emodi were isolated with silica gel chromatography and their structures identified by physical, chemical properties and spectral analysis. As a result, six compounds were isolated and identified as deoxypodophyllotoxin, podophyllotoxin, 4′-demethyldeoxypodophyllotoxin, 8-prenylkeamferol, citrusinol, and β-sitosterol. All the compounds were isolated from Fructus Sino Podophylli for the first time. 8-prenylkeamferol and citrusinol were found in Podophylloideae for the first time.
, http://www.100md.com
Key words the fruit of Sinopodophyllum emodi podophyllotoxin Sinopodophyllum Ying
小叶莲为常用藏药，藏名奥莫色。《中华人民共和国药典》1995年版收载小叶莲为小檗科植物鬼臼Podophyllum ecodi Wall. 的干燥成熟果实[1]。具有调经活血功能，用于血瘀经闭、难产、死胎、胎盘不下。小叶莲始载于《月王药诊》，作为藏族习用药，具有悠久的历史，其化学成分的研究未见报道。为了开发和利用民族药资源，探明其内在有效成分，我们对小叶莲的化学成分进行了研究。从小叶莲乙醇提取物中分离并鉴定6 个化合物，分别为去氧鬼臼毒素、鬼臼毒素、4′-去甲去氧鬼臼毒素、8-prenylkeamferol、citrusinol和β-谷甾醇。各化合物均为首次从小叶莲中分得，其中8-prenylkeamferol和citrusinol为首次从鬼臼亚科植物中分得。化合物Ⅰ～Ⅴ的化学结构式见图1。
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图1 化合物Ⅰ～Ⅴ的化学结构式
1 仪器和材料
PHMK 79/2212型显微熔点测定仪，(温度计未校正)；Perkin-Elmer 983型红外光谱仪(KBr压片)；HP5988 A型质谱仪；Bruker-400 型核磁共振仪(TMS为内标)。柱色谱硅胶(100～200 目，200～300 目)，薄层色谱硅胶H、G、GF254(400 目)，均为青岛海洋化工厂生产。
小叶莲经作者鉴定为小檗科鬼臼亚科桃儿七Sinopodophyllum emodi (Wall. ) Ying (Podophyllum emodi Wall. )的干燥成熟果实[2]，1991年9月采自云南中甸，标本存于中国药科大学生药学研究室标本室。
2 提取与分离
, 百拇医药
小叶莲干燥果实3.7 kg，粉碎后用乙醇渗漉提取近无色，回收乙醇，得浸膏420 g。此浸膏加柱色谱硅胶250 g混匀，干燥、粉碎后于索氏提取器中，丙酮回流提取至近无色，提取液回收丙酮，得浸膏102 g，然后经硅胶色谱柱分离，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，经反复精制得化合物Ⅰ～Ⅵ。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ：无色方晶(丙酮)，mp 169 ℃～170 ℃。IR(KBr) cm-1：1 768(γ-内酯羰基)，1 590，1 505(苯环)，1 240，1 150(碳氧键)，930(亚甲二氧基)示为鬼臼内酯类木脂素，EIMS m/z：398(M+)，339，283，230，181，173，115，83。1HNMR和13CNMR数据与文献报道一致[3，4]，故Ⅰ为去氧鬼臼毒素。
化合物Ⅱ：无色针晶(乙醇)，mp 117 ℃～118 ℃。IR(KBr) cm-1：3 440(羟基)，1 760(γ-内酯羰基)，1 585，1 480(苯环)，1 245，1 130(碳氧键)，930(亚甲二氧基)与鬼臼毒素的IR光谱数据一致；与标准品共TLC，其Rf值一致，混合熔点不下降，故确定Ⅱ为鬼臼毒素。
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化合物Ⅲ：无色颗粒状结晶(甲醇)，mp 248 ℃～251 ℃。IR(KBr) cm-1：3 400(羟基)，1 758(γ-内酯羰基)，1 610，1 500(苯环)，1 220，1 030(碳氧键)，925(亚甲二氧基)示为鬼臼内酯类木脂素；EIMS m/z：384(M+)，339，325，299，230，185，173，167，154，115；1HNMR(CDCl3)δ：4.60(1H，br.s，H-1)，2.67(3H，m，H-2，H-3，H-4β)，4.45(1H，dd,=8.5，6.0，αH-3a)，3.92(1H，dd,=9.9，8.5，βH-3a)，3.07(1H，m，αH-4)，6.53(1H，s，H-8)，6.67(1H，s，H-5)，6.26(2H，s，H-2′，H-6′)，5.96(2H，s，OCH2)，3.79(6H，s，3′-OMe，5′-OMe)，5.40(1H，OH)；13CNMR(CDCl3)δ：43.6(C-1)，47.7(C-2)，175.0(C-2a)，32.8(C-3)，72.1(C-3a)，33.2(C-4)，108.5(C-5)，146.8(C-6)，146.5(C-7)，110.5(C-8)，130.6(C-9)，128.4(C-10)，131.9(C-1′)，108.1(C-2′)，147.1(C-3′)，134.0(C-4′)，147.1(C-5′)，188.1(C-6′)，101.2(OCH2O)，56.5(3′-OMe，5′-OMe)根据以上数据并与文献对照[5]，化合物Ⅲ为4′-去甲去氧鬼臼毒素。
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化合物Ⅳ：黄色针晶(丙酮)，mp 223 ℃～225 ℃。HCl-Mg粉反应呈红色。高分辨质谱给出分子式为C20H18O6。IR(KBr) cm-1：3 360，2 920，1 650，1 610，1 505；EIMS m/z：335(M++1)，354(M+)，339(M+-CH3)，299(M+-C4H7)；1HNMR(Me2CO-d6)δ：1.67(3H，s，3× H-5″)，1.72(3H，s，3× H-4″)，3.55(2H，d，J=7.0 Hz，2× H-1″)，5.31(1H，t，J=7.0 Hz，2× H-2″)，6.38(3H，s，H-6)，7.07(2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，H-5′)，8.19(2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，H-6′)；13CNMR(Me2CO-d6)δ：147.0(C-2)，136.4(C-3)，176.8(C-4)，160.2(C-5)，98.7(C-6)，162.2(C-7)，107.2(C-8)，155.1(C-9)，104.1(C-10)，123.2(C-1′)，130.5(C-2′，6′)，116.3(C-3′，5′)，159.7(C-4′)，22.2(C-1″)，123.6(C-2″)，132.1(C-3″)，25.8(C-4″)，18.2(C-5″)。根据以上数据并与文献对照[6，7]，化合物Ⅳ为8-异戊烯基山柰酚。
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化合物Ⅴ：黄色针晶(丙酮)，mp 252 ℃～254 ℃。HCl-Mg粉反应呈红色。高分辨质谱给出分子式为C20H16O6。IR(KBr) cm-1：3 360，2 910，1 610，1 535；EIMS m/z：352(M+)，337，281，203，168，135，121，65；1HNMR(Me2CO-d6)δ：1.50(6H，s，2-CH3)，5.80(1H，d，J=10.0 Hz，H-2″)，6.92(1H，d，J=10.0 Hz，H-1″)，6.20(1H，s，H-6)，7.08(2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，H-5′)，8.23(2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，H-6′)；13CNMR(Me2CO-d6)δ：145.7(C-2)，136.6(C-3)，176.8(C-4)，160.2(C-5)，99.7(C-6)，159.9(C-7)，104.6(C-8)，154.7(C-9)，100.9(C-10)，123.2(C-1′)，130.5(C-2′，6′)，116.4(C-3′，5′)，159.7(C-4′)，115.4(C-1″)，128.5(C-2″)，78.0(C-3″)，28.3(C-4″，5″)。根据以上数据并与文献对照[8，9]，化合物Ⅴ为citrusinol。
, 百拇医药
化合物Ⅵ：无色针状结晶(丙酮)，mp 136 ℃～138 ℃。IR(KBr) cm-1：3 400，2 940，2 870，1 460，1 375，与β-谷甾醇的IR光谱相同；与标准品共TLC，其Rf值一致，混合熔点不下降，所以Ⅵ为β-谷甾醇。
国家“八.五”攻关项目
参考文献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：化学工业出版社，1995：35
2，应俊生.植物分类学报，1979，17(1)：15
3，Jackson D E, Demck P M. Phytochemistry, 1984,23(5):1147
, http://www.100md.com
4，Fonseca S F, Ruveda E A， Mccheseney J D. Phytochemistry, 1980,19(7):1527
5，Broomhead A J, and Dewick P M. Phytochemistry, 1990,29(12):3831
6，李枫，刘永.药学学报，1988，23(9)：672
7，Fukai T，Nomura T. Heterocycles, 1992,34(6):1213
8，Wu T S. Phytochemistry, 1987,26(11):3094
9，Fukai T， Nomura T. Phytochemistry, 1988,27(1):259
(2000-01-07收稿), 百拇医药
单位：尚明英 李军 蔡少青(北京医科大学药学院生药学研究室 100083)；李萍 徐珞珊 徐国钧(中国药科大学)
关键词：小叶莲；鬼臼；毒素；桃儿七素
中草药000804摘 要 目的：对藏药小叶莲的化学成分进行研究。方法：采用硅胶色谱柱进行分离，通过物理、化学和光谱学方法鉴定各化合物的结构。结果：分离并鉴定了6 个化合物，分别为去氧鬼臼毒素(deoxypodophyllotoxin)、鬼臼毒素(podophyllotoxin)、4′-去甲去氧鬼臼毒素(4′-demethdeoxypodophyllotoxin)、8-异戊烯基山柰酚(8-prenylkeamf-erol)、柠檬酚(citrusinol)和β-谷甾醇。结论：各化合物均为首次从小叶莲中分得，其中8-prenylkeamferol和citrusinol为首次从鬼臼亚科植物中分得。
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Studies on the Chemical Constituents of the Fruit of Sinopodophyllum emodi
Shang Mingying
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
Li Jun
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
Cai Shaoqing
(Department of Pharmacognosy, Beijing Medical University Beijing 100083)
, 百拇医药
Li Ping
(China Pharmaceutical University)
Xu Luoshan
(China Pharmaceutical University)
Xu Guojun
(China Pharmaceutical University)
Abstract The chemical constituents of the fruit of Sinopodophyllum emodi were isolated with silica gel chromatography and their structures identified by physical, chemical properties and spectral analysis. As a result, six compounds were isolated and identified as deoxypodophyllotoxin, podophyllotoxin, 4′-demethyldeoxypodophyllotoxin, 8-prenylkeamferol, citrusinol, and β-sitosterol. All the compounds were isolated from Fructus Sino Podophylli for the first time. 8-prenylkeamferol and citrusinol were found in Podophylloideae for the first time.
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Key words the fruit of Sinopodophyllum emodi podophyllotoxin Sinopodophyllum Ying
小叶莲为常用藏药，藏名奥莫色。《中华人民共和国药典》1995年版收载小叶莲为小檗科植物鬼臼Podophyllum ecodi Wall. 的干燥成熟果实[1]。具有调经活血功能，用于血瘀经闭、难产、死胎、胎盘不下。小叶莲始载于《月王药诊》，作为藏族习用药，具有悠久的历史，其化学成分的研究未见报道。为了开发和利用民族药资源，探明其内在有效成分，我们对小叶莲的化学成分进行了研究。从小叶莲乙醇提取物中分离并鉴定6 个化合物，分别为去氧鬼臼毒素、鬼臼毒素、4′-去甲去氧鬼臼毒素、8-prenylkeamferol、citrusinol和β-谷甾醇。各化合物均为首次从小叶莲中分得，其中8-prenylkeamferol和citrusinol为首次从鬼臼亚科植物中分得。化合物Ⅰ～Ⅴ的化学结构式见图1。
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图1 化合物Ⅰ～Ⅴ的化学结构式
1 仪器和材料
PHMK 79/2212型显微熔点测定仪，(温度计未校正)；Perkin-Elmer 983型红外光谱仪(KBr压片)；HP5988 A型质谱仪；Bruker-400 型核磁共振仪(TMS为内标)。柱色谱硅胶(100～200 目，200～300 目)，薄层色谱硅胶H、G、GF254(400 目)，均为青岛海洋化工厂生产。
小叶莲经作者鉴定为小檗科鬼臼亚科桃儿七Sinopodophyllum emodi (Wall. ) Ying (Podophyllum emodi Wall. )的干燥成熟果实[2]，1991年9月采自云南中甸，标本存于中国药科大学生药学研究室标本室。
2 提取与分离
, 百拇医药
小叶莲干燥果实3.7 kg，粉碎后用乙醇渗漉提取近无色，回收乙醇，得浸膏420 g。此浸膏加柱色谱硅胶250 g混匀，干燥、粉碎后于索氏提取器中，丙酮回流提取至近无色，提取液回收丙酮，得浸膏102 g，然后经硅胶色谱柱分离，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，经反复精制得化合物Ⅰ～Ⅵ。
3 结构鉴定
化合物Ⅰ：无色方晶(丙酮)，mp 169 ℃～170 ℃。IR(KBr) cm-1：1 768(γ-内酯羰基)，1 590，1 505(苯环)，1 240，1 150(碳氧键)，930(亚甲二氧基)示为鬼臼内酯类木脂素，EIMS m/z：398(M+)，339，283，230，181，173，115，83。1HNMR和13CNMR数据与文献报道一致[3，4]，故Ⅰ为去氧鬼臼毒素。
化合物Ⅱ：无色针晶(乙醇)，mp 117 ℃～118 ℃。IR(KBr) cm-1：3 440(羟基)，1 760(γ-内酯羰基)，1 585，1 480(苯环)，1 245，1 130(碳氧键)，930(亚甲二氧基)与鬼臼毒素的IR光谱数据一致；与标准品共TLC，其Rf值一致，混合熔点不下降，故确定Ⅱ为鬼臼毒素。
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化合物Ⅲ：无色颗粒状结晶(甲醇)，mp 248 ℃～251 ℃。IR(KBr) cm-1：3 400(羟基)，1 758(γ-内酯羰基)，1 610，1 500(苯环)，1 220，1 030(碳氧键)，925(亚甲二氧基)示为鬼臼内酯类木脂素；EIMS m/z：384(M+)，339，325，299，230，185，173，167，154，115；1HNMR(CDCl3)δ：4.60(1H，br.s，H-1)，2.67(3H，m，H-2，H-3，H-4β)，4.45(1H，dd,=8.5，6.0，αH-3a)，3.92(1H，dd,=9.9，8.5，βH-3a)，3.07(1H，m，αH-4)，6.53(1H，s，H-8)，6.67(1H，s，H-5)，6.26(2H，s，H-2′，H-6′)，5.96(2H，s，OCH2)，3.79(6H，s，3′-OMe，5′-OMe)，5.40(1H，OH)；13CNMR(CDCl3)δ：43.6(C-1)，47.7(C-2)，175.0(C-2a)，32.8(C-3)，72.1(C-3a)，33.2(C-4)，108.5(C-5)，146.8(C-6)，146.5(C-7)，110.5(C-8)，130.6(C-9)，128.4(C-10)，131.9(C-1′)，108.1(C-2′)，147.1(C-3′)，134.0(C-4′)，147.1(C-5′)，188.1(C-6′)，101.2(OCH2O)，56.5(3′-OMe，5′-OMe)根据以上数据并与文献对照[5]，化合物Ⅲ为4′-去甲去氧鬼臼毒素。
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化合物Ⅳ：黄色针晶(丙酮)，mp 223 ℃～225 ℃。HCl-Mg粉反应呈红色。高分辨质谱给出分子式为C20H18O6。IR(KBr) cm-1：3 360，2 920，1 650，1 610，1 505；EIMS m/z：335(M++1)，354(M+)，339(M+-CH3)，299(M+-C4H7)；1HNMR(Me2CO-d6)δ：1.67(3H，s，3× H-5″)，1.72(3H，s，3× H-4″)，3.55(2H，d，J=7.0 Hz，2× H-1″)，5.31(1H，t，J=7.0 Hz，2× H-2″)，6.38(3H，s，H-6)，7.07(2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，H-5′)，8.19(2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，H-6′)；13CNMR(Me2CO-d6)δ：147.0(C-2)，136.4(C-3)，176.8(C-4)，160.2(C-5)，98.7(C-6)，162.2(C-7)，107.2(C-8)，155.1(C-9)，104.1(C-10)，123.2(C-1′)，130.5(C-2′，6′)，116.3(C-3′，5′)，159.7(C-4′)，22.2(C-1″)，123.6(C-2″)，132.1(C-3″)，25.8(C-4″)，18.2(C-5″)。根据以上数据并与文献对照[6，7]，化合物Ⅳ为8-异戊烯基山柰酚。
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化合物Ⅴ：黄色针晶(丙酮)，mp 252 ℃～254 ℃。HCl-Mg粉反应呈红色。高分辨质谱给出分子式为C20H16O6。IR(KBr) cm-1：3 360，2 910，1 610，1 535；EIMS m/z：352(M+)，337，281，203，168，135，121，65；1HNMR(Me2CO-d6)δ：1.50(6H，s，2-CH3)，5.80(1H，d，J=10.0 Hz，H-2″)，6.92(1H，d，J=10.0 Hz，H-1″)，6.20(1H，s，H-6)，7.08(2H，d，J=8.0 Hz，H-3′，H-5′)，8.23(2H，d，J=8.0 Hz，H-2′，H-6′)；13CNMR(Me2CO-d6)δ：145.7(C-2)，136.6(C-3)，176.8(C-4)，160.2(C-5)，99.7(C-6)，159.9(C-7)，104.6(C-8)，154.7(C-9)，100.9(C-10)，123.2(C-1′)，130.5(C-2′，6′)，116.4(C-3′，5′)，159.7(C-4′)，115.4(C-1″)，128.5(C-2″)，78.0(C-3″)，28.3(C-4″，5″)。根据以上数据并与文献对照[8，9]，化合物Ⅴ为citrusinol。
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化合物Ⅵ：无色针状结晶(丙酮)，mp 136 ℃～138 ℃。IR(KBr) cm-1：3 400，2 940，2 870，1 460，1 375，与β-谷甾醇的IR光谱相同；与标准品共TLC，其Rf值一致，混合熔点不下降，所以Ⅵ为β-谷甾醇。
国家“八.五”攻关项目
参考文献
1，中华人民共和国药典.一部.北京：化学工业出版社，1995：35
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7，Fukai T，Nomura T. Heterocycles, 1992,34(6):1213
8，Wu T S. Phytochemistry, 1987,26(11):3094
9，Fukai T， Nomura T. Phytochemistry, 1988,27(1):259
(2000-01-07收稿), 百拇医药