热休克蛋白70-肿瘤肽的免疫保护效应的实验研究
http://www.100md.com
中国病理生理杂志 2000年第10期第16卷 第七届肿瘤和第
作者：朴花 施广霞 于丽华 沈洁 郭连英 钱振超
单位：大连医科大学， 辽宁 大连 116027
关键词：
中国病理生理杂志0010227
目的：在多种应激条件下，细胞的一种适应性变化是基因表达谱明显改变，一组进化上高度保守的被称之为热休克蛋白(HSP)的家族，合成明显增加，其中HSP70是最保守和最受应激诱导的热休克蛋白。热休克蛋白能参与肿瘤特异性免疫，肿瘤组织中的HSP70-肽复合物具有肿瘤疫苗的作用，在体内外均能诱导出肿瘤特异的杀伤性γδT细胞。在本室榄香烯/丝裂霉素C复合瘤苗专利基础上，本文进一步探讨了榄香烯复合处理的肿瘤细胞疫苗(TCV)的抗瘤效应同HSP70-肿瘤肽免疫效应间的关系。方法和结果：通过ADP-琼脂糖亲和层析系统，从榄香烯/丝裂霉素C复合处理的Hca-F小鼠肝癌细胞瘤苗中，纯化制备了HSP70-肿瘤肽，并作Western-blot鉴定，称之为HHSP70。取健康的BALB/c小鼠32只，每组8只；用HHSP70免疫小鼠，免疫剂量分别为3、6、9 μg*0.1 mL-1/只，另设生理盐水组作攻击对照；免疫3次，每次间隔1周，未次免疫后7 d，用HCa-F肝癌细胞攻击，观察60 d。发现HHSP70免疫组对HCa-F细胞的攻击有较强的免疫保护作用，随着免疫剂量由低到高，存活率分别为37.5%、50%、50%，而对照组全部发病死亡。为进一步观察HHSP70的体内交叉免疫保护作用，分别用HHSP70 9 μg、27 μg,0.1 mL-1/只免疫615系小鼠，免疫程序同上，末次免疫7 d后，分别用HCa-F、L615瘤细胞攻击，继续观察60 d。结果发现9 μg、 27 μg二种剂量免疫组对2×104个/只L615瘤细胞的攻击，均缺乏保护作用，同对照组一样第11 d时全部死亡，而对4×105个/只HCa-F细胞攻击，依然出现显著的保护作用，仍有半数动物存活超过60 d，表明HSP70-肿瘤肽的体内免疫保护效应具有一定的肿瘤特异性。进一步用HHSP70冲击脾树突状细胞，然后把树突状细胞加到脾不粘附细胞中，活化培养3 d，发现HHSP70从2.5 μg/mL～20 μg/mL 范围内，能诱导脾细胞明显增殖(P<0.05)，但其剂量依赖性不甚明显。结论：HSP70-肿瘤肽可能通过体内最强的专职APC-树突状细胞进行提呈。
国家自然科学基金重点项目(No.39730440-Ⅱ)的组成部分, 百拇医药
单位：大连医科大学， 辽宁 大连 116027
关键词：
中国病理生理杂志0010227
目的：在多种应激条件下，细胞的一种适应性变化是基因表达谱明显改变，一组进化上高度保守的被称之为热休克蛋白(HSP)的家族，合成明显增加，其中HSP70是最保守和最受应激诱导的热休克蛋白。热休克蛋白能参与肿瘤特异性免疫，肿瘤组织中的HSP70-肽复合物具有肿瘤疫苗的作用，在体内外均能诱导出肿瘤特异的杀伤性γδT细胞。在本室榄香烯/丝裂霉素C复合瘤苗专利基础上，本文进一步探讨了榄香烯复合处理的肿瘤细胞疫苗(TCV)的抗瘤效应同HSP70-肿瘤肽免疫效应间的关系。方法和结果：通过ADP-琼脂糖亲和层析系统，从榄香烯/丝裂霉素C复合处理的Hca-F小鼠肝癌细胞瘤苗中，纯化制备了HSP70-肿瘤肽，并作Western-blot鉴定，称之为HHSP70。取健康的BALB/c小鼠32只，每组8只；用HHSP70免疫小鼠，免疫剂量分别为3、6、9 μg*0.1 mL-1/只，另设生理盐水组作攻击对照；免疫3次，每次间隔1周，未次免疫后7 d，用HCa-F肝癌细胞攻击，观察60 d。发现HHSP70免疫组对HCa-F细胞的攻击有较强的免疫保护作用，随着免疫剂量由低到高，存活率分别为37.5%、50%、50%，而对照组全部发病死亡。为进一步观察HHSP70的体内交叉免疫保护作用，分别用HHSP70 9 μg、27 μg,0.1 mL-1/只免疫615系小鼠，免疫程序同上，末次免疫7 d后，分别用HCa-F、L615瘤细胞攻击，继续观察60 d。结果发现9 μg、 27 μg二种剂量免疫组对2×104个/只L615瘤细胞的攻击，均缺乏保护作用，同对照组一样第11 d时全部死亡，而对4×105个/只HCa-F细胞攻击，依然出现显著的保护作用，仍有半数动物存活超过60 d，表明HSP70-肿瘤肽的体内免疫保护效应具有一定的肿瘤特异性。进一步用HHSP70冲击脾树突状细胞，然后把树突状细胞加到脾不粘附细胞中，活化培养3 d，发现HHSP70从2.5 μg/mL～20 μg/mL 范围内，能诱导脾细胞明显增殖(P<0.05)，但其剂量依赖性不甚明显。结论：HSP70-肿瘤肽可能通过体内最强的专职APC-树突状细胞进行提呈。
国家自然科学基金重点项目(No.39730440-Ⅱ)的组成部分, 百拇医药