急性一氧化碳中毒大鼠血肌酸激酶同工酶BB的变化及治疗
急性一氧化碳中毒大鼠血肌酸激酶同工酶BB的变化及治疗
赵书弘 张鹏 武连华 杨文青 栗芳 胡永翔
摘要 目的：观察急性一氧化碳中毒(ACOP)后大鼠血清肌酸激酶同工酶BB(creatine kinase BB，CK-BB)的动态变化及高压氧(hyperbaric oxygenation，HBO)的影响。方法：制作大鼠一氧化碳中毒模型，随机分成2个亚组，ACOP组和ACOP+HBO组，每个亚组再按观察时间分为ACOP和ACOP+HBO后1、3、5、10和20 d组，正常对照 1组，预期处死后心脏取血测定不同组别血清CK-BB的变化。结果：ACOP 组：ACOP后第1dCK-BB显著升高，与对照组比较差异有显著意义，P<0.001；第3d起明显下降，与对照组比较差异无显著性意义，P>0.05；第10 d再次明显升高，P<0.001；第20 d下降，与对照组比较差异无显著意义，P>0.05。ACOP 后立即进行高压氧治疗(ACOP +HBO组)：CK-BB活性虽有所升高，但与对照组比较差异无显著意义，P>0.05。结论：ACOP后大鼠血清CK-BB活性迅速明显升高，高压氧治疗组血清CK-BB无明显升高，提示高压氧治疗是减轻ACOP急性脑损伤有效的治疗方法。
, 百拇医药
关键词：一氧化碳中毒；肌酸激酶同工酶-BB；高压氧
急性一氧化碳中毒(ACOP)是一种冬季多发病，重症ACOP导致的脑损伤病情重、病程长、恢复慢、死亡率和致残率高[1]。CK-BB作为CK的一种脑型同工酶，主要存在于脑内神经元和胶质内，ACOP后脑缺氧损伤使其释放入血，所以其活性迅速升高，并随脑缺氧后水肿、高颅压、细胞坏死的出现而增加。作者从动物实验角度观察ACOP后血清CK-BB的动态变化，及高压氧治疗对CK-BB的影响。
材料与方法
一、实验动物及分组
选择健康成年Wistar大鼠86只，雌雄不拘，体重200～250 g，首都医科大学动物实验室提供(动物号医动字-1000147)，随机分成2个亚组，ACOP组和ACOP+HBO(高压氧)组，每个亚组再按观察时间分为ACOP后1、3、5、10和20 d组，正常对照1组。ACOP组中每小组和正常对照组各6只大鼠，ACOP+HBO组中每小组各10只大鼠。
, http://www.100md.com
二、动物模型
向直径47.2 cm，高56 cm密闭染罐中注入99.8% CO 256 ml，分组将大鼠放入染毒罐中，静式吸入含CO的空气60 min，期间用CO仪测定罐内CO浓度3次，其浓度为2 950 ppm。染毒开始，动物表现活跃，5～6 min后开始躁动，8 min后四肢瘫软无力，呼吸急促，60～80次/min，15 min后大部分大鼠昏迷，占80%，60 min后出罐，出罐后30 min大鼠陆续苏醒，初期精神萎糜，1～2 h后外观上与对照组无明显差别。
表1 不同组别大鼠血清CK-BB含量测定(x±s，IU/L)
组别
例数
1 d
, http://www.100md.com 3 d
5 d
10 d
20 d
对照组
6
185±86
ACOP组
6
522±177*
233±40
328±101
706±116*
, 百拇医药
355±107
ACOP+HBO组
10
238±40
288±76
210±67
292±118
184±75
P值
<0.01
>0.05
>0.05
<0.001
, 百拇医药
<0.05
注：1.“*”表示该组与对照组比较P<0.001；2.表中P值为ACOP组和ACOP+HBO组对应组间的Q检验 三、实验动物的高压氧处理
实验动物按期放入80 cm×45 cm×40 cm的特制木箱进行高压氧处理。在舱内箱子一侧接输氧管，进气中测氧浓度为99.8%，另一侧有一个6 cm的出气中。高压氧处理采用高气压空气舱，压力0.2 Mpa，升压30 min稳压给氧60 min，减压40 min。给氧10 min后大鼠开始活跃，给氧60 min时大鼠均亢奋，减压时逐渐恢复平静，无一抽搐和死亡。
四、检测项目及方法
动物血清肌酸激酶(CK)测定是从大鼠心脏抽取2 ml血液，经离心后取血清，用美国Beckman公司△CX7型生化分析仪测定，方法为酶连续监测法，试剂由美国Beckman公司提供。另用美国Beckman公司迅光密度仪进行琼脂糖凝胶电泳，然后对电泳区带进扫描，得到CK-BB占总CK活性的百分比，通过总CK活性算出CK-BB的活性，肌酸激酶同工酶电泳试剂合由美国Beckman公司提供。
, http://www.100md.com
五、统计学处理
计量资料以平均数±标准差(x±s)表示。多个样本均数比较采用方差分析，P<0.05差异有显著意义，两两对比采用Q检验；同一时间不同组别间的比较采用两组资料的t检验。
结果
一氧化碳中毒后第1 d，ACOP组大鼠血清CK-BB含量显著性升高，与对照组比较P<0.001，第3 d后明显下降，第10 d升高最为明显，第20 d显著下降。ACOP后ACOP+HBO组大鼠血清CK-BB值虽有所升高，但方差分析差异无显著意义(P>0.05)。ACOP和ACOP+HBO两组比较，第1、10、20 d差异有显著意义(见表1)。
讨论
ACOP在世界许多国家中毒性疾病中居首位，我国占多种中毒性疾病发病率的48.7%，重症患者不及时治疗或治疗不当会留下严重的后遗症，如并发迟发性脑病将严重影响病人的生活质量，给病人、家庭及社会带来沉重负担。
, 百拇医药
我们曾对20例急性一氧化碳中毒患者做过临床研究，发现患者血清CK-BB含量的动态变化可以反映脑损伤的情况[2]。腾燕生等也观察过ACOP患者高压氧治疗前后血清CK及CK-BB的变化，结果显示ACOP患者血CK-BB活性升高，高压氧治疗后活性减少[3]。但无对照组又缺乏前瞻性及系统、动态观察，为此我们设立了这个实验。
本文结果表明，ACOP后大鼠血清CK-BB迅速升高，第3 d有所下降，至第10 d升至最高，第20 d尚未完全恢复正常，说明ACOP可造成脑损伤和血清酶学的改变。第3 d下降的原因尚不十分清楚，可能因为CK-BB的半衰期仅为1.86 h[4]，第10 d后再次升高则提示缺氧后所致脑损伤还在继续。ACOP+HBO组血清CK-BB活性在观察期内升高不明显。高压氧可以明显减轻ACOP引起的脑损伤和血清酶学的改变，与我们先前临床观察的结果及腾燕生等的报道一致[2，3]。
, 百拇医药
CK-BB为CK的一种脑型同工酶，主要存在于脑内神经元和胶质内，系一种可溶性胞浆蛋白，它极易扩散入血及脑脊液中[5]。正常成人血液中活性甚微，一般电泳法不能测出[6]。ACOP后脑缺氧损伤使其释放入血，所以其活性迅速升高，并随脑缺氧后水肿、高颅压、细胞坏死的逐渐出现而增加；高压氧治疗可以降低颅内压、减轻脑水肿并增加血氧含量、减少脑损伤[2]，故CK-BB无明显增加。CK-BB可以间接反映脑损伤的情况，具有很高的临床应用价值。ACOP后积极的高压氧治疗可明显减轻急性脑损伤、减少迟发性脑病的发生率。
作者单位：赵书弘(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
张鹏(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
杨文青(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
, 百拇医药
栗芳(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
胡永翔(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
武连华(高压氧科)
参考文献
1，高春锦，杨捷云.一氧化碳中毒及迟发脑病.见：高春锦，杨捷云，主编.实用高压氧医学.北京：学苑出版社，1997.169-185.
2，武连华，赵书弘，栗芳等.重度急性一氧化碳中毒患者血CK-BB动态变化及意义.高压氧医学杂志，1998.7:3-5.
3，腾燕生，邱亚西，刘奉亭，等.高压氧疗法对一氧化碳中毒病人血清肌酸激酶及其同工酶含量的影响.中华航海医学杂志，1994.1:91-93.
, 百拇医药
4，Anand S. CK isoenzyme variants in electrophoresis. Laboratory Medicine, 1989.20:305-310.
5，谭来勋，于步润，蔡转.肌酸激酶脑型同工酶在中风诊断中的意义.国外医学神经病学神经外科分册， 1995.22：126-129.
6，Longstreth WT, Kathleen JC, Markss M, et al. Cerebrospinal fluid and serum createine kinase BB actiuity afger out-of-hospital cadiac arrest.Neurology ,1981.31:455-458., 百拇医药
赵书弘 张鹏 武连华 杨文青 栗芳 胡永翔
摘要 目的：观察急性一氧化碳中毒(ACOP)后大鼠血清肌酸激酶同工酶BB(creatine kinase BB，CK-BB)的动态变化及高压氧(hyperbaric oxygenation，HBO)的影响。方法：制作大鼠一氧化碳中毒模型，随机分成2个亚组，ACOP组和ACOP+HBO组，每个亚组再按观察时间分为ACOP和ACOP+HBO后1、3、5、10和20 d组，正常对照 1组，预期处死后心脏取血测定不同组别血清CK-BB的变化。结果：ACOP 组：ACOP后第1dCK-BB显著升高，与对照组比较差异有显著意义，P<0.001；第3d起明显下降，与对照组比较差异无显著性意义，P>0.05；第10 d再次明显升高，P<0.001；第20 d下降，与对照组比较差异无显著意义，P>0.05。ACOP 后立即进行高压氧治疗(ACOP +HBO组)：CK-BB活性虽有所升高，但与对照组比较差异无显著意义，P>0.05。结论：ACOP后大鼠血清CK-BB活性迅速明显升高，高压氧治疗组血清CK-BB无明显升高，提示高压氧治疗是减轻ACOP急性脑损伤有效的治疗方法。
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关键词：一氧化碳中毒；肌酸激酶同工酶-BB；高压氧
急性一氧化碳中毒(ACOP)是一种冬季多发病，重症ACOP导致的脑损伤病情重、病程长、恢复慢、死亡率和致残率高[1]。CK-BB作为CK的一种脑型同工酶，主要存在于脑内神经元和胶质内，ACOP后脑缺氧损伤使其释放入血，所以其活性迅速升高，并随脑缺氧后水肿、高颅压、细胞坏死的出现而增加。作者从动物实验角度观察ACOP后血清CK-BB的动态变化，及高压氧治疗对CK-BB的影响。
材料与方法
一、实验动物及分组
选择健康成年Wistar大鼠86只，雌雄不拘，体重200～250 g，首都医科大学动物实验室提供(动物号医动字-1000147)，随机分成2个亚组，ACOP组和ACOP+HBO(高压氧)组，每个亚组再按观察时间分为ACOP后1、3、5、10和20 d组，正常对照1组。ACOP组中每小组和正常对照组各6只大鼠，ACOP+HBO组中每小组各10只大鼠。
, http://www.100md.com
二、动物模型
向直径47.2 cm，高56 cm密闭染罐中注入99.8% CO 256 ml，分组将大鼠放入染毒罐中，静式吸入含CO的空气60 min，期间用CO仪测定罐内CO浓度3次，其浓度为2 950 ppm。染毒开始，动物表现活跃，5～6 min后开始躁动，8 min后四肢瘫软无力，呼吸急促，60～80次/min，15 min后大部分大鼠昏迷，占80%，60 min后出罐，出罐后30 min大鼠陆续苏醒，初期精神萎糜，1～2 h后外观上与对照组无明显差别。
表1 不同组别大鼠血清CK-BB含量测定(x±s，IU/L)
组别
例数
1 d
, http://www.100md.com 3 d
5 d
10 d
20 d
对照组
6
185±86
ACOP组
6
522±177*
233±40
328±101
706±116*
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355±107
ACOP+HBO组
10
238±40
288±76
210±67
292±118
184±75
P值
<0.01
>0.05
>0.05
<0.001
, 百拇医药
<0.05
注：1.“*”表示该组与对照组比较P<0.001；2.表中P值为ACOP组和ACOP+HBO组对应组间的Q检验 三、实验动物的高压氧处理
实验动物按期放入80 cm×45 cm×40 cm的特制木箱进行高压氧处理。在舱内箱子一侧接输氧管，进气中测氧浓度为99.8%，另一侧有一个6 cm的出气中。高压氧处理采用高气压空气舱，压力0.2 Mpa，升压30 min稳压给氧60 min，减压40 min。给氧10 min后大鼠开始活跃，给氧60 min时大鼠均亢奋，减压时逐渐恢复平静，无一抽搐和死亡。
四、检测项目及方法
动物血清肌酸激酶(CK)测定是从大鼠心脏抽取2 ml血液，经离心后取血清，用美国Beckman公司△CX7型生化分析仪测定，方法为酶连续监测法，试剂由美国Beckman公司提供。另用美国Beckman公司迅光密度仪进行琼脂糖凝胶电泳，然后对电泳区带进扫描，得到CK-BB占总CK活性的百分比，通过总CK活性算出CK-BB的活性，肌酸激酶同工酶电泳试剂合由美国Beckman公司提供。
, http://www.100md.com
五、统计学处理
计量资料以平均数±标准差(x±s)表示。多个样本均数比较采用方差分析，P<0.05差异有显著意义，两两对比采用Q检验；同一时间不同组别间的比较采用两组资料的t检验。
结果
一氧化碳中毒后第1 d，ACOP组大鼠血清CK-BB含量显著性升高，与对照组比较P<0.001，第3 d后明显下降，第10 d升高最为明显，第20 d显著下降。ACOP后ACOP+HBO组大鼠血清CK-BB值虽有所升高，但方差分析差异无显著意义(P>0.05)。ACOP和ACOP+HBO两组比较，第1、10、20 d差异有显著意义(见表1)。
讨论
ACOP在世界许多国家中毒性疾病中居首位，我国占多种中毒性疾病发病率的48.7%，重症患者不及时治疗或治疗不当会留下严重的后遗症，如并发迟发性脑病将严重影响病人的生活质量，给病人、家庭及社会带来沉重负担。
, 百拇医药
我们曾对20例急性一氧化碳中毒患者做过临床研究，发现患者血清CK-BB含量的动态变化可以反映脑损伤的情况[2]。腾燕生等也观察过ACOP患者高压氧治疗前后血清CK及CK-BB的变化，结果显示ACOP患者血CK-BB活性升高，高压氧治疗后活性减少[3]。但无对照组又缺乏前瞻性及系统、动态观察，为此我们设立了这个实验。
本文结果表明，ACOP后大鼠血清CK-BB迅速升高，第3 d有所下降，至第10 d升至最高，第20 d尚未完全恢复正常，说明ACOP可造成脑损伤和血清酶学的改变。第3 d下降的原因尚不十分清楚，可能因为CK-BB的半衰期仅为1.86 h[4]，第10 d后再次升高则提示缺氧后所致脑损伤还在继续。ACOP+HBO组血清CK-BB活性在观察期内升高不明显。高压氧可以明显减轻ACOP引起的脑损伤和血清酶学的改变，与我们先前临床观察的结果及腾燕生等的报道一致[2，3]。
, 百拇医药
CK-BB为CK的一种脑型同工酶，主要存在于脑内神经元和胶质内，系一种可溶性胞浆蛋白，它极易扩散入血及脑脊液中[5]。正常成人血液中活性甚微，一般电泳法不能测出[6]。ACOP后脑缺氧损伤使其释放入血，所以其活性迅速升高，并随脑缺氧后水肿、高颅压、细胞坏死的逐渐出现而增加；高压氧治疗可以降低颅内压、减轻脑水肿并增加血氧含量、减少脑损伤[2]，故CK-BB无明显增加。CK-BB可以间接反映脑损伤的情况，具有很高的临床应用价值。ACOP后积极的高压氧治疗可明显减轻急性脑损伤、减少迟发性脑病的发生率。
作者单位：赵书弘(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
张鹏(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
杨文青(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
, 百拇医药
栗芳(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
胡永翔(100020 北京，首都医科大学附属北京红十字朝阳医院检验科)
武连华(高压氧科)
参考文献
1，高春锦，杨捷云.一氧化碳中毒及迟发脑病.见：高春锦，杨捷云，主编.实用高压氧医学.北京：学苑出版社，1997.169-185.
2，武连华，赵书弘，栗芳等.重度急性一氧化碳中毒患者血CK-BB动态变化及意义.高压氧医学杂志，1998.7:3-5.
3，腾燕生，邱亚西，刘奉亭，等.高压氧疗法对一氧化碳中毒病人血清肌酸激酶及其同工酶含量的影响.中华航海医学杂志，1994.1:91-93.
, 百拇医药
4，Anand S. CK isoenzyme variants in electrophoresis. Laboratory Medicine, 1989.20:305-310.
5，谭来勋，于步润，蔡转.肌酸激酶脑型同工酶在中风诊断中的意义.国外医学神经病学神经外科分册， 1995.22：126-129.
6，Longstreth WT, Kathleen JC, Markss M, et al. Cerebrospinal fluid and serum createine kinase BB actiuity afger out-of-hospital cadiac arrest.Neurology ,1981.31:455-458., 百拇医药