膀胱肿瘤|嵌合抗体|真核表达载体|CHO细胞

提高抗人膀胱癌人-鼠嵌合抗体的表达和抗体的功能鉴定

http://www.100md.com 北京大学泌尿外科研究所；解放军海军总医院中心实验室北京大学第一医院泌尿外科 100034；北京大学第一医院

    参见附件(394kb)。

     北京大学泌尿外科研究所；解放军海军总医院中心实验室北京大学第一医院泌尿外科 100034；北京大学第一医院同位素科白银；俞莉章；吕英谦；艾军魁；周丽君；张春丽；王琰

    关键词：膀胱肿瘤；嵌合抗体；真核表达载体；CHO细胞

    摘要：目的探讨人-鼠嵌合抗体ch-BD1体内和体外的表达和功能。方法用分子生物学方法得到系列弱化表达的双氢叶酸还原酶(DHFR)基因片段,将其克隆入载体pDHL-BD1中构建得系列弱化表达DHFR基因的人-鼠嵌合抗体pWSD1-BD1,pWSD2-BD1,和pWSD3-BD1。将这些嵌合抗体以及pDHL-BD1分别转染缺陷表达DHFR基因的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)/DHFR-细胞,以Northern印迹鉴定其DHFR基因表达水平。将不同浓度的氨甲蝶呤(MTX)加入转染细胞的培养液,测定上清中的抗体水平。用~(99m)标记纯化的ch-BD1,加入系列稀释的人膀胱癌EJ细胞溶液中,测定结合在细胞上的抗体放射活性,计算标记抗体的...

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