点突变对KatG蛋白结构和功能的影响及SWISS-MODEL在KatG结构研究中的应用
目的 研究点突变影响结核分支杆菌KatG蛋白结构和功能的机制以及结核杆菌对异烟肼(INH)的耐药机制。
方法 以三步PCR法定向诱变KatG基因的3个位点，表达相应基因并纯化表达产物，定量比较野生型和诱变型KatG基因的过氧化氢-过氧化物酶(HmCP)活性及荧光光谱扫描结果。最后以Hakoarcuka marismortui来源的HmCP为模板，利用SWISS-MODEL服务器，模拟出了KatG蛋白的三维结构。根据这一模型，结合HmCP和细胞色素C氧化酶(CcP)的一些信息探讨了各点突变影响KatG蛋白结构和功能的可能机制。
结果 3个位点的点突变均可造成KatG HmCP活性不同程度的下降，R418Q突变可造成KatG蛋白激发荧光强度的明显下降，模拟出的KatG蛋白三维模型对几个点突变影响KatG功能的机制作出了结构上的合理解释。
结论 这3个点突变可能通过不同的机制影响KatG蛋白的结构和功能，本研究所建立的这个模型可以较好地反映KatG的大致结构，是进行KatG研究的有效工具，可用于指导下一步的研究，并可能为寻找抗结核新药提供一些信息。, 百拇医药(复旦大学附属华山医院传染科 莫凌 张文宏 王骥 中华医院感染病学分会主任委员 翁心华 目的 )