Hbv聚合酶Rtv173L变异的功能分析
美国Dekaney等报告，体外研究证明，rtL180M+rtM204V变异株及rtV173L+rtL180M+rtM204V变异株，均对拉米夫定(LAM)高度耐药，而对阿德福韦(ADV)仍敏感，这与临床结果一致。rtV173L变异株显著增加野生型及rtL180M+rtM204V变异株病毒的复制。
研究发现，在对LAM耐药的慢乙肝(CHB)病人中，9%～22%存在HBV聚合酶rtV173L变异(以前称其为V521L变异)，常与LAM耐药突变rtL180M+rtM204V同时存在。为了解rtV173L变异在体外对HBV野生株及rtL180M+rtM204V变异株的耐药性及HBV复制的影响。研究者分别用HBV野生株、rtV173L变异株、rtL180M+rtM204V变异株或rtV173L+rtL180M+rtM204V变异株转染HepG2细胞，给予转染细胞ADV或LAM 1周，观察抗病毒药的敏感性，测定细胞内复制中间体和每种HBV株的LAM和ADV的IC50。转染后1周定量测定细胞内和细胞外HBV DNA水平。
结果显示，单独的rtV173L变异株对LAM、ADV的敏感性不改变，rtL180M+rtM204V变异株及rtV173L+rtL180M+rtM204V变异株，均对LAM高度耐药，但对ADV仍敏感。野生株或rtL180M+rtM204V变异株再加rtV173L变异株，分别使细胞内HBV DNA复制量增加37%和48%(P<0.01)。该模型提示，rtV173L残基的主链位于HBV DNA模板链的下面，而它的侧链朝向疏水核心，在此位置亮氨酸(Leu)取代缬氨酸(Vak)，将会引起模板DNA的复位，帮助定位模板第1个碱基突出端，以便与rtL180M+rtM204V变异中的dNTP底物更好地相互作用。
研究者认为，rtV173L变异的位置显示，它可能参与HBV DNA模板层的复位，这可解释体外病毒复制的增加。, http://www.100md.com(万华 摘译)
研究发现，在对LAM耐药的慢乙肝(CHB)病人中，9%～22%存在HBV聚合酶rtV173L变异(以前称其为V521L变异)，常与LAM耐药突变rtL180M+rtM204V同时存在。为了解rtV173L变异在体外对HBV野生株及rtL180M+rtM204V变异株的耐药性及HBV复制的影响。研究者分别用HBV野生株、rtV173L变异株、rtL180M+rtM204V变异株或rtV173L+rtL180M+rtM204V变异株转染HepG2细胞，给予转染细胞ADV或LAM 1周，观察抗病毒药的敏感性，测定细胞内复制中间体和每种HBV株的LAM和ADV的IC50。转染后1周定量测定细胞内和细胞外HBV DNA水平。
结果显示，单独的rtV173L变异株对LAM、ADV的敏感性不改变，rtL180M+rtM204V变异株及rtV173L+rtL180M+rtM204V变异株，均对LAM高度耐药，但对ADV仍敏感。野生株或rtL180M+rtM204V变异株再加rtV173L变异株，分别使细胞内HBV DNA复制量增加37%和48%(P<0.01)。该模型提示，rtV173L残基的主链位于HBV DNA模板链的下面，而它的侧链朝向疏水核心，在此位置亮氨酸(Leu)取代缬氨酸(Vak)，将会引起模板DNA的复位，帮助定位模板第1个碱基突出端，以便与rtL180M+rtM204V变异中的dNTP底物更好地相互作用。
研究者认为，rtV173L变异的位置显示，它可能参与HBV DNA模板层的复位，这可解释体外病毒复制的增加。, http://www.100md.com(万华 摘译)