白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N3基因的原核表达及鉴定
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中山医科大学寄生虫学教研室 广州510080 吴瑜；黄炯烈；周国理；葛春喜；王玲
白纹伊蚊|细胞色素P450|CYP6N3|原核表达,白纹伊蚊细胞色素P450CYP6N3基因的原核表达及鉴定
参见附件(80kb)。
中山医科大学寄生虫学教研室 广州510080 吴瑜；黄炯烈；周国理；葛春喜；王玲
关键词：白纹伊蚊；细胞色素P450；CYP6N3；原核表达
摘要：目的 对白纹伊蚊细胞色素P4 5 0CYP6N3基因进行原核表达 ,以获得高效表达蛋白。方法 根据CYP6N3基因的全长cRNA为模板进行RT -PCR。产物经T -A克隆测序鉴定后 ,亚克隆入原核融合表达载体 pGEX - 4T - 1(含有编码 2 6KDaGST的基因序列 )中 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ,通过Westernblot分析鉴定目的蛋白的位置 ,并运用核酸蛋白分析仪扫描凝胶以确定表达产物的含量。结果 获得了高效表达的融合蛋白GST -CYP6N3,表达量占菌体总蛋白的 37 4 9%。结论 本实验成功地异源表达了白纹伊蚊CYP6N3基因...
中山医科大学寄生虫学教研室 广州510080 吴瑜；黄炯烈；周国理；葛春喜；王玲
关键词：白纹伊蚊；细胞色素P450；CYP6N3；原核表达
摘要：目的 对白纹伊蚊细胞色素P4 5 0CYP6N3基因进行原核表达 ,以获得高效表达蛋白。方法 根据CYP6N3基因的全长cRNA为模板进行RT -PCR。产物经T -A克隆测序鉴定后 ,亚克隆入原核融合表达载体 pGEX - 4T - 1(含有编码 2 6KDaGST的基因序列 )中 ,在大肠杆菌BL2 1(DE3)中进行原核表达。将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 ,通过Westernblot分析鉴定目的蛋白的位置 ,并运用核酸蛋白分析仪扫描凝胶以确定表达产物的含量。结果 获得了高效表达的融合蛋白GST -CYP6N3,表达量占菌体总蛋白的 37 4 9%。结论 本实验成功地异源表达了白纹伊蚊CYP6N3基因...
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