黄芪注射液对离体大鼠心脏功能及Na+-K+-交换ATP酶活性的影响(1)
黄芪为豆科植物，作为传统中药，具有益卫固表，利水消肿，托毒生肌及补中益气等作用[1]。现代药理学研究表明，黄芪对心血管系统、血液系统、肾功能、物质代谢及肿瘤疾病等均有良好的改善作用，能够扩张冠状动脉(冠脉)，改善心脏功能，增加抗缺氧能力，防止脂质过氧化[2,3]。但黄芪对心脏功能及能量代谢的直接作用作者未见研究报告。本试验采用Langendorff离体心脏灌流装置观察了黄芪注射液对正常离体大鼠心脏冠脉流量等各项指标及心肌细胞膜Na+-K+-交换ATP酶活性的影响。
材料
1 动物 Wistar种大鼠(普通级)40只，雄性，体重293 g±19 g。中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，合格证号：(医动字)第013039。
2 药物 黄芪注射液，10 g生药/mL,成都地奥九泓制药公司提供；维拉帕米注射液，5mg/2mL,广东省利民制药厂生产，批号841003；氯化钠(天津市塘沽化学试剂厂，批号850220)；氯化钾(北京市朝阳区化工厂，批号770412)；氯化钙(北京市红星化工厂，批号781107-1)；磷酸二氢钾(北京市红星化工厂，批号770318)；氯化镁(北京市红星化工厂，批号880517-1);碳酸氢钠(北京市芳草医药化工研制公司，批号851203)；葡萄糖(北京市红星化工厂，批号860706)。
方法
采用Langendorff方法作大鼠心脏灌流，灌流液为Krebs-Henseleit(K-H)液：氯化钠118 mmol/L(下同)，氯化钾4.75,氯化钙2.54, 磷酸二氢钾1.19, 氯化镁1.19,碳酸氢钠24.8,葡萄糖8.0;通以95%O2+5%CO2的饱和混合气体，用G2垂熔漏斗过滤。
手术操作 大鼠以戊巴比妥钠45 mg/kg腹腔麻醉，仰位固定，分离一侧股静脉，注入肝素125U/只，剪开胸壁，暴露心脏，在主动脉第1支头臂动脉发出处近端横断，速将心脏投入4℃灌流液中，冲洗冠状动脉中的残留血液，将心脏移到灌流装置下端，开始灌流。待心脏跳动规则后，在肺动脉起始处剪一小口，以利冠状血管回流液排出。将一蛙心夹夹在心尖部，连一换能器(型号TB-612T,日本光电公司)，接载波放大器(AP-601G,日本光电公司)，连接记录仪(RJG4022，日本光电公司)记录心肌收缩幅度。
实验分为5组，每组8只心脏：对照组(不含药的正常灌流液)；维拉帕米组用维拉帕米0.02mg/L;黄芪注射液组用黄芪注射液500mg/L,100mg/L及20mg/L。
灌流装置一侧为正常K-H液，进行正常生理灌流，另一侧为含维拉帕米或不同浓度黄芪注射液的K-H液，进行给药灌流，通过旋转三通变换灌流液；开始正常生理灌流后10min,调节记录仪，使心肌收缩幅度为20mm,进行给药灌流；于给药灌流前及给药灌流后的5，10，15，20及30min记录心肌收缩幅度、冠脉流量及心率等指标，以给药前值为100%，计算给药后值的变化百分率，结果进行统计学处理(t检验)。
试验结束后取心脏左心室心肌0.3g,以比色法[4]测定心肌细胞膜Na+-K+-交换ATP酶活性(721W微机型分光光度计，上海光学仪器厂)。
试验结果进行统计学处理，以t检验判断其显著性。, http://www.100md.com(刘建勋 马晓斌 王杨慧 王若竹 何民 赵德英)
材料
1 动物 Wistar种大鼠(普通级)40只，雄性，体重293 g±19 g。中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供，合格证号：(医动字)第013039。
2 药物 黄芪注射液，10 g生药/mL,成都地奥九泓制药公司提供；维拉帕米注射液，5mg/2mL,广东省利民制药厂生产，批号841003；氯化钠(天津市塘沽化学试剂厂，批号850220)；氯化钾(北京市朝阳区化工厂，批号770412)；氯化钙(北京市红星化工厂，批号781107-1)；磷酸二氢钾(北京市红星化工厂，批号770318)；氯化镁(北京市红星化工厂，批号880517-1);碳酸氢钠(北京市芳草医药化工研制公司，批号851203)；葡萄糖(北京市红星化工厂，批号860706)。
方法
采用Langendorff方法作大鼠心脏灌流，灌流液为Krebs-Henseleit(K-H)液：氯化钠118 mmol/L(下同)，氯化钾4.75,氯化钙2.54, 磷酸二氢钾1.19, 氯化镁1.19,碳酸氢钠24.8,葡萄糖8.0;通以95%O2+5%CO2的饱和混合气体，用G2垂熔漏斗过滤。
手术操作 大鼠以戊巴比妥钠45 mg/kg腹腔麻醉，仰位固定，分离一侧股静脉，注入肝素125U/只，剪开胸壁，暴露心脏，在主动脉第1支头臂动脉发出处近端横断，速将心脏投入4℃灌流液中，冲洗冠状动脉中的残留血液，将心脏移到灌流装置下端，开始灌流。待心脏跳动规则后，在肺动脉起始处剪一小口，以利冠状血管回流液排出。将一蛙心夹夹在心尖部，连一换能器(型号TB-612T,日本光电公司)，接载波放大器(AP-601G,日本光电公司)，连接记录仪(RJG4022，日本光电公司)记录心肌收缩幅度。
实验分为5组，每组8只心脏：对照组(不含药的正常灌流液)；维拉帕米组用维拉帕米0.02mg/L;黄芪注射液组用黄芪注射液500mg/L,100mg/L及20mg/L。
灌流装置一侧为正常K-H液，进行正常生理灌流，另一侧为含维拉帕米或不同浓度黄芪注射液的K-H液，进行给药灌流，通过旋转三通变换灌流液；开始正常生理灌流后10min,调节记录仪，使心肌收缩幅度为20mm,进行给药灌流；于给药灌流前及给药灌流后的5，10，15，20及30min记录心肌收缩幅度、冠脉流量及心率等指标，以给药前值为100%，计算给药后值的变化百分率，结果进行统计学处理(t检验)。
试验结束后取心脏左心室心肌0.3g,以比色法[4]测定心肌细胞膜Na+-K+-交换ATP酶活性(721W微机型分光光度计，上海光学仪器厂)。
试验结果进行统计学处理，以t检验判断其显著性。, http://www.100md.com(刘建勋 马晓斌 王杨慧 王若竹 何民 赵德英)