葡萄球菌耐药性分析
葡萄球菌耐药性分析
赖宏芳 赵云 付晓野
摘 要： 目的 了解我院临床葡萄球菌感染的状况及对常用抗生素耐药性特点。方法 采用常规方法鉴定菌种，用K-B法及微量稀释法作17种抗生素体外抗菌活性研究。结果 315株葡萄球菌中凝固酶阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占48.79%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占48.14%。对17种抗生素耐药性试验都显示出较高的耐药率，但MRSA耐药率高于MSSA和CNS。MRSA只对万古霉素有100%的抗菌活性；MSSA对苯唑西林、万古霉素、利福平100%敏感，耐药率<20%有阿米卡星、头孢唑林、头孢呋汀(头孢呋肟)；CNS对万古霉素、利福平、亚胺培南100%敏感，耐药率<20%有头孢唑林和头孢呋汀。结论 G+菌感染近年来日见增多，MSSA，MRCNS，MSCNS与MRSA一样成为医院感染的重要病原菌，但对MRSA的感染更要引起足够的重视。切实加强实验室监测，对指导临床合理用药和制定有效治疗方案等具有十分重要的意义。
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关键词：葡萄球菌；耐药性
葡萄球菌是医院感染的主要致病菌之一，对多种抗生素高耐药及多重耐药，已成为临床治疗颇为棘手的问题。本文对我院3年中临床分离葡萄球菌进行细菌分布情况及耐药性分析，以了解细菌耐药的趋势，旨在提高临床医师对细菌耐药性的认识，有助于临床合理用药。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 收集本院1995年7月～1998年6月，从各类临床标本(痰、尿、血、脓及各种穿刺液)中分离菌株有315株。其中痰及肺灌洗液211株、泌尿道46株、血液18株，其他(伤口、宫腔、脐血、阴道分泌物等)40株。
1.2 抗菌药敏纸片 主要购自北京天坛生物制品检定所，少数由BBL公司提供，微量稀释板条购于浙江省宁波托普生物技术公司。
, 百拇医药
1.3 其他 M-H琼脂粉购于浙江省军区后勤部卫生防疫检验所，质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923。
1.4 细菌鉴定 按常规方法分离鉴定菌种，严格规范操作。
1.5 药敏试验 采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法按NCCLE(1995年)标准判读，自1997年7月使用微量稀释法，按NCCLE(1997年)标准判断结果。
2 结 果
2.1 MRSA，MRCNS检测 3年葡萄球菌分离率及耐苯唑西林的MRSA，MRCNS菌株逐年上升，见表1。
2.2 耐药率 207株金黄色葡萄球菌全部采用苯唑西林纸片作检测，MRSA对17种抗菌药物耐药率>42.10%，13种(76.5%)MSSA对所测17种抗菌药物耐药率>37.93%(表2)。108株凝固酶阴性葡萄球菌对抗菌药耐药率(表3)。
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表1 葡萄球菌耐苯唑西林的情况
时 间
金黄色葡萄球菌(SA)
凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)
菌株
S
I
R
耐药率(%)
菌株
S
I
R
, 百拇医药
耐药率(%)
1995.7～1996.6
41
23
0
18
43.90
30
19
0
11
36.67
1996.7～1997.6
, http://www.100md.com
47
26
0
21
44.68
28
16
0
12
42.86
1997.7～1998.6
119
54
, http://www.100md.com
3
62
52.10
49
20
0
29
59.18
3 讨 论
从表1中分析，近年来我院患者感染致病菌中葡萄球菌检出率呈逐年上升趋势，315株葡萄球菌，其中金黄色葡萄球菌207株，凝固酶阴性葡萄球菌108株，315株经全部采用苯唑西林纸片作检测，得知MRSA占48.1%，MRCNS占48.14%，与国内报道的约50%相接近[1，2]。近年来我院住院患者感染致病菌中革兰阳性菌所占的比率明显升高，与大量头孢菌素和氟喹类进入临床并有滥用抑制了G-球菌有关，与国内外有关资料报道相似[3～6]，说明云南省虽然属经济不发达地区，但在细菌感染治疗中的滥用现状及所遇到的问题与中心城市、发达地区是相似的。表2 金黄色葡萄球菌对17种抗菌药物的耐药性
, 百拇医药
抗菌药物
MRSA
MSSA
菌株
S
I
R
耐药率(%)
菌株
S
I
R
耐药率(%)
, http://www.100md.com 苯唑西林
63
0
0
63
100.00
70
70
0
0
0.00
青霉素G
41
0
, 百拇医药
0
41
100.00
46
19
0
27
58.69
SMZ-TMP
28
0
0
28
, http://www.100md.com 100.00
27
9
0
18
66.67
万古霉素
49
47
2
0
0.00
40
40
, 百拇医药
0
0
0.00
头孢唑林
37
11
0
26
70.27
34
29
0
5
14.71
, 百拇医药
环丙沙星
30
10
2
18
60.00
29
18
0
11
37.98
头孢曲松
30
, 百拇医药 11
4
15
50.00
24
20
0
4
16.67
氨苄西林
28
1
0
27
, 百拇医药
96.43
26
1
1
24
92.31
亚胺培南
24
17
0
7
29.17
16
, 百拇医药 14
0
2
12.50
红霉素
24
0
1
23
95.83
24
9
0
15
, http://www.100md.com
62.50
多西环素
22
7
0
15
68.18
24
6
3
15
62.50
阿米卡星
, 百拇医药 19
9
2
8
42.10
27
24
0
3
11.11
哌拉西林
16
8
1
, 百拇医药
7
43.75
29
18
0
11
37.93
新生霉素
17
12
0
5
29.41
, http://www.100md.com 8
8
0
0
0.00
庆大霉素
19
4
1
14
73.68
20
11
4
, 百拇医药
5
25.00
头孢呋汀
12
5
1
6
50.00
21
17
1
3
14.29
利福平
, 百拇医药
13
9
2
2
15.38
7
6
1
0
0.00
表3 凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对抗菌药物的耐药性
抗菌药物
菌株
, 百拇医药
S
I
R
耐药率(%)
SMZ-TMP
38
3
0
35
92.11
青霉素
45
4
, 百拇医药 2
39
86.67
氨苄西林
27
5
0
22
81.48
苯唑西林
67
28
1
38
, 百拇医药
56.72
红霉素
28
10
3
15
53.57
环丙沙星
31
14
3
14
45.16
, 百拇医药 氧氟沙星
21
8
4
9
42.86
庆大霉素
31
20
0
11
35.48
头孢曲松
29
, 百拇医药
18
6
5
17.24
头孢唑林
44
38
2
4
9.09
亚胺培南
23
23
0
, 百拇医药
0
0.00
万古霉素
41
41
0
0
0.00
利福平
15
13
2
0
0.00
, 百拇医药
315株葡萄球菌对多种类的抗菌药物产生多重耐药性，表2可见MRSA对17种抗生素除了对万古霉素敏感、对利福平较敏感外，对其他15种抗菌药物呈高耐药性；MSSA对万古霉素、新生霉素、利福平100%敏感，对阿米卡星、头孢呋汀、头孢唑林等轻度耐药外，对其余的9种抗生素有较高的耐药性。从表3，CNS的耐药性也很高，对苯唑西林耐药率是56.72%，高于35.48%有8种抗生素。但对万古霉素、亚胺培南、利福平100%敏感，对头孢唑林和头孢曲松较敏感。多重耐药典型代表是MRSA[5]，本文结果说明对绝大多数β-内酰胺类抗生素呈现高交叉耐药，对氨基糖苷类、大环内酯和喹喏酮也有耐药性。MRSA菌的感染仍是目前临床细菌感染治疗难题，即使有时体外药敏试验显示对某些第一代或第二代头孢菌素敏感，但临床治疗也往往失败，目前只有万古霉素是治疗MRSA感染最敏感药物。对抗生素耐药性MRSA明显高于MSSA，MRCNS，MSCNS，因此，无论是实验室和临床都应严格区分是MRSA和MRCNS或MSSA和MRCNS，以有利于疾病的治疗。
, 百拇医药 赖宏芳(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
赵云(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
付晓野(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
参考文献
1，朱德妹, 汪复, 刘陈谊. 上海地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的研究[J]. 中华传染病杂志, 1988, 6: 34.
2，刘渠, 白松涛, 叶梅君, 等. 血浆凝回酶阴性葡萄球菌鉴定及耐药谱分析[J]. 中华医院感染学杂志, 1999, 9(1): 13.
3，张天托, 唐英春. 临床分离菌对19种常用药物的耐药性监测[J]. 中国抗生素杂志, 1997, 22(1): 45.
, 百拇医药
4，李仲兴, 王秀华, 边占小. 耐甲氧西林表皮葡萄球菌的检测及对抗生素的敏感性[J]. 中华医学检验杂志, 1992, 15: 353.
5，Kloos WE, Bannerman TL. Update on clinical singnificance of coagulase-negative staphylococci[J]. Clin Microbiol Rev, 1994, 7: 117.
6，李胜利, 张婴元, 吴菊芳, 等. 葡萄球菌医院感染的调查[J]. 中华医院感染学杂志, 1998, 8(2): 65.
7，叶应妩, 杨天兵. 细菌耐药机理的研究进展[J]. 中华医学检验杂志, 1995, 18: 326., 百拇医药
赖宏芳 赵云 付晓野
摘 要： 目的 了解我院临床葡萄球菌感染的状况及对常用抗生素耐药性特点。方法 采用常规方法鉴定菌种，用K-B法及微量稀释法作17种抗生素体外抗菌活性研究。结果 315株葡萄球菌中凝固酶阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)占48.79%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)占48.14%。对17种抗生素耐药性试验都显示出较高的耐药率，但MRSA耐药率高于MSSA和CNS。MRSA只对万古霉素有100%的抗菌活性；MSSA对苯唑西林、万古霉素、利福平100%敏感，耐药率<20%有阿米卡星、头孢唑林、头孢呋汀(头孢呋肟)；CNS对万古霉素、利福平、亚胺培南100%敏感，耐药率<20%有头孢唑林和头孢呋汀。结论 G+菌感染近年来日见增多，MSSA，MRCNS，MSCNS与MRSA一样成为医院感染的重要病原菌，但对MRSA的感染更要引起足够的重视。切实加强实验室监测，对指导临床合理用药和制定有效治疗方案等具有十分重要的意义。
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关键词：葡萄球菌；耐药性
葡萄球菌是医院感染的主要致病菌之一，对多种抗生素高耐药及多重耐药，已成为临床治疗颇为棘手的问题。本文对我院3年中临床分离葡萄球菌进行细菌分布情况及耐药性分析，以了解细菌耐药的趋势，旨在提高临床医师对细菌耐药性的认识，有助于临床合理用药。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 收集本院1995年7月～1998年6月，从各类临床标本(痰、尿、血、脓及各种穿刺液)中分离菌株有315株。其中痰及肺灌洗液211株、泌尿道46株、血液18株，其他(伤口、宫腔、脐血、阴道分泌物等)40株。
1.2 抗菌药敏纸片 主要购自北京天坛生物制品检定所，少数由BBL公司提供，微量稀释板条购于浙江省宁波托普生物技术公司。
, 百拇医药
1.3 其他 M-H琼脂粉购于浙江省军区后勤部卫生防疫检验所，质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923。
1.4 细菌鉴定 按常规方法分离鉴定菌种，严格规范操作。
1.5 药敏试验 采用Kirby-Bauer(K-B)纸片扩散法按NCCLE(1995年)标准判读，自1997年7月使用微量稀释法，按NCCLE(1997年)标准判断结果。
2 结 果
2.1 MRSA，MRCNS检测 3年葡萄球菌分离率及耐苯唑西林的MRSA，MRCNS菌株逐年上升，见表1。
2.2 耐药率 207株金黄色葡萄球菌全部采用苯唑西林纸片作检测，MRSA对17种抗菌药物耐药率>42.10%，13种(76.5%)MSSA对所测17种抗菌药物耐药率>37.93%(表2)。108株凝固酶阴性葡萄球菌对抗菌药耐药率(表3)。
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表1 葡萄球菌耐苯唑西林的情况
时 间
金黄色葡萄球菌(SA)
凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)
菌株
S
I
R
耐药率(%)
菌株
S
I
R
, 百拇医药
耐药率(%)
1995.7～1996.6
41
23
0
18
43.90
30
19
0
11
36.67
1996.7～1997.6
, http://www.100md.com
47
26
0
21
44.68
28
16
0
12
42.86
1997.7～1998.6
119
54
, http://www.100md.com
3
62
52.10
49
20
0
29
59.18
3 讨 论
从表1中分析，近年来我院患者感染致病菌中葡萄球菌检出率呈逐年上升趋势，315株葡萄球菌，其中金黄色葡萄球菌207株，凝固酶阴性葡萄球菌108株，315株经全部采用苯唑西林纸片作检测，得知MRSA占48.1%，MRCNS占48.14%，与国内报道的约50%相接近[1，2]。近年来我院住院患者感染致病菌中革兰阳性菌所占的比率明显升高，与大量头孢菌素和氟喹类进入临床并有滥用抑制了G-球菌有关，与国内外有关资料报道相似[3～6]，说明云南省虽然属经济不发达地区，但在细菌感染治疗中的滥用现状及所遇到的问题与中心城市、发达地区是相似的。表2 金黄色葡萄球菌对17种抗菌药物的耐药性
, 百拇医药
抗菌药物
MRSA
MSSA
菌株
S
I
R
耐药率(%)
菌株
S
I
R
耐药率(%)
, http://www.100md.com 苯唑西林
63
0
0
63
100.00
70
70
0
0
0.00
青霉素G
41
0
, 百拇医药
0
41
100.00
46
19
0
27
58.69
SMZ-TMP
28
0
0
28
, http://www.100md.com 100.00
27
9
0
18
66.67
万古霉素
49
47
2
0
0.00
40
40
, 百拇医药
0
0
0.00
头孢唑林
37
11
0
26
70.27
34
29
0
5
14.71
, 百拇医药
环丙沙星
30
10
2
18
60.00
29
18
0
11
37.98
头孢曲松
30
, 百拇医药 11
4
15
50.00
24
20
0
4
16.67
氨苄西林
28
1
0
27
, 百拇医药
96.43
26
1
1
24
92.31
亚胺培南
24
17
0
7
29.17
16
, 百拇医药 14
0
2
12.50
红霉素
24
0
1
23
95.83
24
9
0
15
, http://www.100md.com
62.50
多西环素
22
7
0
15
68.18
24
6
3
15
62.50
阿米卡星
, 百拇医药 19
9
2
8
42.10
27
24
0
3
11.11
哌拉西林
16
8
1
, 百拇医药
7
43.75
29
18
0
11
37.93
新生霉素
17
12
0
5
29.41
, http://www.100md.com 8
8
0
0
0.00
庆大霉素
19
4
1
14
73.68
20
11
4
, 百拇医药
5
25.00
头孢呋汀
12
5
1
6
50.00
21
17
1
3
14.29
利福平
, 百拇医药
13
9
2
2
15.38
7
6
1
0
0.00
表3 凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)对抗菌药物的耐药性
抗菌药物
菌株
, 百拇医药
S
I
R
耐药率(%)
SMZ-TMP
38
3
0
35
92.11
青霉素
45
4
, 百拇医药 2
39
86.67
氨苄西林
27
5
0
22
81.48
苯唑西林
67
28
1
38
, 百拇医药
56.72
红霉素
28
10
3
15
53.57
环丙沙星
31
14
3
14
45.16
, 百拇医药 氧氟沙星
21
8
4
9
42.86
庆大霉素
31
20
0
11
35.48
头孢曲松
29
, 百拇医药
18
6
5
17.24
头孢唑林
44
38
2
4
9.09
亚胺培南
23
23
0
, 百拇医药
0
0.00
万古霉素
41
41
0
0
0.00
利福平
15
13
2
0
0.00
, 百拇医药
315株葡萄球菌对多种类的抗菌药物产生多重耐药性，表2可见MRSA对17种抗生素除了对万古霉素敏感、对利福平较敏感外，对其他15种抗菌药物呈高耐药性；MSSA对万古霉素、新生霉素、利福平100%敏感，对阿米卡星、头孢呋汀、头孢唑林等轻度耐药外，对其余的9种抗生素有较高的耐药性。从表3，CNS的耐药性也很高，对苯唑西林耐药率是56.72%，高于35.48%有8种抗生素。但对万古霉素、亚胺培南、利福平100%敏感，对头孢唑林和头孢曲松较敏感。多重耐药典型代表是MRSA[5]，本文结果说明对绝大多数β-内酰胺类抗生素呈现高交叉耐药，对氨基糖苷类、大环内酯和喹喏酮也有耐药性。MRSA菌的感染仍是目前临床细菌感染治疗难题，即使有时体外药敏试验显示对某些第一代或第二代头孢菌素敏感，但临床治疗也往往失败，目前只有万古霉素是治疗MRSA感染最敏感药物。对抗生素耐药性MRSA明显高于MSSA，MRCNS，MSCNS，因此，无论是实验室和临床都应严格区分是MRSA和MRCNS或MSSA和MRCNS，以有利于疾病的治疗。
, 百拇医药 赖宏芳(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
赵云(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
付晓野(云南省昆明市延安医院， 云南 昆明 650051)
参考文献
1，朱德妹, 汪复, 刘陈谊. 上海地区甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的研究[J]. 中华传染病杂志, 1988, 6: 34.
2，刘渠, 白松涛, 叶梅君, 等. 血浆凝回酶阴性葡萄球菌鉴定及耐药谱分析[J]. 中华医院感染学杂志, 1999, 9(1): 13.
3，张天托, 唐英春. 临床分离菌对19种常用药物的耐药性监测[J]. 中国抗生素杂志, 1997, 22(1): 45.
, 百拇医药
4，李仲兴, 王秀华, 边占小. 耐甲氧西林表皮葡萄球菌的检测及对抗生素的敏感性[J]. 中华医学检验杂志, 1992, 15: 353.
5，Kloos WE, Bannerman TL. Update on clinical singnificance of coagulase-negative staphylococci[J]. Clin Microbiol Rev, 1994, 7: 117.
6，李胜利, 张婴元, 吴菊芳, 等. 葡萄球菌医院感染的调查[J]. 中华医院感染学杂志, 1998, 8(2): 65.
7，叶应妩, 杨天兵. 细菌耐药机理的研究进展[J]. 中华医学检验杂志, 1995, 18: 326., 百拇医药