http://www.100md.com 2003年9月26日 彭天庆 杨英珍 Kandolf R Riesemann H

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     2.3 β-IFN mRNA的Northern转印和原位杂交检测Northern-blot检测简述如下：20ug总RNA(每个标本)经甲酚胺凝胶电泳后，用经处理而无RNA酶的双蒸水小心洗涤凝胶，使用50mmol/L氢氧化钠溶液作转移液，转移12h，紫外灯下查看以确保凝胶上的RNA基本转移到尼龙膜上，然后用2×SSC洗膜，室温晾干。杂交液探针浓度为1.4×10⁷cpm/ml，杂交温度为42℃，时间为20 h。置4℃放射自显影 6周观察结果。DNA-RNA原位杂交参照RNA-RNA原位杂交，但稍有不同：杂交前探针需在100℃变性5min ......