人卵母细胞的低温贮藏
在这次“生殖医学于辅助生育技术国际研讨会”上，北京大学第一医院生殖与遗传中心主任李晓红教授的演讲内容获得了众多与会者的密切关注。在题目为“人卵母细胞的低温贮藏”的演讲中，李晓红教授指出，人卵母细胞慢冻快融方法低温贮藏的应用可获得较高的受精率、胚胎分裂率和满意的胚胎形态，适于常规应用。该慢冻快融方法较目前常用的玻璃化法有更高的稳定性。
在接受记者采访时，李晓红教授表示，当前，对于“人卵母细胞的低温贮藏”这一研究热点问题，不仅学术界人士非常关注，而且由于应用该技术的直接结果涉及卵子库建立的一些技术问题，社会上不少女性也很关注这方面的研究进展。
据李晓红教授介绍，在人卵母细胞的低温贮藏过程中，判断一种低温贮藏方法的价值主要是看经该方法冻融后的人卵母细胞存活率。对处于减数分裂二期的卵母细胞的相关研究结果显示，其存活率受多种因素影响。所以，尽管目前国际上有关人卵母细胞的低温贮藏方法有很多种，而且相关研究报道显示，用经冷冻后存活的人卵母细胞仍可获得较好的受精和分裂率，甚至使女性怀孕，但这些冷冻方法均没有被发展成为可用于常规处理的方法。
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分析其中的原因时，李晓红教授认为，处于减数分裂二期的卵母细胞可能对冷冻特别敏感。在大多数情况下，尽管当环境温度恢复到正常时，其纺锤体可以重新组合，但原来的冷冻过程可使其非整倍体染色体的发生率增加，因此染色体不可能在重新形成的纺锤体中完全正确地排列。以往的研究提示，当温度较正常体温下降7℃时，卵母细胞将发生不可逆的纺锤体变化。造成这种结果的原因主要在于，当暴露于冻存保护剂时，卵母细胞遭受了大幅度温度变化的刺激,其细胞骨架受损，透明带也变硬，使其雌原核形成失败，从而使精子穿越卵母细胞透明带及形成雄原核的能力下降，导致经冻存-复苏处理的卵母细胞的受精率下降。
在这次研讨会上，李晓红教授报告了她领导的研究组开展人卵母细胞慢冻快融方法研究的结果。在该项研究中，科研人员通过临床试验，对这种慢冻快融方法的效率和复苏卵的受精率以及随后的胚胎发育率进行了评估。在报告中，李晓红教授介绍了研究过程中的一些具体步骤，如在采用慢冻快融方法中，把减数分裂二期人卵母细胞贮存于含有不同蔗糖浓度的1，2-丙二醇中；在对卵母细胞玻璃化冷冻保存处理中，她们用以乙烯基乙二醇为基础的冷冻液处理卵子，在冷冻管中使其玻璃化，在卵与玻璃化液接触不到两分钟的时间内，把冷冻管放入液氮中。在卵母细胞复苏后，将其通过卵胞浆内单精子注射(ICSI)受精，并记录卵母细胞存活率、受精结果和胚胎分裂率等。研究结果显示，在使用慢冻快融方法时，用高浓度的蔗糖冻存液保存的卵母细胞具有很高的存活率；对卵丘进行部分解除和完全解离，两者之间复苏后的卵子存活率差别无显著性意义(分别为83%和85%)。研究结果还提示，在降温之前冷冻保护剂作用时间越长，卵母细胞的存活率越高；而采用玻璃化方法的对照组显示，卵母细胞存活率不够稳定。随后的临床试验结果显示，人卵母细胞慢冻快融方法的低温贮藏应用可获得较高的受精率(67%)、胚胎分裂率(78%)和满意的胚胎形态，且其稳定性较玻璃化方法更高，适于常规应用。
在解释这项研究的实际应用价值时，李晓红教授告诉记者，当前的临床工作中，将近一半的体外受精和胚胎移移技术(IVF-ET)治疗周期有剩余的卵母细胞，如果将这部分剩余的卵母细胞合理冻存，再经IVF-ET处理后放回宫腔，可减少对患者的一次取卵过程而增加其一次受孕的机会。采用人卵母细胞的低温贮藏技术，临床上主要应用于赠卵和因放疗、化疗、手术治疗而失去卵巢功能的病人，也能满足一些女性因各种原因希望在年轻时将卵子寄存，到一定年龄后再使用年轻时寄存的卵子的需求。说直白一点，这方面技术的发展是在为卵子库的建立打基础。
据李晓红教授透露，她们已经提出了人卵母细胞慢冻快融方法的专利申请，希望能够很快将这项技术用于临床工作中。, http://www.100md.com
在接受记者采访时，李晓红教授表示，当前，对于“人卵母细胞的低温贮藏”这一研究热点问题，不仅学术界人士非常关注，而且由于应用该技术的直接结果涉及卵子库建立的一些技术问题，社会上不少女性也很关注这方面的研究进展。
据李晓红教授介绍，在人卵母细胞的低温贮藏过程中，判断一种低温贮藏方法的价值主要是看经该方法冻融后的人卵母细胞存活率。对处于减数分裂二期的卵母细胞的相关研究结果显示，其存活率受多种因素影响。所以，尽管目前国际上有关人卵母细胞的低温贮藏方法有很多种，而且相关研究报道显示，用经冷冻后存活的人卵母细胞仍可获得较好的受精和分裂率，甚至使女性怀孕，但这些冷冻方法均没有被发展成为可用于常规处理的方法。
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分析其中的原因时，李晓红教授认为，处于减数分裂二期的卵母细胞可能对冷冻特别敏感。在大多数情况下，尽管当环境温度恢复到正常时，其纺锤体可以重新组合，但原来的冷冻过程可使其非整倍体染色体的发生率增加，因此染色体不可能在重新形成的纺锤体中完全正确地排列。以往的研究提示，当温度较正常体温下降7℃时，卵母细胞将发生不可逆的纺锤体变化。造成这种结果的原因主要在于，当暴露于冻存保护剂时，卵母细胞遭受了大幅度温度变化的刺激,其细胞骨架受损，透明带也变硬，使其雌原核形成失败，从而使精子穿越卵母细胞透明带及形成雄原核的能力下降，导致经冻存-复苏处理的卵母细胞的受精率下降。
在这次研讨会上，李晓红教授报告了她领导的研究组开展人卵母细胞慢冻快融方法研究的结果。在该项研究中，科研人员通过临床试验，对这种慢冻快融方法的效率和复苏卵的受精率以及随后的胚胎发育率进行了评估。在报告中，李晓红教授介绍了研究过程中的一些具体步骤，如在采用慢冻快融方法中，把减数分裂二期人卵母细胞贮存于含有不同蔗糖浓度的1，2-丙二醇中；在对卵母细胞玻璃化冷冻保存处理中，她们用以乙烯基乙二醇为基础的冷冻液处理卵子，在冷冻管中使其玻璃化，在卵与玻璃化液接触不到两分钟的时间内，把冷冻管放入液氮中。在卵母细胞复苏后，将其通过卵胞浆内单精子注射(ICSI)受精，并记录卵母细胞存活率、受精结果和胚胎分裂率等。研究结果显示，在使用慢冻快融方法时，用高浓度的蔗糖冻存液保存的卵母细胞具有很高的存活率；对卵丘进行部分解除和完全解离，两者之间复苏后的卵子存活率差别无显著性意义(分别为83%和85%)。研究结果还提示，在降温之前冷冻保护剂作用时间越长，卵母细胞的存活率越高；而采用玻璃化方法的对照组显示，卵母细胞存活率不够稳定。随后的临床试验结果显示，人卵母细胞慢冻快融方法的低温贮藏应用可获得较高的受精率(67%)、胚胎分裂率(78%)和满意的胚胎形态，且其稳定性较玻璃化方法更高，适于常规应用。
在解释这项研究的实际应用价值时，李晓红教授告诉记者，当前的临床工作中，将近一半的体外受精和胚胎移移技术(IVF-ET)治疗周期有剩余的卵母细胞，如果将这部分剩余的卵母细胞合理冻存，再经IVF-ET处理后放回宫腔，可减少对患者的一次取卵过程而增加其一次受孕的机会。采用人卵母细胞的低温贮藏技术，临床上主要应用于赠卵和因放疗、化疗、手术治疗而失去卵巢功能的病人，也能满足一些女性因各种原因希望在年轻时将卵子寄存，到一定年龄后再使用年轻时寄存的卵子的需求。说直白一点，这方面技术的发展是在为卵子库的建立打基础。
据李晓红教授透露，她们已经提出了人卵母细胞慢冻快融方法的专利申请，希望能够很快将这项技术用于临床工作中。, http://www.100md.com