胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-AA以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达
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第一军医大学南方医院脊柱骨病科 510515广州 金大地；瞿东滨；杨德鸿；陈建庭
生长物质|成骨细胞|基因|腺病毒|人,胰岛素样生长因子-1与血小板源生长因子-aa以及肿瘤生长因子β1基因克隆及其在腺病毒载体中的表达
参见附件(143kb)。
第一军医大学南方医院脊柱骨病科 510515广州 金大地；瞿东滨；杨德鸿；陈建庭
关键词：生长物质；成骨细胞；基因；腺病毒；人
摘要：目的 从正常的人体成骨细胞中克隆IGF 1、PDGF AA和TGFβ1三因子的编码蛋白基因,构建上述因子基因的高效表达重组腺病毒,旨在为基因治疗研究提供有效的工具。方法 培养正常人体成骨细胞,提取细胞总RNA ,RT PCR方法获得IGF 1、PDGF AA和TGFβ1的编码基因。将这些片段克隆到高效表达腺病毒载体Adeno X ,并经过HEK2 93细胞的包装,获得成熟的重组腺病毒。Western印迹法检测上述三因子的表达。利用成熟重组腺病毒感染成骨细胞,检测细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的改变。结果 重组T载体、重组腺病毒DNA和成熟的重组腺病毒体中均可得到IGF 1、PDGF AA和TGF ...
第一军医大学南方医院脊柱骨病科 510515广州 金大地；瞿东滨；杨德鸿；陈建庭
关键词：生长物质；成骨细胞；基因；腺病毒；人
摘要：目的 从正常的人体成骨细胞中克隆IGF 1、PDGF AA和TGFβ1三因子的编码蛋白基因,构建上述因子基因的高效表达重组腺病毒,旨在为基因治疗研究提供有效的工具。方法 培养正常人体成骨细胞,提取细胞总RNA ,RT PCR方法获得IGF 1、PDGF AA和TGFβ1的编码基因。将这些片段克隆到高效表达腺病毒载体Adeno X ,并经过HEK2 93细胞的包装,获得成熟的重组腺病毒。Western印迹法检测上述三因子的表达。利用成熟重组腺病毒感染成骨细胞,检测细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的改变。结果 重组T载体、重组腺病毒DNA和成熟的重组腺病毒体中均可得到IGF 1、PDGF AA和TGF ...
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