执业药师考试辅导 黄酮类化合物——中药化学(十五)
5、黄酮类化合物常用分离方法有哪些？
一、柱色谱法
分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶及纤维素粉等。
1、硅胶柱色谱。主要适用于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化(或乙醚化)的黄酮及黄酮醇类。
2、聚酰胺柱色谱。对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下述规律：
①苷元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖苷、双糖苷、单糖苷、苷元。
② 苷元母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢。
, 百拇医药
③不同类型黄酮类化合物，洗脱先后顺序一般是：异黄酮、二氢黄酮、黄酮、黄酮醇。
④分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附，故查耳酮比相应的二氢黄酮难于洗脱。
3、葡聚糖凝胶(Sephadex gel)柱色谱。可用Sephadex G和Sephadex
LH-20。分离游离黄酮时，主要靠吸附作用，苷元的羟基数目越多，越难以洗脱；分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用，苷的分子量越大，其上联结糖的数目越多，越容易洗脱。
二、梯度pH萃取法
梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)后，依次用
, 百拇医药 5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH溶液萃取，来达到分离的目的。一般规律是具7，4’-二羟基者可溶于NaHCO3溶液，具7或4’-羟基者可溶于Na2CO3溶液，具一般酚羟基者可溶于0.2%NaOH溶液，具5-羟基者只能溶于4%NaOH溶液。
三、根据分子中某些特定官能团性质进行分离
有邻二酚羟基的黄酮可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的黄酮可被碱式醋酸铅沉淀，据此可将两类成分分离。
具有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此可与不具上述结构的黄酮类化合物分离。
6、黄芩中含有的黄酮类化合物有哪些？黄芩苷有何性质？如何提取？
黄芩主要含有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等黄酮类化合物。黄芩苷具有抗菌消炎、降转氨酶作用。黄芩素为黄芩苷的苷元，其磷酸酯钠盐可用于治疗过敏、喘息等疾病。
, 百拇医药
黄芩苷为淡黄色针晶，几乎不溶于水，难溶于甲醇、乙醇、丙酮，可溶于热乙酸。遇三氯化铁显绿色，遇醋酸铅生成橙红色沉淀。溶于碱及氨水中初显黄色，不久则变成棕黑色。经水解后生成的黄芩素分子中具有邻三酚羟基，易被氧化转为醌类衍生物而显绿色，这是保存或炮制不当的黄芩药材外观变绿色的原因。黄芩变绿色后，有效成分受到破坏，质量随之降低。
黄芩苷的提取多采用水煮提，加酸沉淀的方法。
7、葛根、银杏叶中含有的主要黄酮类化合物分别有哪些？
各有何主要药理活性？
(1)葛根：葛根主要含异黄酮类化合物，主要成分有大豆素、大豆苷、大豆素-7，4’-二葡萄糖苷及葛根素、葛根素-7-木糖苷。其中大豆素属于异黄酮苷元，大豆苷属于异黄酮氧苷，葛根素属于异黄酮碳苷。葛根总黄酮的分离可以使用氧化铝柱层析。葛根总异黄酮有增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作用。
, 百拇医药
(2)银杏叶：银杏叶中的黄酮类化合物有黄酮、黄酮醇及其苷类、双黄酮和儿茶素等。银杏叶黄酮具有扩张冠状血管和增加脑血流量的作用。
8、槐米、陈皮、满山红中含有的主要黄酮类化合物分别是什么？
各有何主要药理活性和理化性质？
(1)槐米：芦丁是其有效成分，苷元为槲皮素，属于黄酮醇类化合物。可用于治疗毛细血管脆性引起的出血症，并用作高血压的辅助治疗剂。
芦丁分子中因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露在空气中能缓缓变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性溶液中加热提取芦丁时，往往加入少量硼砂。
(2)陈皮：主要有效成分为橙皮苷，属于二氢黄酮，具有和芦丁相同的作用。
橙皮苷几乎不溶于冷水，在乙醇或热水中溶解度较大，可溶于吡啶、甘油、乙酸或稀碱溶液，不溶于稀矿酸、氯仿、丙酮、乙醚或苯中。与三氯化铁、金属盐类反映显色或生成沉淀，与盐酸-镁粉反应呈紫红色。
(3)满山红：满山红叶中含有杜鹃素。杜鹃素属于二氢黄酮，是祛痰有效成分，临床用于治疗慢性支气管炎。
杜鹃素为淡黄色片状结晶，与盐酸-镁粉反应呈粉红色，加热后变为玫瑰红色，与三氯化铁反应成草绿色。(刘 斌 北京中医药大学中药学院), 百拇医药
一、柱色谱法
分离黄酮类化合物常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺、葡聚糖凝胶及纤维素粉等。
1、硅胶柱色谱。主要适用于分离异黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮醇及高度甲基化(或乙醚化)的黄酮及黄酮醇类。
2、聚酰胺柱色谱。对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为理想的吸附剂。其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中羟基的数目与位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。黄酮类化合物从聚酰胺柱上洗脱时大体有下述规律：
①苷元相同，洗脱先后顺序一般是：参糖苷、双糖苷、单糖苷、苷元。
② 苷元母核上增加羟基，洗脱速度相应减慢。
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③不同类型黄酮类化合物，洗脱先后顺序一般是：异黄酮、二氢黄酮、黄酮、黄酮醇。
④分子中芳香核、共轭双键多者易被吸附，故查耳酮比相应的二氢黄酮难于洗脱。
3、葡聚糖凝胶(Sephadex gel)柱色谱。可用Sephadex G和Sephadex
LH-20。分离游离黄酮时，主要靠吸附作用，苷元的羟基数目越多，越难以洗脱；分离黄酮苷时，则分子筛的性质起主导作用，苷的分子量越大，其上联结糖的数目越多，越容易洗脱。
二、梯度pH萃取法
梯度pH萃取法适合于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。根据黄酮苷元酚羟基数目及位置不同其酸性强弱也不同的性质，可以将混合物溶于有机溶剂(如乙醚)后，依次用
, 百拇医药 5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH溶液萃取，来达到分离的目的。一般规律是具7，4’-二羟基者可溶于NaHCO3溶液，具7或4’-羟基者可溶于Na2CO3溶液，具一般酚羟基者可溶于0.2%NaOH溶液，具5-羟基者只能溶于4%NaOH溶液。
三、根据分子中某些特定官能团性质进行分离
有邻二酚羟基的黄酮可被醋酸铅沉淀，不具有邻二酚羟基的黄酮可被碱式醋酸铅沉淀，据此可将两类成分分离。
具有邻二酚羟基的黄酮可与硼酸络合，生成物易溶于水，借此可与不具上述结构的黄酮类化合物分离。
6、黄芩中含有的黄酮类化合物有哪些？黄芩苷有何性质？如何提取？
黄芩主要含有黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等黄酮类化合物。黄芩苷具有抗菌消炎、降转氨酶作用。黄芩素为黄芩苷的苷元，其磷酸酯钠盐可用于治疗过敏、喘息等疾病。
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黄芩苷为淡黄色针晶，几乎不溶于水，难溶于甲醇、乙醇、丙酮，可溶于热乙酸。遇三氯化铁显绿色，遇醋酸铅生成橙红色沉淀。溶于碱及氨水中初显黄色，不久则变成棕黑色。经水解后生成的黄芩素分子中具有邻三酚羟基，易被氧化转为醌类衍生物而显绿色，这是保存或炮制不当的黄芩药材外观变绿色的原因。黄芩变绿色后，有效成分受到破坏，质量随之降低。
黄芩苷的提取多采用水煮提，加酸沉淀的方法。
7、葛根、银杏叶中含有的主要黄酮类化合物分别有哪些？
各有何主要药理活性？
(1)葛根：葛根主要含异黄酮类化合物，主要成分有大豆素、大豆苷、大豆素-7，4’-二葡萄糖苷及葛根素、葛根素-7-木糖苷。其中大豆素属于异黄酮苷元，大豆苷属于异黄酮氧苷，葛根素属于异黄酮碳苷。葛根总黄酮的分离可以使用氧化铝柱层析。葛根总异黄酮有增加冠状动脉血流量及降低心肌耗氧量等作用。
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(2)银杏叶：银杏叶中的黄酮类化合物有黄酮、黄酮醇及其苷类、双黄酮和儿茶素等。银杏叶黄酮具有扩张冠状血管和增加脑血流量的作用。
8、槐米、陈皮、满山红中含有的主要黄酮类化合物分别是什么？
各有何主要药理活性和理化性质？
(1)槐米：芦丁是其有效成分，苷元为槲皮素，属于黄酮醇类化合物。可用于治疗毛细血管脆性引起的出血症，并用作高血压的辅助治疗剂。
芦丁分子中因含有邻二酚羟基，性质不太稳定，暴露在空气中能缓缓变为暗褐色，在碱性条件下更容易被氧化分解，硼酸盐能与邻二酚羟基结合，达到保护的目的，故在碱性溶液中加热提取芦丁时，往往加入少量硼砂。
(2)陈皮：主要有效成分为橙皮苷，属于二氢黄酮，具有和芦丁相同的作用。
橙皮苷几乎不溶于冷水，在乙醇或热水中溶解度较大，可溶于吡啶、甘油、乙酸或稀碱溶液，不溶于稀矿酸、氯仿、丙酮、乙醚或苯中。与三氯化铁、金属盐类反映显色或生成沉淀，与盐酸-镁粉反应呈紫红色。
(3)满山红：满山红叶中含有杜鹃素。杜鹃素属于二氢黄酮，是祛痰有效成分，临床用于治疗慢性支气管炎。
杜鹃素为淡黄色片状结晶，与盐酸-镁粉反应呈粉红色，加热后变为玫瑰红色，与三氯化铁反应成草绿色。(刘 斌 北京中医药大学中药学院), 百拇医药