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编号:10304152
激光技术有利于分析RA基因表达
http://www.100md.com 2003年9月28日 Arthritis Rheum
     德国研究人员发现,激光介导显微切割和差异表达相结合可用于分析类风湿性关节炎患者滑膜特定部位的基因表达。

    目前分析类风湿性关节炎(RA)患者基因表达的方法主要是从培养的滑膜细胞或滑膜组织的活检标本中分离RNA。这种方法不能区别滑膜特定部位的基因表达。因此,雷根斯堡大学的Judex M博士及其同事建立了应用激光介导显微切割(LMM)和差异表达相结合的方法来分析RA患者滑膜特定组织部位的基因表达。本研究主要是确定该方法的各种参数,并评估其在分析基因表达方面的重要作用。

    他们应用微光束激光显微镜从RA患者滑膜组织的冰冻切片上获得细胞样本。分离RNA并应用巢式RAP-PCR进行差异显示分析。PCR的产物进行克隆和测序,然后应用原位杂交和免疫组织化学方法进一步确认这种差异表达。

    研究结果表明,RA滑膜组织的微切割切片大约含有600个细胞,足够RAP-PCR使用。该方法可以检测到很多基因的表达,并且这些表达的基因可以在mRNA和蛋白水平得到验证。

    Judex博士指出,LMM和RAP-PCR相结合提供了一种非常有价值的手段来分析滑膜特定部位的基因表达。先前已知的基因和一些未知的基因应用该技术都可以得到表达,并且本研究首次应用该方法分析了非恶性、多因素的炎症性疾病。, 百拇医药