顺铂对a549细胞DNa损伤修复的影响
DNA损伤修复系统对于肿瘤的发生和发展十分重要。华中科技大学同济医学院环境医学研究所研究了DNA损伤剂顺铂对切除修复鼠缺陷交叉互补基因2(ERCC2)、尿嘧啶DNA糖基化酶和细胞增殖核抗原(PCNA)在肺癌和食管癌组织中表达水平的影响。
方法：通过彗星实验、RT-PCR和蛋白印记法研究3种生物标记物在顺铂处理和未处理A549细胞之间的表达水平。分为5个不同时间段组，每组细胞数均为1×106个/毫升。结果：在低浓度顺铂(IC20剂量)作用下，染毒24小时内DNA损伤程度的变化与作用时间成正比，染毒12小时、24小时尾相(单位：毫米)与阴性对照的尾相比较有明显差异(P<0.001，P<0.0001)。停止染毒24小时尾相与阴性对照比较无明显差异(P>0.05)。ERCC2、UDG和PCNA的mRNA水平和蛋白质水平在细胞染毒后均明显升高。停止染毒后3种酶的mRNA和蛋白质水平与阴性对照比较无明显差异。在停止染毒后24小时mRNA水平均逐渐恢复正常。蛋白质的改变则比mRNA缓慢。
结论：DNA损伤对ERCC2、UDG和PCNA有快速正性调节作用，首先促进mR鄄NA表达水平的增加，然后促进蛋白水平的增加。但这种调节作用时间不长，停止染毒后短时间内可恢复到染毒前的水平。, 百拇医药
方法：通过彗星实验、RT-PCR和蛋白印记法研究3种生物标记物在顺铂处理和未处理A549细胞之间的表达水平。分为5个不同时间段组，每组细胞数均为1×106个/毫升。结果：在低浓度顺铂(IC20剂量)作用下，染毒24小时内DNA损伤程度的变化与作用时间成正比，染毒12小时、24小时尾相(单位：毫米)与阴性对照的尾相比较有明显差异(P<0.001，P<0.0001)。停止染毒24小时尾相与阴性对照比较无明显差异(P>0.05)。ERCC2、UDG和PCNA的mRNA水平和蛋白质水平在细胞染毒后均明显升高。停止染毒后3种酶的mRNA和蛋白质水平与阴性对照比较无明显差异。在停止染毒后24小时mRNA水平均逐渐恢复正常。蛋白质的改变则比mRNA缓慢。
结论：DNA损伤对ERCC2、UDG和PCNA有快速正性调节作用，首先促进mR鄄NA表达水平的增加，然后促进蛋白水平的增加。但这种调节作用时间不长，停止染毒后短时间内可恢复到染毒前的水平。, 百拇医药