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编号:10335061
中西药联合应用对感染性泌尿系统疾病致病菌抑菌效果的实验研究
http://www.100md.com 2003年5月10日 清阳客栈
     近年来,由于大量抗生素的广泛应用和不按规定的滥用,使耐药菌株不断增加,并出现一菌多耐的现象,这种广谱耐药菌的形成,给临床治疗带来极大的困难。因此,筛选高效的抗菌药,寻找更有效的治疗方法是当前十分紧迫的任务。为此,我们用中药联合药敏试验的方法对造成泌尿系统感染的四种常见致病菌-大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌进行了抑菌效果探讨,现将方法及结果报告如下。

    1·材料与方法

    1·1培养基:营养琼脂(中国医药集团上海化学试剂公司生产),按说明书配制,倒平皿备用。

    1·2药敏纸片:北京天坛药物生物技术开发公司生产

    1·3试验菌株:试验用三种菌株由中国药品生物制品检定所菌种室提供。大肠杆菌菌号为44113,变形杆菌菌号为32013,绿脓杆菌菌号为10102。

    1·4中药:采用治疗感染性泌尿系统的常用中药,主要有猪苓、紫花地丁、鸭跖草等药物。经过鉴定后,根据中药的性质采取煎煮、浸取、醇提等方法制备实验用药。药物的终浓度为1g生药/ml,中速离心10分钟,然后根据药物性质采取高压灭菌,过滤除菌或其他方法除去细菌,置-30℃。取上清液,装入试管中。
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    2·结果

    2·1药敏纸片抑菌效果的测定:营养琼脂平板按说明配制,分别取三种细菌的冻干粉复苏,接种在琼脂斜面培养基上18-24小时,用无菌接种环取少量细菌培养物,伸入肉汤培养基中,培养18-24小时。然后用无菌生理盐水配成107/ml的菌悬液。用无菌棉签蘸取菌液涂布于营养琼脂板上,待干后贴上标准的药敏纸片,37℃培养18小时观察结果,见表1。

    2·2中西药联用药敏试验:琼脂平板的制备同前,将培养18小时的三种菌株分别配成107/ml的菌悬液,涂布于预先烤过的药敏平板上,待干后,取药敏纸片滴加0.5ml中药液,贴在药敏平板上。另取不含药物的消毒滤纸片(按药敏纸片规格制成),滴加0.5ml中药液,贴在同一平板上。37℃培养18小时,观察结果,见表2。

    2·3标准:药物抑菌效果用3次实验抑菌圈的平均面积表示。若两种药物同时应用的抑菌面积等于它们单独应用时的抑菌圈面积之和(在±5%范围内),则判为作用相加;若两药联合应用时抑菌圈面积大于它们单独应用时抑菌圈面积之和,则判为协同;反之,则为拮抗。
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    3·讨论

    泌尿系统感染是内科比较常见的病种之一,其主要症状为尿频、尿急、尿痛、尿浊而黄或尿中带血,作尿常规检查,提示异常。致病菌主要为大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌。此病属于祖国医学的湿热下注,热在膀胱等范畴。西医治疗方法主要是选择对致病菌敏感的抗生素。然而,细菌对药物的耐药性表现的越来越突出,并具有多重耐药的趋势,给临床治疗带来了极大的困难。因此,选择杀菌力强的药物和行之有效的治疗方法是十分重要的。对此,我们采用中西药物联合药敏试验的方法,对造成泌尿系统感染的三种常见致病菌的抑菌效果进行观察。从本实验来看,大肠杆菌引起的感染中,复方新诺明与龙葵、鸭跖草、黄连等药物有不同程度协同作用,尤以龙葵、鸭跖草为甚。25ug复方新诺明对大肠杆菌抑菌圈面积为314㎜2,0.5ml的龙葵、鸭跖草煎液的抑菌面积同为79㎜2,二者联合的抑菌圈面积为533㎜2,显示具有协同作用,从而证明中西药物联用的协同作用可以提高西药抗生素的抑菌和杀菌作用。在本实验中还观察到中西药联用不仅可增强一种菌株对其敏感药物的抑菌和杀菌作用,对其他药物也有增强作用,从而证明中西药联用还具有多重抗菌的功能。但是,由大肠杆菌引起的感染中,与头孢氨苄和妥布霉素合用的中药,几乎都为拮抗作用。其中以紫花地丁与妥布霉素的拮抗作用最为明显。10ug妥布霉素对大肠杆菌的抑菌圈面积为615.44㎜2,0.5ml紫花地丁煎液的抑菌面积为113.04㎜2,二者联合的抑菌圈面积为200.96㎜2,提示有拮抗作用。在由变形杆菌引起的感染中,各种西药抗生素与中药合用也几乎都为拮抗作用。数据就不一一列举。从而证明不合理的中西药物联用不仅不能增强药物的抑菌作用,反而会产生拮抗作用,提示临床联合用药要谨慎。至于其中的机理以及最小协同/拮抗浓度,还有待于进一步研究。
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    表1 药敏纸片抑菌效果测定结果

    大肠杆菌绿脓杆菌变形杆菌

    复方新诺明19㎜无29㎜

    头孢氨苄21㎜无22㎜

    诺氟沙星42㎜39㎜40㎜

    庆大霉素30㎜25㎜26㎜

    妥布霉素28㎜31㎜27㎜

    表2 中西药联合药敏试验结果(致病菌为大肠杆菌),单位:毫米

    单用与SXT合用与CX合用与NOR合用与GM合用与TM合用

    连翘152922402526
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    虎杖113022382525

    丹皮无2118401525

    龙葵102620403029

    鸭跖草102620392324

    黄连142522402925

    黄柏132720392528

    半枝莲113021422826

    龙胆草无1314352725

    紫花地丁132621392017

    瞿麦133024462525

, http://www.100md.com     猪苓153224402929

    注:SXT:复方新诺明 CX:头孢氨苄 NOR:诺氟沙星 GM:庆大霉素 TM:

    妥布霉素

    致病菌为绿脓杆菌

    单用与SXT合用与CX合用与NOR合用与GM合用与TM合用

    连翘11.510无291924

    虎杖1115无282125

    丹皮131812271525

    龙葵12109292125

    黄连7118352527
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    黄柏162413252024

    半枝莲无109261824

    龙胆草121516262024

    紫花地丁141015282225

    小蓟121613332027

    瞿麦无1110352029

    金银花142118291519

    致病菌为变形杆菌

    单用与SXT合用与CX合用与NOR合用与GM合用与TM合用

    虎杖123022372525
, 百拇医药
    丹皮203025392025

    龙葵83425392826

    鸭跖草11.53024382224

    黄连131924402729

    黄柏143122402525

    半枝莲142522382527

    紫花地丁133022401830

    龙胆草123021352323

    小蓟无3526412133

    鱼腥草121527391516, 百拇医药(王玉杰)