人胎儿表皮干细胞的体外分离培养及基因转染
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第四军医大学西京医院烧伤科 710032西安 丁国斌；陈璧；韩军涛；汤朝武；王波涛
细胞|培养的|干细胞|脂质体|哺乳动物腺病毒|转染
参见附件(91kb)。
第四军医大学西京医院烧伤科 710032西安 丁国斌；陈璧；韩军涛；汤朝武；王波涛
关键词：细胞；培养的；干细胞；脂质体；哺乳动物腺病毒；转染
摘要：目的 探讨人胎儿表皮干细胞体外分离培养的方法以及作为体外基因转染靶细胞的可行性。 方法 利用Ⅳ型胶原快速贴附法分离人胎儿表皮干细胞,以人胎儿成纤维细胞条件培养液配制表皮干细胞培养基,通过角蛋白19(K19)和整合素β1免疫组化染色、细胞周期分析及克隆形成率测定,对培养细胞进行鉴定。采用脂质体介导法,以含血管内皮细胞生长因子16 5 (VEFG16 5 )基因片段的真核表达载体pcDNA3 .1( pcDNA3.1/VEGF16 5 )转染培养细胞;采用病毒载体介导法,以含报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺相关病毒载体(raav/GFP)转染培养细胞。应用免疫组化染色及荧光显微...
第四军医大学西京医院烧伤科 710032西安 丁国斌；陈璧；韩军涛；汤朝武；王波涛
关键词：细胞；培养的；干细胞；脂质体；哺乳动物腺病毒；转染
摘要：目的 探讨人胎儿表皮干细胞体外分离培养的方法以及作为体外基因转染靶细胞的可行性。 方法 利用Ⅳ型胶原快速贴附法分离人胎儿表皮干细胞,以人胎儿成纤维细胞条件培养液配制表皮干细胞培养基,通过角蛋白19(K19)和整合素β1免疫组化染色、细胞周期分析及克隆形成率测定,对培养细胞进行鉴定。采用脂质体介导法,以含血管内皮细胞生长因子16 5 (VEFG16 5 )基因片段的真核表达载体pcDNA3 .1( pcDNA3.1/VEGF16 5 )转染培养细胞;采用病毒载体介导法,以含报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺相关病毒载体(raav/GFP)转染培养细胞。应用免疫组化染色及荧光显微...
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