血友病携带者及产前检验诊断进展和评价(2)
(1)限制性片段长度多态性 目前PCR-RFLP仍是国内外对HB携带者进行诊断的主要方法。国内已有多篇报道，利用XmnI/EcorI、VⅢ/TaqI位点的RFLP正确诊断HB的携带者及进行产前诊断。
(2)可变数目串联重复序列 中国人已报导了两种VNTR：int13和DXS52 (st14)。其中DXS52在用做HA的基因诊断的同时，也可作为HB的遗传标志。
(3)短串联重复序列 1998年复旦大学遗传研究所利用扩增片段长度多态性(Amp-RFLP)对DXS102座位进行鉴定。发现DXS102位点为二核苷酸(AC)n并与人FIX紧密连锁(连锁度13.6，θ= 0.002),经证实中国人DXS102座位有8个等位片段，经PCR产物直接克隆测序后，证明其长度在145～161bp之间，和欧洲人群分布有明显种族差异。DXS102位点核心单位是AC二核苷酸，重复次数13-21，频率分布在0.013-0.156，杂合度0.87，多态信息量(PIC)0.80，是目前在GDB中所能查到最理想的应用于HB基因诊断的STR标志。2001年，上海瑞金医院联合应用距因子IX基因2cM以内的6个STR位点(DXS1192、DXS1211、DXS8094、DXS8013、DXS1227、DXS102)，对12个HB家系进行携带者及产前基因诊断，全部获得成功，经随访准确率为100%。虽然这些位点都位于FIX基因外，存在重组的危险，但是多个STR位点联合诊断明显的提高基因诊断的准确性及可诊断率，将诊断重组率减低至低于十万分之一，而6个STR位点累积识别能力即可诊断率可达到99.99%。
(4)单核苷酸多态性标记(single nucleotide polymorphism，SNP)：SNP是1996年美国麻省理工大学人类基因组研究中心提出的第三代遗传标志图谱，通过基因组内特定核苷酸位置上存在两种不同的碱基，确定基因组的多态性。SNP是二态遗传变异，尽管在变异程度上不如微卫星和小卫星DNA，但SNP在基因组中数量极大，估计人类基因组中至少存在300万SNP位点，明显高于STR，故就整体而言是一种具有更加普遍多态性的遗传标志。
由于DNA芯片、微阵列分析和高效液相层析等技术的发展，使得SNP的快速检测成为可能。3-4个相邻的SNP构成的染色体单体型可以有8-16种，相当于一个微卫星标记的多态性，更多个SNP构成的等位片段的数目信息含量更高，这将为遗传性疾病的定位、诊断起突破性作用。
SNP可广泛应用于血友病B的基因诊断，作为一种碱基替换，大多数为转换，且主要发生在GC序列上，多是C→T，这与血友病B突变热点一致。SNP检测将为血友病B携带者及产前诊断提供广阔前景。
HYS-MD-WM
2002-09-10, http://www.100md.com(王学锋)
(2)可变数目串联重复序列 中国人已报导了两种VNTR：int13和DXS52 (st14)。其中DXS52在用做HA的基因诊断的同时，也可作为HB的遗传标志。
(3)短串联重复序列 1998年复旦大学遗传研究所利用扩增片段长度多态性(Amp-RFLP)对DXS102座位进行鉴定。发现DXS102位点为二核苷酸(AC)n并与人FIX紧密连锁(连锁度13.6，θ= 0.002),经证实中国人DXS102座位有8个等位片段，经PCR产物直接克隆测序后，证明其长度在145～161bp之间，和欧洲人群分布有明显种族差异。DXS102位点核心单位是AC二核苷酸，重复次数13-21，频率分布在0.013-0.156，杂合度0.87，多态信息量(PIC)0.80，是目前在GDB中所能查到最理想的应用于HB基因诊断的STR标志。2001年，上海瑞金医院联合应用距因子IX基因2cM以内的6个STR位点(DXS1192、DXS1211、DXS8094、DXS8013、DXS1227、DXS102)，对12个HB家系进行携带者及产前基因诊断，全部获得成功，经随访准确率为100%。虽然这些位点都位于FIX基因外，存在重组的危险，但是多个STR位点联合诊断明显的提高基因诊断的准确性及可诊断率，将诊断重组率减低至低于十万分之一，而6个STR位点累积识别能力即可诊断率可达到99.99%。
(4)单核苷酸多态性标记(single nucleotide polymorphism，SNP)：SNP是1996年美国麻省理工大学人类基因组研究中心提出的第三代遗传标志图谱，通过基因组内特定核苷酸位置上存在两种不同的碱基，确定基因组的多态性。SNP是二态遗传变异，尽管在变异程度上不如微卫星和小卫星DNA，但SNP在基因组中数量极大，估计人类基因组中至少存在300万SNP位点，明显高于STR，故就整体而言是一种具有更加普遍多态性的遗传标志。
由于DNA芯片、微阵列分析和高效液相层析等技术的发展，使得SNP的快速检测成为可能。3-4个相邻的SNP构成的染色体单体型可以有8-16种，相当于一个微卫星标记的多态性，更多个SNP构成的等位片段的数目信息含量更高，这将为遗传性疾病的定位、诊断起突破性作用。
SNP可广泛应用于血友病B的基因诊断，作为一种碱基替换，大多数为转换，且主要发生在GC序列上，多是C→T，这与血友病B突变热点一致。SNP检测将为血友病B携带者及产前诊断提供广阔前景。
HYS-MD-WM
2002-09-10, http://www.100md.com(王学锋)