Bmp-2和Opg在小鼠成骨细胞中的共表达
骨质疏松症、骨转移癌及类风湿性关节炎等疾病的骨破坏源于破骨细胞的骨吸收功能超过了成骨细胞的骨形成作用，骨保护素(OPG)能显著抑制破骨细胞的分化、增殖和骨吸收功能，骨形成蛋白-2(BMP-2)可显著促进成骨细胞系中OPG的表达，因此，联合应用OPG和BMP-2，可望给骨破坏疾病的治疗研究提供一个新思路。本研究以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板，RT-PCR法获得人OPG的编码区cD鄄NA，克隆入真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点，再将人BMP-2的编码区cD鄄NA克隆入pIRES2-EGFP中的BstXI位点，构建BMP-2和OPG的双顺反子真核表达载体pIRES2-BMP-2-OPG，在阳离子脂质体介导下转染小鼠成肌细胞C2C12，Westernblot法检测BMP-2和OPG的表达。结果：①获得了人OPG编码区全长cDNA。②构建人BMP-2和OPG的双顺反子真核表达载体pIRES2-BMP-2-OPG。③经Westernblot检测，pIRES2-BMP-2-OPG转染C2C12细胞后，细胞可稳定表达BMP-2和OPG。本研究构建了人BMP-2和OPG的共表达真核载体，并可在小鼠成肌细胞C2C12中稳定表达，为应用BMP-2和OPG进行骨质疏松等疾病的治疗研究奠定了基础。, 百拇医药